快速斑点酶标法检测抗丝聚蛋白抗体

作     者：秦苏萍 李慧 王晓天 李小翠 郑葵阳 汤仁仙 QIN Su-ping;LI Hui;WANG Xiao-tian;LI Xiao-cui;ZHENG Kui-yang;TANG Ren-xian

作者机构：徐州医学院病原生物学与免疫学教研室江苏徐州221004 

出 版 物：《延安大学学报（医学科学版）》 (Journal of Yan'an University:Medical Science Edition)

年 卷 期：2014年第12卷第4期

页      面：1-4页

学科分类：1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81171590) 

主　　题：快速斑点酶标法 抗丝聚蛋白抗体 类风湿性关节炎 

摘      要：目的建立一种快速、简便的抗丝聚蛋白抗体（anti-filaggrin antibody,AFA）的检测方法。方法采用快速斑点酶标法（Rapid-Dot-ELISA,R-Dot-ELISA）检测15份AFA阳性的类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者和15份AFA阴性的正常健康者血清的AFA。检测中采用不同浓度的丝聚蛋白、不同的封闭液、不同浓度的酶标抗体,摸索检测条件。确定检测条件后,采用R-Dot-ELISA和ELISA法检测100例RA患者和150例包括系统性红斑狼疮（SLE）、强直性脊柱炎等非RA的自身免疫病患者和50例健康者血清的AFA,比较两种方法检测AFA的一致性,并判断R-Dot-ELISA检测AFA对RA的诊断价值。结果丝聚蛋白浓度为40-160μg/m L,封闭液为含1%BSA和10%小牛血清的PBS,酶标抗体稀释度为1∶80-1∶320是较合适的检测条件。R-Dot-ELISA与ELISA法检测AFA,结果一致率为98%（r=0.947,P〈0.05）,对RA诊断的敏感度、特异度等统计学指标无差异。结论 R-Dot-ELISA检测AFA快速、简便,且对RA的诊断具有较高的敏感性及特异性,适用于基层流行病学调查和临床快速诊断。