检索结果-南通市图书馆

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

公路桥梁桩基础病害成因及处治方案

设备管理与维修 2023年第14期 152-153页

作者：栗洪星保定市交通运输局公路事业发展中心河北保定071000

结合工程实例,对基础病害情况及成因进行总结,分析基础入岩深度的现状,提出相应处治方案,总结施工要点及注意事项。结果表明,该处治方案充分考虑了施工的复杂程度、经济性、合理性和美观性等,解决了基础安全隐患,保证桥梁结构安全。

关键词：公路桥梁桩基础病害成因处治方案

重组人成骨生长肽对化疗小鼠白细胞减少的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

哈尔滨医科大学学报 2007年第4期41卷 320-323页

作者：刘远莉李冀宏张宇雯马洪星栗亚刘兴汉哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室

目的研究重组人成骨生长肽(rhOGP)对环磷酰胺(Cy)化疗损伤小鼠白细胞减少的影响;观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法用Cy腹腔注射每日100mg/kg,连续3d,造成小鼠的化疗损伤模型。拮抗实验中,分别给予低、... 详细信息

目的研究重组人成骨生长肽(rhOGP)对环磷酰胺(Cy)化疗损伤小鼠白细胞减少的影响;观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法用Cy腹腔注射每日100mg/kg,连续3d,造成小鼠的化疗损伤模型。拮抗实验中,分别给予低、高剂量的rhOGP,连续13d,采用皮下注射给药途径,于第0d、第4d(Cy造模后)、第9d、第14d检测外周血白细胞(WBC)数变化。预防实验中,分别给予rhOGP、DTT与生理盐水,连续10d,并于第8、9、10d同时给予Cy,分别于实验前、实验后记取外周血WBC数。利用MTT法和细胞生长曲线观察rhOGP对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。结果rhOGP能促进Cy损伤小鼠WBC数的恢复,高、低剂量组间略有差异。rhOGP能明显降低Cy损伤小鼠外周血白细胞减少的幅度。rhOGP对人肺腺癌Anip细胞及人胃癌SGC-7901细胞的增殖无明显促进作用。结论rhOGP可促进Cy损伤小鼠外周血白细胞的恢复,rhOGP对Cy化疗小鼠白细胞数减少有预防作用,且对人肺腺癌Anip细胞和人胃癌SGC-7901细胞的增殖无促进作用,提示rhOGP作为肿瘤治疗辅助用药的潜在价值。

关键词：重组人成骨生长肽白细胞数环磷酰胺

穿膜肽-凋亡蛋白融合蛋白导入人脐静脉内皮细胞和人肺腺癌Anip973细胞的生物学特性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国临床康复 2006年第20期10卷 104-106页

作者：陶站华刘兴汉张宇雯马洪星刘远莉栗亚黑龙江省生物医药工程重点实验室哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:在大肠杆菌内表达穿膜肽与凋亡蛋白的融合蛋白,观察其诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的活性,并了解其是否有剂量依赖性。方法:实验于2005-08/2006-01在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。①在大肠杆菌中表达穿膜肽-凋亡... 详细信息

目的:在大肠杆菌内表达穿膜肽与凋亡蛋白的融合蛋白,观察其诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的活性,并了解其是否有剂量依赖性。方法:实验于2005-08/2006-01在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。①在大肠杆菌中表达穿膜肽-凋亡蛋白并用IDA-Ni2+亲和层析纯化。②细胞增殖抑制实验:取对数生长期人脐静脉内皮细胞和Anip973细胞接种于96孔培养板中,培养12h后加入终浓度分别为0,10,20,30,40,50mg/L融合蛋白培养48h,弃上清,每孔中加入四甲基偶氮唑盐溶液穴5g/L雪20μL,继续孵育4h,检测吸光度,计算肿瘤生长抑制率。③取对数生长期人脐静脉内皮细胞、Anip973细胞,每种细胞分成两组:给药组加入终浓度为30mg/L穿膜肽-凋亡蛋白,对照组加入相同体积的磷酸盐缓冲液,继续培养48h。苏木精-伊红染色,光镜下观察细胞形态;溴乙啶/丫啶橙荧光染色观察细胞凋亡率。结果:①细胞增殖抑制实验结果表明浓度为10～50mg/L穿膜肽-凋亡蛋白对人脐静脉内皮细胞没有明显抑制作用,对Anip973细胞呈剂量依赖性抑制作用,半数抑制浓度为27mg/L。②30mg/L穿膜肽-凋亡蛋白作用48h后,人脐静脉内皮细胞形态没有显著改变,对照组和给药组的凋亡率分别为穴2.9±0.4雪%和穴3.1±0.6雪%,没有显著差异(P>0.05);Anip973细胞可见到细胞皱缩,染色质浓缩和出现凋亡小体等凋亡特征性形态变化,给药组和对照组凋亡率分别为穴36.8±1.7雪%和穴6.7±0.5雪%,差异显著(P<0.01)。结论:穿膜肽-凋亡蛋白能诱导肿瘤细胞凋亡,这种作用呈剂量依赖性,而对正常细胞没有毒性作用。

关键词：肿瘤细胞凋亡抗肿瘤药重组融合蛋白质类

TAT-凋亡素融合蛋白的表达及其抗肿瘤活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国生物化学与分子生物学报 2006年第7期22卷 535-541页

作者：陶站华刘兴汉张宇雯马洪星刘远莉栗亚李丹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室

凋亡素(apoptin)由鸡贫血病毒vp3基因编码,能特异地诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞没有毒性.为了获得可转导入细胞内部的凋亡素,将人工合成的编码TAT蛋白转导结构域的DNA片段与凋亡素编码基因克隆入质粒pET-28a内,构建出表达融合蛋白TAT-... 详细信息

凋亡素(apoptin)由鸡贫血病毒vp3基因编码,能特异地诱导肿瘤细胞凋亡而对正常细胞没有毒性.为了获得可转导入细胞内部的凋亡素,将人工合成的编码TAT蛋白转导结构域的DNA片段与凋亡素编码基因克隆入质粒pET-28a内,构建出表达融合蛋白TAT-apoptin的原核表达载体pET-28a-TAT-apoptin.在大肠杆菌Rosetta(DE3)中表达融合蛋白,利用IDA-Ni2+亲和柱纯化,葡聚糖凝胶G25除去尿素后得到可溶的变性蛋白.纯化后的TAT-apoptin加入体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)和人肺癌Anip973细胞,对照组加入TAT-麦芽糖结合蛋白(TAT-MBP).经免疫组化检测,转导1h后TAT-MBP分布于以上两种细胞的胞浆和胞核,TAT-apoptin则主要分布于2种细胞的胞浆内,转导24h后TAT-MBP的亚细胞定位没有变化,TAT-apoptin分别定位于HUVECs的胞浆和Anip973的胞核中.脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)显示转导48h后,TAT-MBP处理过的HUVECs和Anip973细胞、TAT-apoptin处理过的HUVECs没有明显改变,而TAT-apoptin处理过的Anip973细胞大量凋亡.以上结果表明TAT-apoptin融合蛋白在肿瘤治疗上有潜在的应用价值.

关键词：凋亡凋亡素蛋白质转导肿瘤治疗

肿瘤抑素相关肽T42对人脐静脉内皮细胞和人胃腺癌细胞的抑制作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国组织工程研究与临床康复 2007年第10期11卷 1837-1840页

作者：栗亚刘兴汉林雪松马洪星张宇雯李冀宏刘远莉李丹黑龙江省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江省生物医药工程重点实验室黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学大庆校区检验系黑龙江省大庆市163319

目的:观察大肠杆菌内表达的pTYB2-T42重组质粒经纯化后获得的肿瘤抑素相关肽T42,在体外对人脐静脉内皮细胞及肿瘤细胞的抑制作用。方法:实验于2006-06/11在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关... 详细信息

目的:观察大肠杆菌内表达的pTYB2-T42重组质粒经纯化后获得的肿瘤抑素相关肽T42,在体外对人脐静脉内皮细胞及肿瘤细胞的抑制作用。方法:实验于2006-06/11在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。在大肠杆菌中表达肿瘤抑素相关T42肽并用几丁质亲和层析纯化。采用四甲基偶氮唑盐比色法研究10～200mg/L肿瘤抑素相关肽T42、T19、T21、T19+T21半量联合和顺铂对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞生长的影响,采用苏木精-伊红染色检测40mg/LT42肽作用24h后对细胞形态的影响,划痕修复实验研究40mg/LT42肽和40mg/L的T19肽+T21肽半量联合分别作用24,48h后对细胞迁移的影响。结果:①四甲基偶氮唑盐试验表明10～200mg/LT42肽对人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞有明显抑制作用且呈剂量依赖性,IC50分别为45mg/L和51mg/L。②40mg/LT42肽作用24h后可见人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃癌细胞单个凋亡细胞与周围细胞分离,细胞皱缩呈圆形或卵圆,深染,染色质边集。③40mg/L的T42肽单独作用24h或者48h均可明显抑制人脐静脉内皮细胞、人SGC-7901胃癌细胞的迁移(P0.05)。结论:T42肽能抑制人脐静脉内皮细胞和人SGC-7901胃腺癌细胞的生长及迁移,其抗肿瘤细胞作用强于T21肽,抑制内皮细胞增殖作用强于T19肽,抑制细胞增殖活性与T19肽+T21肽半量联合用药基本相同。

关键词：肿瘤抗血管活性抗肿瘤活性组织构建

Puma基因转染对胃癌SGC-7901细胞的促凋亡作用及机制

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国肿瘤 2008年第2期17卷 137-141页

作者：张宇雯刘兴汉马洪星曲天舒李冀红栗亚哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086

[目的]探讨puma基因转染对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。[方法]应用脂质体介导重组真核表达载体pEGFP-C1-PUMA瞬时转染至SGC-7901细胞。分别用荧光显微镜和RT-PCR法检测外源基因的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑... 详细信息

[目的]探讨puma基因转染对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。[方法]应用脂质体介导重组真核表达载体pEGFP-C1-PUMA瞬时转染至SGC-7901细胞。分别用荧光显微镜和RT-PCR法检测外源基因的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑制,Hoechst33342染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期和线粒体膜电位的变化,Westernblot检测细胞色素C(CytC)和凋亡诱导因子(AIF)的转位。[结果]外源性puma基因在pEGFP-C1-PUMA转染的SGC-7901细胞中实现了表达。PUMA表达使SGC-7901细胞的增殖能力降低并诱导凋亡,转染24、48、72h的生长抑制率分别为19.3%、34.7%、42.2%,凋亡率分别为19.6%、35.4%、46.6%。PUMA表达的SGC-7901细胞DNA合成受到抑制,周期阻滞在G0/G1期;线粒体膜电位明显下降,CytC、AIF从线粒体进入胞浆。[结论]puma基因转染可有效抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,促进其凋亡。促凋亡机制主要是线粒体途径,与线粒体膜电位降低和CytC、AIF从线粒体释放有关。

关键词： puma基因凋亡胃肿瘤线粒体

人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

医学分子生物学杂志 2007年第6期4卷 475-479页

作者：李丹刘兴汉赵炜明李冀宏马洪星张宇雯栗亚哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨市150081

目的克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽，检测其生物活性。方法人工合成人内皮抑素1—30位氨基酸（30肽，序列25—31由RGIRGAD改为RGDRGD）所对应的核苷酸序列，连接到质粒pTYB2中，再转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，几丁质亲和... 详细信息

目的克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽，检测其生物活性。方法人工合成人内皮抑素1—30位氨基酸（30肽，序列25—31由RGIRGAD改为RGDRGD）所对应的核苷酸序列，连接到质粒pTYB2中，再转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽。通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性。结果 MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）、胃癌7901细胞（SGC-7901）半数抑制浓度IC50为36μg／ml、47μg／nl，显著低于内皮抑素IC50179μg／ml、202μg／ml。CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强。30肽在小鼠体内抑瘤率47．8％，效果优于内皮抑素28．7％。结论 30肽具有更强抗肿瘤活性，有可能成为治疗肿瘤的一种新药物。

关键词：内皮抑素 RGD序列克隆基因表达抗肿瘤活性

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

人肿瘤抑素相关T21RGD肽的表达与纯化

国际遗传学杂志 2007年第3期30卷 169-172页

作者：马洪星栗亚张宇雯李冀宏刘岩刘远莉李丹刘兴汉黑龙江省部共建国家重点实验室培育基地一黑龙江省生物医药工程重点实验室哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室

目的构建引入RGD序列人肿瘤抑素相关21肽(T21RGD)-内含肽-几丁质结合蛋白融合表达载体,实现目的肽的几丁质珠亲和层析一步纯化。方法人工设计合成T21RGD肽基因,经重组定向克隆插入到原核表达载体pTYB2,酶切和测序鉴定正确后转化入大肠杆... 详细信息

目的构建引入RGD序列人肿瘤抑素相关21肽(T21RGD)-内含肽-几丁质结合蛋白融合表达载体,实现目的肽的几丁质珠亲和层析一步纯化。方法人工设计合成T21RGD肽基因,经重组定向克隆插入到原核表达载体pTYB2,酶切和测序鉴定正确后转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导其融合表达,对表达蛋白进行几丁质珠亲和层析,DTY诱导柱上裂解以获得T21RGD肽。经Trcine- SDS-PAGE和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对纯化产物进行鉴定。结果质粒酶切和测序结果显示,含T21RGD肽基因按正确方向和序列插入质粒,融合蛋白表达量达菌体蛋白总量的50%以上,Trcine- SDS-PAGE显示了T21RGD肽目的条带与预期相符,反相高效液相色谱测定峰纯度达97%。结论成功构建T21RGD肽融合表达载体,实现了融合蛋白在大肠杆菌中高效表达和T21RGD肽几丁质珠亲和层析一步纯化,为进一步研究T21RGD肽抗肿瘤活性和作用机制奠定基础。

关键词：肿瘤抑素 RGD序列基因重组纯化