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载三氟拉嗪介孔二氧化硅纳米粒的制备及抗肿瘤作用研究

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载三氟拉嗪介孔二氧化硅纳米粒的制备及抗肿瘤作用研究

作者：莫柳芳河南大学

学位级别：硕士

乳腺癌(Breast Cancer,BC)是严重危害女性健康和生命的复杂性疾病,且发病率逐年增高。目前治疗乳腺癌的药物以传统化疗药物为主,例如阿霉素、紫杉醇和顺铂等,但这些药物具有心脏毒性、神经毒性和抑制骨髓造血系统等缺点。更重要的是,肿... 详细信息

乳腺癌(Breast Cancer,BC)是严重危害女性健康和生命的复杂性疾病,且发病率逐年增高。目前治疗乳腺癌的药物以传统化疗药物为主,例如阿霉素、紫杉醇和顺铂等,但这些药物具有心脏毒性、神经毒性和抑制骨髓造血系统等缺点。更重要的是,肿瘤细胞与某药物屡次接触后会产生耐药性,从而导致后续抗癌效果逐渐变差。这些传统药物的不足使得抗癌创新药的需求增加,但周期长、耗资大、风险高等原因导致新药研发进展缓慢。在此背景下,“老药新用”成为一种非常重要的策略。三氟拉嗪(TFP)是一种吩噻嗪类衍生物,于1959年在美国获准用于焦虑症和精神病的治疗。近年来有研究报告称TFP可以抑制多种肿瘤的生长,如乳腺癌、胶质母细胞瘤、肺癌等。然而,TFP很容易跨越血脑屏障(BBB),在脑内达到较高的浓度从而影响中枢神经系统(CNS),导致患者出现嗜睡、头晕和锥体外系等副作用。对此,本课题组提出将TFP包裹在无法穿过血脑屏障的介孔硅纳米载体中,从而降低其中枢神经副作用的同时提高治疗肿瘤的效果。本课题所进行的研究如下:首先制备了MSN-NH,然后在其表面修饰了聚乙二醇(PEG)和茴香酰胺(AA),得到命名为MSN@PEG-AA的纳米颗粒。利用透射电子显微镜、激光粒度及Zeta电位分析仪、红外分光光度计、比表面及孔隙度分析仪、差热热重同步分析仪等对纳米颗粒的结构进行了表征。结果表明:所制备的MSN@PEG-AA纳米粒和载药纳米粒(TFP@MSN@PEG-AA,TMPA)分散均匀,粒径均一。通过氮气吸附/脱附曲线算出MSN-NH的表面积(SBET)为～471.316 m/g,孔体积(Vp)和孔径(DBJH)分别为.968 cm/g和.358 nm。红外光谱图和DTG图谱均证明了MSN@PEG-AA的成功制备。通过高效液相色谱法建立了TFP含量测定的方法,并对该方法进行了方法学研究。同时对TFP的负载和释放进行了研究。结果表明:所建立的TFP的含量测定方法专属性好,具有良好的精密度和重复性,在2.5μg/mL0μg/mL浓度范围内具有良好的线性关系。所制备的TMPA纳米粒的载药量和包封率分别为13.1%、65.2%。释放实验表明TMPA纳米粒子具有pH响应性药物释放行为,TFP在pH5.5的PBS缓冲液中的释放速度最快,累计释放量最高,达到了70.9%;TMPA纳米粒的pH响应性释药可以减少TFP在正常组织部位的释放量,增加药物在肿瘤组织中的浓度,从而更高效地发挥其抗肿瘤作用,同时减少对正常组织的损伤。采用溶血性实验对MSN@PEG-AA纳米粒进行了安全性评价,MTT法、荧光倒置显微镜对TMPA的细胞毒性及其在细胞内的摄取情况进行了考察。溶血性实验结果表明MSN@PEG-AA纳米粒具有良好的血液相容性,安全性良好。MTT实验结果表明,游离TFP和TMPA纳米粒对三种乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF-7和4T1)的抑制作用均呈浓度依赖性和时间依赖性;随着作用时间的延长,TMPA纳米粒中TFP逐渐释放完全,TMPA纳米粒可以达到和游离TFP相当的抑制作用。细胞摄取实验结果表明,用sigma受体抑制剂氟哌啶醇(HP)预孵育之后,4T1细胞的绿色荧光明显减弱,证实了纳米粒是通过sigma受体介导的内吞作用进入肿瘤细胞,具有特异性靶向肿瘤细胞的能力。细胞内释药实验表明,载药纳米粒在4T1肿瘤细胞内能正常释放药物,且随着时间增加,释放量增多。通过构建4T1荷瘤Balb/c小鼠模型,研究TMPA纳米粒的体内抗肿瘤效果。结果表明:生理盐水组小鼠的肿瘤体积增长迅速,游离TFP组、TMP纳米粒组和TMPA纳米粒组小鼠的肿瘤体积增长得到了一定的抑制,其中TMPA纳米粒组对小鼠肿瘤体积增长的抑制能力更强,具有更强的抗肿瘤活性;小鼠体重变化曲线表明TMPA纳米粒组具有较低的毒副作用。H&E染色结果表明,各组药物对小鼠的脏器组织形态几乎无影响,生理盐水组的肿瘤细胞几乎没有凋亡,游离药物组和载药纳米粒组的肿瘤细胞均有不同程度的细胞凋亡,其中,TMPA纳米粒组显示出较高的细胞凋亡效果。建立HPLC测小鼠各组织和肿瘤中TFP含量的方法,同时进行方法学研究。结果表明:该分析方法的专属性好,具有良好的精密度和重复性,且在0.025μg/mL～2μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系。体内药物分布实验结果显示,TFP组和TMPA纳米粒组在心、肝、脾、肺、肾和肿瘤中的分布均没有统计学差异;而在脑组织中,TMPA纳米粒组的浓度显著低于TFP组,说明将TFP包裹在纳米载体MSN@PEG-AA中,可以显著减少TFP进入脑组织的含量,降低中枢神经副作用。综上所述,本课题所制备的TMPA纳米粒在发挥TFP抗肿瘤作用的同时降低其对中枢神经系统的影响,在肿瘤治疗方面有很大的发展前景。

关键词：乳腺癌三氟拉嗪靶向递送组织分布

秸秆碳基纳米超疏水催化材料的可控制备及其在催化氧化反应中的研究

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秸秆碳基纳米超疏水催化材料的可控制备及其在催化氧化反应中的研...

作者：柳芳芳西北民族大学

学位级别：硕士

氮杂环化合物由于其分子结构的多样性、生物活性的广泛性,在制药、染料、功能材料等各种工业过程中具有相当重要的意义。那么如何利用绿色化学的概念实现高原子经济性的喹啉、吲哚的催化制备就成为了科研人员关注的热点。然而,金属的有... 详细信息

氮杂环化合物由于其分子结构的多样性、生物活性的广泛性,在制药、染料、功能材料等各种工业过程中具有相当重要的意义。那么如何利用绿色化学的概念实现高原子经济性的喹啉、吲哚的催化制备就成为了科研人员关注的热点。然而,金属的有限储量、高污染和高成本严重阻碍了其大规模应用和工业化。由于非金属催化剂的丰度较高、成本较低、结构易控的优势而被广泛应用。赋予非金属材料以金属基催化剂为典型特征的高催化活性仍然是化工领域不断追求的目标。那么通过重建碳前体的催化活性位点和可控碳化,制备功能化超疏水非金属催化材料,原位氢转移合成N-杂环化合物将是一项有意义的工作。本论文主要研究制备了一种秸秆碳基纳米超疏水催化材料,在非金属条件下催化合成了喹啉、吲哚、喹喔啉及其衍生物并对其催化氧化反应机理进行了探究。本论文主要包括以下研究内容:1.以小麦秸秆和PO为源物质,N下,热解再经高温烧制,可控制备出非金属碳基纳米超疏水催化材料。该催化剂在空气、以水为溶剂的条件下,首次高效催化氧化脱氢合成了喹啉、吲哚、喹喔啉及其衍生物。其中1,2,3,4-四氢喹啉原位脱氢生成喹啉的收率高达99%。此外,利用一系列表征手段研究了功能化碳材料表面功能基团、形貌和孔结构的影响。2.以上述制备的非金属碳基纳米超疏水材料为催化剂,探究在1,2,3,4-四氢喹啉原位脱氢反应中的活性位点及其机理。利用SEM、XRD、FT-IR、元素分析等表征方法研究了催化剂表面形貌、结构和活性位点。主要通过催化剂的循环回收实验及自由基捕获实验来研究。这揭示了催化活性中心可能是由五元环酮或烯醇形式或可能是酚类单元组成的,它们被封装在催化剂的内部结构中,通过-C-C-OH和-C-C=O基团的氢循环来促进反应的进行。

关键词：超疏水材料非金属催化生物质催化氧化

农业文化视角下大田县高山茶产业提升策略研究

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农业文化视角下大田县高山茶产业提升策略研究

作者：柳芳叶福建农林大学

学位级别：硕士

大田县是著名的“中国高山茶之乡”,是全国优秀茶叶百强县,福建省重要的茶叶科研试验地,还是福建省茶叶重点保护县。高山茶对大田县发展地方特色经济具有重要作用,是大田县拥有强大生命力的优势产业之一,无论从自然状况还是历史发展考虑... 详细信息

大田县是著名的“中国高山茶之乡”,是全国优秀茶叶百强县,福建省重要的茶叶科研试验地,还是福建省茶叶重点保护县。高山茶对大田县发展地方特色经济具有重要作用,是大田县拥有强大生命力的优势产业之一,无论从自然状况还是历史发展考虑,大田县种植茶叶都有天时、地利、人和的优势。党的十八大报告指出：解决好“三农问题”是全党工作的重中之重,大田县政府着力重振高山茶产业,将其作为解决大田县“三农问题”的重要途径。随着人民生活水平的提高。大田县高山茶的生产和种植已不能满足人们日益增长的精神文化需求,高山茶产业发展必须寻找新的思路。因此,本文尝试通过农业文化这一独特视角,对大田县高山茶产业进行实证研究,挖掘该产业发展的资源优势和制约因素,旨在提出产业提升策略。本文在阅读相关文献资料的基础上,明确了大田县高山茶产业具有丰富的文化资源,但是当前的茶产业发展状况却不容乐观。本文主要运用产业融合理论、文化产业理论,以产业经济学和可持续农业理论为指导,分析大田县高山茶产业与茶文化的发展问题。首先通过问卷调查和现场访谈,了解到大田县高山茶的生产集约化程度低,茶园管理粗放,企业生产规模小,技术人才缺乏,而且茶文化资源挖掘不够深入,未充分利用茶文化资源,与茶产业的融合度不深。接着在剖析大田县高山茶文化资源类型的基础上,运用层次分析法构建茶文化资源开发潜力评价体系,得出大田县高山茶的文化资源开发潜力良好。最后论文基于农业文化视角,从推进高山茶农业文化研究、积极发展茶文化休闲事业、充分开发高山茶文化创意产品、加强文化产业人力资源建设、大力发展茶文化旅游、以文化创意提升高山茶宣传效果等六个方面提出了相应的对策建议。

关键词：农业文化大田县高山茶产业提升策略

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从地域视角论西曲繁荣之原因

兰台世界 2014年第27期 44-45页

作者：王柳芳南昌师范高等专科学校南京师范大学

西曲流行于以荆雍为中心的长江和汉水流域,刘宋以来荆雍等地的军事、政治、经济地位逐渐凸显。西曲的兴盛与荆雍势力的崛起有着密切的关系,出镇荆雍的皇子重臣热衷改制西曲,有与中央政权政治博弈之目的。

关键词：西曲地域南朝乐府

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论法官的职业道德修养

论法官的职业道德修养

作者：杨柳芳东南大学

学位级别：硕士

法官职业道德修养是法官道德素养中的核心内容,具体内涵为法官在职业活动中不断自我教育、自我改造、自我陶冶的道德修缮过程及其所达到的境界。法官承担着适用法律规范、维护社会秩序的重要职责,增强法官职业道德修养是十八届三中全会... 详细信息

法官职业道德修养是法官道德素养中的核心内容,具体内涵为法官在职业活动中不断自我教育、自我改造、自我陶冶的道德修缮过程及其所达到的境界。法官承担着适用法律规范、维护社会秩序的重要职责,增强法官职业道德修养是十八届三中全会“依法治国”战略全面推进的内在要求。法律与道德有着深刻的历史渊源,文章基于法律伦理的视角探讨了法官职业道德修养养成的关键节点是德性提升和德行实践。结合中国儒家传统修身的实践理念概述了法官职业道德修养养成的应然路径。笔者通过对数百份问卷统计分析、不同地域法院走访调研和近二个月的法院实习后发现江苏省法官的职业道德修养整体情况良好,但存在法官认知不足、言行失范和角色失调等问题。同时随着社会经济的发展,工作负荷加剧、网络自媒体流行、心理亚健康都在一定程度上制约了法官职业道德修养的发展,并出现修养层次差异明显、职业道德践行断层等状况。法官职业道德修养的研究具有极强的学科交叉性和时政性,解决法官职业道德修养的养成问题应当多角度、多领域地发散和开拓思维。文章基于法官“自身”个体的层面,结合所调研的法官职业道德修养现状及问题剖析,创造性地阐释从锻铸人文品格,依托审美实践和提升自我管理三种实然路径提升法官的职业道德修养。

关键词：法官角色职业道德修养践行慎独自我管理

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番茄SlNAM1参与调解植物花青素累积

番茄SlNAM1参与调解植物花青素累积

作者：柳芳艳山西农业大学

学位级别：硕士

番茄（Solanum lycopersicum）是一种世界范围内广泛栽培和消费的重要经济作物,其基因组小、生长周期短、遗传转化体系高效成熟,是科学研究常用的模式植物。花青素是植物界广泛存在的一种重要次生代谢物,属黄酮类化合物,赋予植物各种组... 详细信息

番茄（Solanum lycopersicum）是一种世界范围内广泛栽培和消费的重要经济作物,其基因组小、生长周期短、遗传转化体系高效成熟,是科学研究常用的模式植物。花青素是植物界广泛存在的一种重要次生代谢物,属黄酮类化合物,赋予植物各种组织和器官典型的颜色,增强植物抵御外界环境的能力,同时还可以预防多种疾病和改善人体血糖平衡,具有极大的科研价值和经济价值。近年来园艺植物花青素合成调控机制相关研究日益成为热点。NAC转录因子家族是植物体内特有的、最大的转录因子家族之一,在调节植物生命活动中发挥着重要作用。然而目前有关NAC转录因子的研究主要集中在模式植物拟南芥和水稻中,在番茄中的研究相对较少。目前仅发现几个NAC转录因子在调节番茄生长发育、果实成熟和胁迫应答中发挥作用,NAC转录因子在番茄中是否参与调节花青素累积尚不清楚。本研究从番茄中克隆得到了一个典型的NAC转录因子SlNAM1,对其进行生物信息学分析,并通过酵母双杂交、烟草叶片瞬时共表达、构建异源表达系、番茄遗传转化等分子生物学及遗传学方法,初步探明了SlNAM1在番茄花青素累积过程中的功能。本论文主要研究内容及结果如下:1、利用酵母双杂交文库筛选,获得了一个与Sl MYB75相互作用蛋白SlNAM1。2、从番茄中克隆得到目的基因SlNAM1,对其进行生物信息学分析。氨基酸序列分析证实,SlNAM1属于NAC转录因子家族,具有典型的N端NAC结构域,在C端有一个非保守的转录激活域。3、在烟草叶片中瞬时表达SlNAM1-GFP融合荧光蛋白过表达载体,发现绿色荧光仅存在于细胞核中,说明SlNAM1定位于细胞核。4、在拟南芥中鉴定SlNAM1的同源蛋白,发现At NAC32与SlNAM1序列相似性最高,用MEGA-X软件对SlNAM1和At NAC32蛋白序列进行同源比对,结果显示二者序列相似性达61%。5、采用烟草叶表皮细胞瞬时转化技术,在烟草叶片中瞬时单独表达以及共表达携带SlNAM1和Sl MYB75的GV3101（p Soup-p19）菌株,以p CAMBIA-1300转化根癌农杆菌作为对照。结果表明,SlNAM1通过与Sl MYB75相互作用,抑制烟草叶片花青素积累。6、SlNAM1在拟南芥中的同源蛋白At NAC32与At MYB75/At PAP1也存在相互作用。采用花序浸染法将SlNAM1异源表达至拟南芥pap1-D突变体中,获得的转基因植株花青素积累较少,进一步验证了SlNAM1对植物中花青素积累的抑制作用。7、将拟南芥pap1-D突变体与At NAC32OX（OX32）杂交,构建pap1-D OX32杂交系。表型及实时荧光定量PCR分析结果显示,与SlNAM1相似,At NAC32过表达下调了与花青素生物合成相关基因DFR、LDOX和UF3GT的表达,从而抑制了pap1-D背景下的花青素累积。8、构建SlNAM1过表达载体,利用农杆菌介导的叶盘法转化Micro-Tom番茄,获得SlNAM1过表达转基因番茄,利用PCR、q RT-PCR筛选得到的T代转基因番茄,并选取OE-5、OE-7和OE-8进行后续实验,以待进一步探明SlNAM1的生物学功能。综上所述,本论文研究结果表明,SlNAM1是花青素合成的负调节因子,SlNAM1和At NAC32通过与MYB75的相互作用,抑制了植物中花青素积累。本论文的研究结果,为深入阐明番茄花青素累积的分子调控机理提供了理论依据。这对丰富SlNAM1基因在番茄中的功能及作用机制提供了重要的参考价值,同时为继续探究番茄SlNAM1基因功能奠定了基础。

关键词：番茄 NAC转录因子 SlNAM1 花青素累积遗传转化

东莞市大岭山镇农村居民最低生活保障制度运行中的问题与对策研究

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东莞市大岭山镇农村居民最低生活保障制度运行中的问题与对策研究

作者：陈柳芳华中农业大学

学位级别：硕士

三农问题始终是关系到我国改革开放和现代化建设全局的重大问题,没有农村的稳定,就没有全国的稳定。而农村贫困人口的存在一定程度上成为关乎社会稳定的潜在不安因素。妥善解决农村贫困人口的生活困难是当前我国经济和社会发展的一个重... 详细信息

三农问题始终是关系到我国改革开放和现代化建设全局的重大问题,没有农村的稳定,就没有全国的稳定。而农村贫困人口的存在一定程度上成为关乎社会稳定的潜在不安因素。妥善解决农村贫困人口的生活困难是当前我国经济和社会发展的一个重要任务。农村居民最低生活保障制度是国家和社会为保障收入难以维持最基本生活的农村贫困人口而建立的一种社会救济制度,它保障的是农村贫困居民的基本生存。农村居民最低生活保障制度是社会保障体系的重要内容,是最基础的社会保障。本文综合运用凯恩斯主义理论、贫困循环理论和科学发展观理论,选取代表广东省发达地区的东莞市大岭山镇作为研究区域,系统探讨农村居民最低生活保障制度运行问题与对策。全文着重从以下三个方面进行论述：(1)从农村居民最低生活保障制度的概念和特点入手,阐明最低生活保障制度在社会保障体系中的结构位置,同时对农村居民最低生活保障制度产生发展的历史进行梳理,并进一步阐述我国建立农村居民最低生活保障制度的必要性。(2)通过文献研究、政府部门调研和农村居民问卷调查,从实证角度具体介绍东莞市大岭山镇农村居民最低生活保障制度的现状,分析了其中存在的突出问题和成因。(3)在定性与定量研究的基础上,结合前期学者的相关研究成果,从多层次社会救助体系的构建、低保对象的合理界定、低保标准的科学制定等方面提出了完善东莞市大岭山镇农村居民最低生活保障制度的对策。

关键词：农村居民最低生活保障制度大岭山镇社会救助

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新形势下做实纳税人权利保护的研究

新形势下做实纳税人权利保护的研究

作者：顾柳芳苏州大学

学位级别：硕士

英国有句俗语“税收是代议制之母”,美国则在独立战争时期喊出了“无代议士不纳税”的响亮口号,马克思说税收是“可以用来扼杀君主专制的一条金锁链”。可见,纳税人权利意识的觉醒是各国推动民主萌芽和快速发展不可或缺的内生力量。今天... 详细信息

英国有句俗语“税收是代议制之母”,美国则在独立战争时期喊出了“无代议士不纳税”的响亮口号,马克思说税收是“可以用来扼杀君主专制的一条金锁链”。可见,纳税人权利意识的觉醒是各国推动民主萌芽和快速发展不可或缺的内生力量。今天,税收已经越来越真实地被人们感觉到,一起敏感起来的,还有纳税人的意识。可以说,中国迎来了“税感”时代。如何响应纳税人日益个性的需求和诉求,充分尊重和保护好纳税人合法权益,也已成为中国探索公民权利保护,走出中国特色社会主义民主法治道路的一块“敲门砖”、一个“试金石”,更成为税务机关实现服务转型过程中首要的义务和责任。本文将结合理论分析,从纳税人权利保护发展渊源入手,从实践角度剖析当前纳税人权利保护的现状、存在的问题及原因,借鉴欧美国家成功经验,并基于“三圈理论”,分析寻求我国纳税人权利保护本土化的建议和对策。

关键词：纳税人权利保护三圈理论建议和对策

模糊综合测评法在商业银行内部招聘中的应用研究

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模糊综合测评法在商业银行内部招聘中的应用研究

作者：柳芳红西南石油大学

学位级别：硕士

人力资源管理已经变为现代企业管理的重心。招聘模块作为企业人力资源管理的重要子系统,通过招募、选择、甄选等一系列的科学规范活动以期能够系统地、持续地提高企业员工素质,增强企业生存活力,提高效益。实行科学系统的招聘测评,在提... 详细信息

人力资源管理已经变为现代企业管理的重心。招聘模块作为企业人力资源管理的重要子系统,通过招募、选择、甄选等一系列的科学规范活动以期能够系统地、持续地提高企业员工素质,增强企业生存活力,提高效益。实行科学系统的招聘测评,在提高人员岗位匹配度方面具有重要的意义。在此,本文以××商业银行的中层管理人员为研究对象,在指出××商业银行现有内部招聘缺点的基础上,提出了一套有针对性的基于模糊综合评价的内部员工能力素质招聘测评方案。本文详细阐述了模糊综合评价方法的模型组成及其数学原理。然后,运用行为事件访谈法和在线意见征求方法,建立了银行中层管理人员素质能力模型,确定出具体的模糊综合招聘测评指标,随后运用模糊综合评价方法对××商业银行的应聘候选人的素质能力进行综合测评。最后,本文为××商业银行设计出了一套完整的基于模糊综合测评方法的员工内部招聘流程。

关键词：商业银行能力素质模型内部招聘模糊综合测评