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LIGHT在调节肥胖发生中的作用及机制研究

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LIGHT在调节肥胖发生中的作用及机制研究

第十二届全国免疫学学术大会

作者：寇艳波刘庆亚刘文丽吴琼张波韦艳霞汤仁仙郑葵阳王玉刚徐州医科大学

免疫系统在调节肥胖中的作用已越来越被人们所认识,LIGHT(Lymphotoxin-1ike Inducible protein that competes with Glycoprotein D for Herpes virus entry on T cells)作为免疫系统分泌的重要细胞因子,其在肥胖中的作用及可能的机理... 详细信息

免疫系统在调节肥胖中的作用已越来越被人们所认识,LIGHT(Lymphotoxin-1ike Inducible protein that competes with Glycoprotein D for Herpes virus entry on T cells)作为免疫系统分泌的重要细胞因子,其在肥胖中的作用及可能的机理目前并没有深入地认识。流行病学统计表明肥胖人群LIGHT表达量高于瘦人群体,且其含量与体重指数呈正相关。本研究结果显示高脂饮食诱导的肥胖小鼠皮下脂肪组织中LIGHT的表达量明显高于正常饮食小鼠,提示LIGHT可能对肥胖具有调控作用。进一步的研究证明LIGHT过表达可以强烈抑制脂肪前体细胞3T3-L1向米黄色脂肪细胞分化。米黄色脂肪细胞来源于白色脂肪组织,是机体代谢速率的重要调控者,对肥胖的发生发展具有抑制作用。因此推测高表达的LIGHT可能通过抑制米黄色脂肪的形成降低机体的能量消耗,造成体内能量物质堆积,促进肥胖发生。此项探究不仅对阐明肥胖的发生机制具有重要理论意义,而且对寻找预防和治疗肥胖的方法及药物新靶点也具有长远的现实意义。

关键词： LIGHT 肥胖脂肪细胞分化米黄色脂肪细胞

来源： cnki会议评论

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米黄色脂肪细胞诱导分化方法研究

河南科技大学学报（医学版） 2019年第1期37卷 6-9页

作者：寇艳波刘庆亚张波汤仁仙王玉刚徐州医科大学江苏省免疫与代谢重点实验室江苏徐州221004

目的建立米黄色脂肪细胞分化的方法并进行分析。方法通过诱导物刺激使脂肪前体细胞3T3-L1向米黄色脂肪细胞分化。细胞分化完成后经油红染色检测胞内脂滴的形成,经荧光定量PCR和Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ,Prdm16和... 详细信息

目的建立米黄色脂肪细胞分化的方法并进行分析。方法通过诱导物刺激使脂肪前体细胞3T3-L1向米黄色脂肪细胞分化。细胞分化完成后经油红染色检测胞内脂滴的形成,经荧光定量PCR和Western blot检测米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ,Prdm16和Ucp1的表达,确定分化成熟的细胞是米黄色脂肪细胞。经转录测序分析脂肪前体细胞和米黄色脂肪细胞差异表达基因及KEGG pathway富集情况。结果采用本研究中的诱导分化方法得到的分化细胞油红染色阳性,米黄色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ、Prdm16、Ucp1均高表达,转录测序显示分化后细胞与未分化细胞基因表达差异较大。结论本研究建立的米黄色脂肪细胞分化的方法准确可靠,可用于米黄色脂肪细胞形成调控机制等研究。

关键词：米黄色脂肪细胞分化肥胖 3T3-L1

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儿茶素对脂肪前体细胞增殖和分化的影响

转化医学电子杂志 2018年第12期5卷 7-10页

作者：寇艳波刘庆亚张波汤仁仙王玉刚徐州医科大学江苏省免疫与代谢重点实验室江苏徐州221004

目的:探究儿茶素对脂肪前体细胞增殖的影响及其对脂肪前体细胞向白色和米黄色脂肪细胞分化的影响。方法:通过油红染色检测胞内脂滴形成情况。通过Western blot检测白色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ、p-HSL、Perilipin 1及米黄色脂肪细胞标... 详细信息

目的:探究儿茶素对脂肪前体细胞增殖的影响及其对脂肪前体细胞向白色和米黄色脂肪细胞分化的影响。方法:通过油红染色检测胞内脂滴形成情况。通过Western blot检测白色脂肪细胞标志性蛋白Pparγ、p-HSL、Perilipin 1及米黄色脂肪细胞标志性蛋白Prdm16和Ucp1,通过荧光定量PCR检测米黄色脂肪细胞标志性基因的转录。结果:儿茶素能够抑制脂肪前体细胞3T3-L1的增殖,抑制脂滴的形成,抑制白色脂肪细胞中Pparγ、p-HSL、Perilipin 1的表达,不影响米黄色脂肪细胞中Prdm16、Ucp1的表达。结论:儿茶素能够抑制脂肪前体细胞增殖,抑制脂肪前体细胞向白色脂肪细胞分化,但不影响脂肪前体细胞向米黄色脂肪细胞分化。

关键词：儿茶素脂肪细胞细胞分化

乙型肝炎病毒X基因对正常肝细胞HL7702凋亡影响的初步探讨

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徐州医学院学报 2008年第4期28卷 217-221页

作者：石红丽范宝峰尤红娟刘晓梅史震汤仁仙徐州医学院病原微生物学教研室江苏徐州221002

目的研究乙型肝炎病毒X基因(HBX基因)对HL7702肝细胞凋亡及凋亡相关因子表达的影响。方法用脂质体转染法将HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-X瞬时转入HL7702细胞,以转染空质粒pcDNA3.1(+)的细胞及未转染的HL7702细胞为对照。转染后72 h收集... 详细信息

目的研究乙型肝炎病毒X基因(HBX基因)对HL7702肝细胞凋亡及凋亡相关因子表达的影响。方法用脂质体转染法将HBx真核表达载体pcDNA3.1(+)-X瞬时转入HL7702细胞,以转染空质粒pcDNA3.1(+)的细胞及未转染的HL7702细胞为对照。转染后72 h收集细胞标本,作以下处理:RT-PCR法检测HBXmRNA的表达,免疫荧光鉴定HBx蛋白的表达;流式细胞术检测细胞凋亡率;以β-actin为内参,半定量RT-PCR法检测凋亡相关基因Bax、Bcl-2 mRNA的表达量变化。结果转染72 h后,转染pcDNA3.1(+)-X真核表达载体的HL7702细胞经RT-PCR扩增出HBX片段,免疫荧光结果显示细胞内出现HBx蛋白的较强荧光;而转染空质粒组及未转染对照组经RT-PCR法及免疫荧光检测均显示无HBx表达。通过流式细胞术和半定量RT-PCR法检测细胞凋亡情况,结果显示:转染HBX的细胞凋亡率(3.38%±0.67%)相对于转染空质粒组(1.25%±0.30%)及未转染质粒组(1.40%±0.37%)凋亡率增高,差异均有显著性意义(P0.05)。结论成功将HBX转染入HL7702细胞,并在细胞中表达;转染后72 h HBx可上调Bax表达,而下调Bcl-2表达,表明HBx能促进HL7702细胞凋亡。

关键词：乙型肝炎病毒X基因 HL7702 细胞凋亡

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CBL应用于医学微生物理论教学的初步探索

中国高等医学教育 2014年第6期 100-101页

作者：尤红娟刘晓梅李小翠孙伟郑葵阳刘莹汤仁仙徐州医学院徐州医学院高教研究所江苏徐州221004

针对医学微生物学的课程特点,对五年制临床医学的部分学生采用CBL教学,并比较CBL与LBL的教学效果。结果表明,CBL组学生的表达能力、自主学习能力、创新思维能力、团队协作能力明显提高,可为医学微生物学教学改革提供借鉴。

关键词： CBL 医学微生物学教学改革

白藜芦醇促TRAIL诱导PC-3细胞凋亡的作用

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中国当代医药 2014年第36期21卷 8-10,17页

作者：李小翠尤红娟李向阳华慧汤仁仙徐州医学院病原生物学与免疫学教研室徐州221004

目的研究白藜芦醇(Res)促进肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白诱导人前列腺癌细胞PC-3凋亡的作用。方法实验分为TRAIL蛋白组以及联合应用白藜芦醇和TRAIL蛋白的联合用药组;采用CCK8法检测细胞增殖情况,确定白藜芦醇的用药浓度;通... 详细信息

目的研究白藜芦醇(Res)促进肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)蛋白诱导人前列腺癌细胞PC-3凋亡的作用。方法实验分为TRAIL蛋白组以及联合应用白藜芦醇和TRAIL蛋白的联合用药组;采用CCK8法检测细胞增殖情况,确定白藜芦醇的用药浓度;通过CCK8法、流式细胞术检测TRAIL蛋白组、联合用药组细胞增殖和凋亡情况;分光光度法检测两组细胞caspase-8、caspase-3活性。结果 CCK8结果提示白藜芦醇的用药浓度为50μmol/L;联合用药组PC-3细胞的增殖率明显低于TRAIL蛋白组(P<0.05);流式细胞术检测结果显示,联合用药组PC-3细胞的凋亡率明显高于TRAIL蛋白组(P<0.05);caspase活性检测结果显示,联合用药组PC-3细胞caspase-8、caspase-3的活性明显高于TRAIL蛋白组(P<0.05)。结论白藜芦醇能够促进TRAIL蛋白诱导的PC-3细胞凋亡,为肿瘤的生物学治疗提供新的材料。

关键词：肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体白藜芦醇 PC-3 凋亡

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人TRAIL基因原核表达载体的构建及鉴定

现代生物医学进展 2011年第7期11卷 1220-1223页

作者：刘转转郝林范涛贺厚光尤红娟汤仁仙韩从辉徐州医学院病原生物与免疫学教研室江苏徐州221004 徐州市中心医院泌尿外科江苏徐州221009

目的:克隆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因片段(114～281氨基酸残基)并构建原核表达载体。方法:取健康人外周血提取总RNA,设计合成引物并引入EcoR I和Xho I酶切位点,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pGEX-6... 详细信息

目的:克隆肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因片段(114～281氨基酸残基)并构建原核表达载体。方法:取健康人外周血提取总RNA,设计合成引物并引入EcoR I和Xho I酶切位点,RT-PCR扩增TRAIL基因的胞外区片段,克隆入原核表达载体pGEX-6P-1中,经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆。结果:从外周血cDNA中扩增出501 bp的目的片段,测序结果证实成功构建重组质粒pGEX-6P-1/TRAIL。结论:成功构建TRAIL基因的原核表达载体pGEX-6P-1/TRAIL,为肿瘤细胞的凋亡研究提供理论依据。

关键词： TRAIL RT-PCR 克隆

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导师制下生物科学专业本科生培养的探讨

继续医学教育 2019年第10期33卷 29-30页

作者：刘晓梅孔凡运尤红娟周峰郑葵阳汤仁仙徐州医科大学病原生物学与免疫学教研室/基础医学国家级实验教学示范中心

随着社会对生物科学技术人才素质和能力要求的提高,以课堂教学为主的培养模式已经无法满足对生科专业本科生的培养要求.本科生导师制是深化高校本科教育教学改革的一种新尝试.导师制的实施不仅有利于学生的创新思维和科研能力的提高,也... 详细信息

随着社会对生物科学技术人才素质和能力要求的提高,以课堂教学为主的培养模式已经无法满足对生科专业本科生的培养要求.本科生导师制是深化高校本科教育教学改革的一种新尝试.导师制的实施不仅有利于学生的创新思维和科研能力的提高,也有利于导师对学生进行因材施教.结合我校生物科学专业学生培养的实际情况,对生物科学专业学生导师制的特点和实施过程给予总结,并简要阐述开展导师制取得的成绩及不足.

关键词：生物科学专业导师制学生培养教学改革本科教育探讨

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快速斑点酶标法检测抗丝聚蛋白抗体

延安大学学报（医学科学版） 2014年第4期12卷 1-4页

作者：秦苏萍李慧王晓天李小翠郑葵阳汤仁仙徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004

目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常... 详细信息

目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常健康者血清的AFA。检测中采用不同浓度的丝聚蛋白、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体,摸索检测条件。确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA和ELISA法检测100例RA患者和150例包括系统性红斑狼疮（SLE）、强直性脊柱炎等非RA的自身免疫病患者和50例健康者血清的AFA,比较两种方法检测AFA的一致性,并判断R-Dot-ELISA检测AFA对RA的诊断价值。结果丝聚蛋白浓度为40-160μg/m L,封闭液为含1%BSA和10%小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80-1∶320是较合适的检测条件。R-Dot-ELISA与ELISA法检测AFA,结果一致率为98%（r=0.947,P〈0.05）,对RA诊断的敏感度、特异度等统计学指标无差异。结论 R-Dot-ELISA检测AFA快速、简便,且对RA的诊断具有较高的敏感性及特异性,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断。

关键词：快速斑点酶标法抗丝聚蛋白抗体类风湿性关节炎