检索结果-南通市图书馆

科学通报 1997年第22期42卷 2425-2427页

作者：龚为民滕脉坤刘四九牛立文滕脉坤牛立文中国科学技术大学生物系结构生物学青年实验室合肥230026 中国科学院生物物理研究所生物大分子国家重点实验室北京100101

出血毒素广泛存在于很多蛇毒中,它能引起动物的皮下、脑、肾以及心脏等组织的出血和坏死。80年代末以来,随着部分蛇毒出血毒素氨基酸序列的测定和生化性质的深入研究,发现大部分出血毒素都是含锌金属蛋白酶。根据蛇毒金属蛋白酶所包含的... 详细信息

出血毒素广泛存在于很多蛇毒中,它能引起动物的皮下、脑、肾以及心脏等组织的出血和坏死。80年代末以来,随着部分蛇毒出血毒素氨基酸序列的测定和生化性质的深入研究,发现大部分出血毒素都是含锌金属蛋白酶。根据蛇毒金属蛋白酶所包含的从N端到C端的功能结构域的数目,可将其分为4个类型:P-Ⅰ,P-Ⅱ,P-Ⅲ和P-Ⅳ。其中P-Ⅰ型分子量最小,只含蛋白酶结构域,是所有蛇毒含锌金属蛋白酶中共同的催化结构域。蛇毒金属蛋白酶活性区域的氨基酸序列与哺乳动物基底膜金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinase,MMP)高度相似,并且与MMP一样能作用于结缔组织的胶原蛋白,对细胞分化和肿瘤生长起着信号传递作用,同属于MMP超家族,是抗肿瘤和关节炎药物设计研究中重要的靶蛋白。同时,出血活性是蛇毒毒害作用的一个重要方面,出血毒素空间结构与功能关系研究将有利于对蛇毒出血活性机理的认识。迄今只有3种蛇毒金属蛋白酶的晶体结构得以测定,蛇毒金属蛋白酶的作用机理,特别是出血作用的分子机制还有待于进一步研究。中国皖南尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒中含有丰富的出血毒素。已有3种出血毒素(AaHⅠ,AaHⅢ,AaHⅣ)得以分离纯化和结晶。其中AaHⅢ分子量为22ku,等电点pI>9.0,具有酪蛋白水解酶活性。

关键词：出血毒素蛇毒晶体结构尖吻蝮蛇毒碱性

尖吻蝮蛇毒出血毒素I0.27nm分辨率晶体结构测定

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科学通报 1996年第17期41卷 1611-1614页

作者：龚为民滕脉坤牛立文中国科学技术大学生物系结构生物学青年实验室合肥230026

蛇毒含锌金属蛋白酶与基底膜金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)有着相似的活性区域和生物学功能,它们同属MMP超家族(MMP superfamily)。MMP超家族蛋白能水解基底膜上的胶原蛋白,对结缔组织细胞分化、基底膜形成和降解起着重要... 详细信息

蛇毒含锌金属蛋白酶与基底膜金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)有着相似的活性区域和生物学功能,它们同属MMP超家族(MMP superfamily)。MMP超家族蛋白能水解基底膜上的胶原蛋白,对结缔组织细胞分化、基底膜形成和降解起着重要的平衡作用。在人体中,这种子衡的失调常导致关节炎和肿瘤疾病。因此,MMP蛋白成为抗癌症和关节炎药物设计研究中的重要靶蛋白。1994年,两种蛇毒含锌金属蛋白酶:来自东部响尾蛇(eastern diamondback rattlesnake)的Adamalysin Ⅱ和来自西部响尾蛇(western diamondback rattlesnake)的Atrolysin C的晶体结构得到解析。但详细的作用机理,特别是出血作用机理目前尚不清楚。

关键词：晶体结构出血毒素金属蛋白酶蛇毒尖吻蝮蛇

中国皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅲ初步晶体学研究

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科学通报 1996年第6期41卷 544-546页

作者：朱中良龚为民牛立文滕脉坤中国科学技术大学结构生物学青年实验室合肥230026

1 引言出血毒素是广泛存在于很多蛇毒中的一种蛋白质,它能引起动物的局部组织出血和坏死,严重的可导致死亡。迄今发现的几乎所有出血毒素均为含锌金属蛋白酶,其氨基酸序列具有较高保守性。目前发现的许多蛇毒出血毒素能水解结缔组织基... 详细信息

1 引言出血毒素是广泛存在于很多蛇毒中的一种蛋白质,它能引起动物的局部组织出血和坏死,严重的可导致死亡。迄今发现的几乎所有出血毒素均为含锌金属蛋白酶,其氨基酸序列具有较高保守性。目前发现的许多蛇毒出血毒素能水解结缔组织基底膜上的蛋白,因此它们可作为关节炎和肿瘤治疗的靶蛋白。根据其分子量,出血毒素可分为3种类型:低分子量(20～30ku)、中分子量(30～60ku)和高分子量(60～90ku)。最近,两种蛇毒金属蛋白酶:来源于东部响尾蛇无出血活性的AdamalysinⅡ和来源于西部响尾蛇的出血毒素Atrolysin C的晶体结构已得到解析。虽然它们在出血活性表现上有较大差异,但它们的空间结构非常相似。目前的研究结果尚未对出血作用的机理作出空间结构上的解释。

关键词：蛇毒出血毒素晶体学尖吻蝮蛇

7号淀粉酶链霉菌M1033木糖异构酶基因的启动子活性检测、转录起始点的确定

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Acta Genetica Sinica 1995年第3期22卷 239-244页

作者：杭俊王玉珍戴新华崔涛牛立文王淳徐洵中国科学技术大学生物系

分别从重组质粒ｐＵＢ１及其Ｍ（１３）亚克隆Ｓ１中将７号淀粉酶链霉菌（ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓＮｏ．７）Ｍ１０３３（以下简称Ｓ．ｄｉ．Ｍ１０３３）木糖异构酶基因的－１９２－＋５８１ｂｐ片段克隆入链... 详细信息

分别从重组质粒ｐＵＢ１及其Ｍ（１３）亚克隆Ｓ１中将７号淀粉酶链霉菌（ＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｄｉａｓｔａｔｉｃｕｓＮｏ．７）Ｍ１０３３（以下简称Ｓ．ｄｉ．Ｍ１０３３）木糖异构酶基因的－１９２－＋５８１ｂｐ片段克隆入链霉菌启动子探测质粒ｐＩＪ４０８３中，转化变铅青链霉菌（Ｓ．ｌｉｖｉｄａｎｓ）ＴＫ２４。通过对其邻苯二酚加双氧酶活性的检测表明，该片段具有启动子活性。应用Ｍ１３亚克隆Ｓ１和合成引物Ｐ６延伸制备放射性标记的单链ＤＮＡ探针；通过Ｓ．ｄｉ．Ｍ１０３３的总ＲＮＡ的Ｓ１核酸酶保护实验，确定了其转录的起始位点，并由此探讨了与木糖异构酶基因表达有关的一些因素。

关键词：启动子转录起始位点链霉点木槽异构酶基因

源于困难关注经验促进理解与建构——“分桃子——两位数除以一位数”教学思考与设计

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小学数学教师 2012年第4期 17-24页

作者：牛立文北京市海淀区实验小学

教学背景竖式除法在四则运算中是最难的，它综合了加、减、乘、除四则运算，竖式的形式也与加减法和乘法有很大差别。竖式本身是非常抽象又简洁的符号，以至于有人说除法竖式是“变态”的竖式。冈为除法竖式的抽象导致学生学习起来极为... 详细信息

教学背景竖式除法在四则运算中是最难的，它综合了加、减、乘、除四则运算，竖式的形式也与加减法和乘法有很大差别。竖式本身是非常抽象又简洁的符号，以至于有人说除法竖式是“变态”的竖式。冈为除法竖式的抽象导致学生学习起来极为闲难．所以教师们在教学时不得不使用应对这个困难的“绝招”，

关键词：教学思考一位数两位数经验设计桃子四则运算教学背景

几个重组蛇毒金属蛋白酶的表达、重折叠及其生物学活性

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科学通报 2003年第17期48卷 1857-1863页

作者：向开军邹春森朱志强滕脉坤牛立文刘兢中国科学技术大学生命科学学院合肥230027

皖南尖吻蝮蛇毒出血金属蛋白酶acutolysin A除了具有引起动物皮下出血的活性外,还具有降解纤维蛋白原和纤黏连蛋白的活性.将acutolysin A以及非出血金属蛋白酶BR的cDNA分别克隆到原核表达载体pET-22b中,并在大肠杆菌中以包涵体的形式表... 详细信息

皖南尖吻蝮蛇毒出血金属蛋白酶acutolysin A除了具有引起动物皮下出血的活性外,还具有降解纤维蛋白原和纤黏连蛋白的活性.将acutolysin A以及非出血金属蛋白酶BR的cDNA分别克隆到原核表达载体pET-22b中,并在大肠杆菌中以包涵体的形式表达了这两个重组蛇毒金属蛋白酶,即A-22b和BR-22b.经变性和复性处理后,A-22b具有明显的出血活性,但没有对纤维蛋白原和纤黏连蛋白的水解活性;而BR-22b没有出血活性,却具有降解纤维蛋白原的活性.此外,通过PCR方法构建了两个嵌合体基因C1和C2.C1是由BR基因的5′端330 bp和acutolysin A的 3′端285 bp构成的嵌合体基因;C2是由acutolysin A基因的5′端324 bp和BR的3′端336 bp构成的嵌合体基因.将它们克隆进表达载体pET-22b中得到两个表达质粒,即pC-22b和pC2-22b.并以包涵体的形式表达了相应的两个重组蛋白,即C1-22b和C2-22b.经同样的变性和复性处理后,C1-22b与BR-22b类似,具有较强的纤维蛋白原水解活性,但没有出血活性.与A-22b相似,C2-22b具有出血活性但没有对这些蛋白的水解活性.这些结果暗示,蛇毒金属蛋白酶的N端主亚结构域在出血活性上很可能起关键作用并极大地影响酶对底物的选择性.

关键词：金属蛋白酶生物学活性尖吻蝮蛇毒克隆纤维蛋白原纤黏连蛋白降解表达

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皖南尖吻蝮蛇毒出血毒素Ⅳ的纯化与初步鉴定

生物化学杂志 1996年第3期12卷 357-359页

作者：朱中良龚为民牛立文滕脉坤中国科学技术大学结构生物学青年实验室

从皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素（简称ＡａＨⅣ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳... 详细信息

从皖南尖吻蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎａｃｕｔｕｓ）毒液中经ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ和ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－２００两步凝胶柱层析首次纯化出一种中分子量出血毒素（简称ＡａＨⅣ）．经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦凝胶电泳测定其分子量为４４ｋＤ，等电点为ｐＨ５．０．从５００ｍｇ粗毒中可获得２０ｍｇＡａＨⅣ纯品．ＡａＨⅣ有较强的出血活性，最小出血剂量（ＭＨＤ）为０．４μｇ．

关键词：尖吻蝮蛇蛇类出血毒素蛇毒蛋白提纯鉴定

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戮力同心共筑“中国梦

前进论坛 2013年第7期 21-22页

作者：牛立文衣工党安徽省委会主委

有华夏儿女生活的地方，就有中国梦想的高傲飞翔。在实现中华民族伟大复兴的历史节点上，“中国梦”就是穿越古今的回响、激荡百年的渴望。随着波澜壮阔的世纪铸梦大工程的启动，“中国梦”必将成为一代又一代炎黄子孙为之自豪、

关键词：中国梦伟大复兴中华民族大工程生活儿女

争当多党合作事业模范践行者——学习习近平总书记关于知识分子工作重要讲话精神体会

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前进论坛 2018年第2期 18-19页

作者：牛立文农工党安徽省委会

习近平总书记在参加全国政协十二届五次会议民进、农工党、九三学社联组会时,从战略和全局高度对知识分子为国家富强和民族复兴做出的重要贡献、肩负的时代使命和如何更好地发挥重要作用等方面作了精辟论述,同时提出全社会都要关心知识... 详细信息

习近平总书记在参加全国政协十二届五次会议民进、农工党、九三学社联组会时,从战略和全局高度对知识分子为国家富强和民族复兴做出的重要贡献、肩负的时代使命和如何更好地发挥重要作用等方面作了精辟论述,同时提出全社会都要关心知识分子、尊重知识分子,营造尊重知识、尊重知识分子的良好社会氛围’。近日;习近平总书记还对黄大年同志先进事迹做出重要指示。这既是对当今知识分子不负伟大时代重托的高度赞扬,更是对包括民主党派成员在内的广大知识分子的深刻勉励和殷殷期盼。

关键词：知识分子工作总书记习近平合作事业精神学习行者模范