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花椒籽蛋白及多肽的理化性质和生物活性研究

花椒籽蛋白及多肽的理化性质和生物活性研究

作者：董思雨齐鲁工业大学

学位级别：硕士

花椒籽蛋白(ZSP)氨基酸组成丰富且合理,ZSP及其多肽具有多种功能特性和生物活性,是一种具有开发潜力的植物蛋白质资源。因此,本文首先以花椒籽为原料,研究了从中提取ZSP的最佳工艺条件,深入研究了 ZSP的基础理化和功能性质、不同蛋白酶... 详细信息

花椒籽蛋白(ZSP)氨基酸组成丰富且合理,ZSP及其多肽具有多种功能特性和生物活性,是一种具有开发潜力的植物蛋白质资源。因此,本文首先以花椒籽为原料,研究了从中提取ZSP的最佳工艺条件,深入研究了 ZSP的基础理化和功能性质、不同蛋白酶水解ZSP所得多肽的功能和生物特性;然后对碱性蛋白酶制得的花椒籽多肽(抗氧化效果好)和胃蛋白酶制得的花椒籽多肽(ACE抑制效果好)分别进行超滤分离,研究不同超滤组分的理化特征、抗氧化和ACE抑制作用。实验所得结果如下:(1)以ZSP提取率为评价指标,通过单因素实验确定料液比、提取温度、提取时间和pH值的响应面试验设计中心值,然后使用响应面法探究最佳提取条件。通过分析回归模型得到理论上提取ZSP的最佳条件为:料液比(花椒籽:水,g/mL)1:36.30,pH 9.06,温度 43.69℃,时间 3.45 h,此时 ZSP 的提取率为 46.12%。从方便操作的角度考虑,最佳条件调整为:料液比(花椒籽:水,g/mL)1:35,pH 9.0,温度45℃,时间3.5 h,经过实验验证,ZSP的提取率为46.54%。(2)对ZSP的组成和不同酸碱条件下的理化和功能性质进行研究,结果表明,ZSP中氨基酸种类齐全,其中Glu含量最高(16.37 g/100g),由6个主要亚基组成:54、31、25、18、10和9 kDa,其中54、31和18 kDa的条带为糖蛋白。ZSP在pH 5.0时无规则卷曲结构含量高(23.74%),在pH 9.0时β-折叠含量高(30.13%),说明ZSP在pH 9.0时的结构更稳定。在pH 5.0时(等电点附近),ZSP的Zeta电位绝对值小(6.38 mV),静电斥力弱,因此ZSP易于聚集和埋藏疏水基团和巯基,使得ZSP具有高黏度、高热变性温度(90.99℃)和高持水力(3.6750 g/g),但是降低了 ZSP的起泡能力和乳化能力。相反,在碱性环境中时ZSP具有高的溶解度(65.59-68.59%)和乳化性(31.53-83.90 m2/g)。本研究结果为ZSP在不同酸碱条件下的食品中使用提供了基础信息。(3)通过对不同蛋白酶水解的花椒籽多肽进行理化、功能和生物活性进行研究对比,结果发现,五种蛋白酶水解均减小了 ZSP的平均粒径和分子量,但是增加了无规则卷曲结构的含量,因此结构松散。胃蛋白酶对ZSP的水解程度最高(24.07%),得到的多肽分子量最小(<13 kDa)、平均粒径最小(129.80 nm)、溶解度最高(98.9%)。而碱性蛋白酶制备的花椒籽多肽具有最高的表面疏水性和起泡能力(88.89%),以及最低的泡沫稳定性(45.00%)。此外,使用碱性蛋白酶制备的花椒籽多肽具有最低的清除羟基(1.94)、DPPH(0.28)、ABTS(0.13)自由基和螯合Fe2+(0.61)的IC50值(mg/mL)。使用胃蛋白酶制备的花椒籽多肽显示出最高活性的抑制血管紧张素转换酶(ACE)的效果(IC50=0.54 mg/mL)。本研究结果为花椒籽多肽用作抗氧化剂和降压剂提供了支持。(4)将胃蛋白酶和碱性蛋白酶制备的花椒籽多肽经超滤得到四个不同分子量范围(10-30 kDa、5-10 kDa、3-5 kDa和<3 kDa)的多肽组分,分别对上述组分和超滤前的多肽进行理化和体外抗氧化、ACE抑制活性进行研究。结果表明,相比于超滤前的胃蛋白酶和碱性蛋白酶水解的多肽(33.86 g/100g、34.92 g/100g),超滤后各组分(34.05-40.15 g/100g、34.84-36.83 g/100g)的必需氨基酸含量增加。分子量为5-10 kDa的花椒籽多肽表现出最好的抗氧化活性,IC50值(mg/mL)分别为:4.24、1.87(羟基自由基清除);0.86、0.21(DPPH自由基清除);0.73、0.26(ABTS自由基清除);3.55、0.56(Fe2+螯合)。而分子量<3 kDa的花椒籽多肽表现出最高的ACE抑制活性,IC50值(mg/mL)分别为0.32和0.40。此外,超滤处理使花椒籽多肽的β-转角结构的含量降低,无规则卷曲结构含量增加,而α-螺旋结构的含量无明显变化。碱性蛋白酶水解的花椒籽多肽及其超滤组分(34.57-39.46%)中β-折叠结构的含量高于胃蛋白酶水解的花椒籽多肽及其超滤组分(25.59-30.32%)。本研究结果为花椒籽多肽的应用提供了更深一步地理论支撑。

关键词：花椒籽蛋白多肽理化性质生物活性

吗啉磺酰胺化合物的设计、合成及其抑制大豆萌芽活性的研究

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有机化学 2024年第1期44卷 309-315页

作者：黄志友杨平何波欧文霞袁思雨邵阳学院农林生态学院湖南邵阳422000 南京农业大学植物保护学院农作物生物灾害综合治理教育部重点实验室南京210095

为了发现新型脱落酸功能类似物,采用活性亚结构拼接原理设计了含吗啉磺酰胺片段的目标分子.以吗啉-4-磺酰胺和氟代硝基苯为起始原料,经芳基亲核取代反应合成了14个目标化合物,该合成方法操作简单,底物适用范围广.种子萌芽实验结果表明,... 详细信息

为了发现新型脱落酸功能类似物,采用活性亚结构拼接原理设计了含吗啉磺酰胺片段的目标分子.以吗啉-4-磺酰胺和氟代硝基苯为起始原料,经芳基亲核取代反应合成了14个目标化合物,该合成方法操作简单,底物适用范围广.种子萌芽实验结果表明,浓度为50µmol/L时4a~4d、4k、4m、4n等7个化合物处理后完全抑制萌芽,25µmol/L时4a~4d、4k、4m、4n等7个化合物处理后抑制率仍高于95%.进一步降低至15μmol/L时,发现4m、4n的抑制活性高于ABA和先导化合物PM4.分子对接结果表明,引入吗啉促使小分子中磺酰基(SO2)与Ser98形成氢键,提高了结合受体的能力,所以4m和4n的打分函数高于ABA和PM4,活性也更高.该结果有利于发现新型脱落酸功能类似物.

关键词：脱落酸功能类似物吗啉磺酰胺化合物抑制萌芽芳基亲核取代反应

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利格列汀多晶型研究

高等学校化学学报 2024年第1期45卷 33-42页

作者：刘奇刘沫毅董思雨王学重何运良北京石油化工学院新材料与化工学院恩泽生物质精细化工北京市重点实验室北京102617 华润双鹤药业股份有限公司北京100124 北京石油化工学院信息工程学院北京102617

研究了利格列汀复杂的晶型现象及其晶格中的构象变化.通过培养利格列汀的单晶并进行X射线单晶衍射分析,首次得到了包括晶型A在内的3种晶体结构;结合文献已报道的2种晶体结构,分析了各晶体结构的特点及其晶格中的分子构象.研究结果表明,... 详细信息

研究了利格列汀复杂的晶型现象及其晶格中的构象变化.通过培养利格列汀的单晶并进行X射线单晶衍射分析,首次得到了包括晶型A在内的3种晶体结构;结合文献已报道的2种晶体结构,分析了各晶体结构的特点及其晶格中的分子构象.研究结果表明,5种晶体里存在晶型A和晶型F两种晶型,其中晶型F为准多晶型,可以包含多种溶剂,形成通道型溶剂合物,其晶格参数随包含的溶剂略有变化.晶型A的构象与晶型F的构象存在较高能垒,导致2种晶型难以互相转化.晶型F不同溶剂合物之间的分子构象并不完全相同,在粉末X射线衍射(PXRD)谱图上也有显著差异.最后,通过混悬转晶和热分析等方法研究了晶型之间的转化关系.

关键词：利格列汀多晶型构象通道型溶剂合物

东北黑土区典型县域耕地质量对耕地水田化的空间响应

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水土保持研究 2024年第1期31卷 327-334页

作者：张慧栾思雨丛蓉东北农业大学公共管理与法学院哈尔滨150000

[目的]耕地水田化过程对耕地质量具有至关重要的影响,明确东北黑土区耕地质量对耕地水田化的空间响应,是提升黑土耕地质量实现耕地可持续利用的重要前提。[方法]构建LESA耕地质量评价体系,采用CRITIC模型、双变量局部空间自相关模型,揭... 详细信息

[目的]耕地水田化过程对耕地质量具有至关重要的影响,明确东北黑土区耕地质量对耕地水田化的空间响应,是提升黑土耕地质量实现耕地可持续利用的重要前提。[方法]构建LESA耕地质量评价体系,采用CRITIC模型、双变量局部空间自相关模型,揭示耕地质量和耕地利用变化之间的空间响应关系。[结果](1)研究区耕地水田化现象剧烈,呈现出东部最强、西部次之、中部最弱的时空分异格局;(2)研究区耕地质量变化显著,耕地质量下降比例低于质量提升比例,表现出中部下降最高、西部下降次高、东部下降最低的时空格局;(3)研究区耕地质量对水田化的响应具有双重效应,负向响应更为敏感,整体呈现出东部耕地质量响应程度高于其他区域的空间格局。[结论]研究区耕地水田化对耕地质量具有正、负两种效应,依据效应方向进行耕地利用结构调整,是保护黑土耕地的重要途径。对于具有正向效应的区域应适度推进旱改水项目,而针对具有负向效应的区域应停止旱改水工程,积极进行水田休耕,并可适当地将其恢复为旱地。

关键词：耕地质量耕地水田化 CRITIC模型双变量局部空间自相关黑土区富锦市

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论明代女教书籍出版的社会秩序建构意义

出版科学 2024年第2期32卷 112-118页

作者：关思雨李明杰武汉大学信息管理学院武汉430072 武汉大学文化遗产智能计算实验室武汉430072

明代女教书籍出版数量居历朝之冠,出版主体的身份明显趋于多样化,女性编撰者有皇后、太后、贵妃与民妇,男性编撰者有文官、藩王与士大夫,官、私、坊皆有刊刻。本文借鉴身份认同理论和帕森斯的结构功能主义理论,分析明代出版女教书籍陡... 详细信息

明代女教书籍出版数量居历朝之冠,出版主体的身份明显趋于多样化,女性编撰者有皇后、太后、贵妃与民妇,男性编撰者有文官、藩王与士大夫,官、私、坊皆有刊刻。本文借鉴身份认同理论和帕森斯的结构功能主义理论,分析明代出版女教书籍陡然增多的深层社会原因,探寻明代女教书籍出版对于当时社会秩序的建构意义。

关键词：女教书籍出版史社会秩序明代

急性冠状动脉综合征和急性缺血性脑卒中院内连续发生的机制及治疗研究新进展

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中华老年心脑血管病杂志 2024年第4期26卷 478-480页

作者：符雨思赵振强海南医学院第一附属医院神经内科海口570102

随着我国人口老龄化,心脑血管疾病的患病率呈上升趋势。急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)、急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrom,ACS)是中老年群体致残和死亡的主要原因。ACS、AIS院内连续发生的情况在心血管和神经... 详细信息

随着我国人口老龄化,心脑血管疾病的患病率呈上升趋势。急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)、急性冠状动脉综合征(acute coronary syndrom,ACS)是中老年群体致残和死亡的主要原因。ACS、AIS院内连续发生的情况在心血管和神经科学领域备受关注[1]。据相关文献报道,ACS发生后AIS首周、首月、首年和十三年的脑卒中累积发病率分别为0.8%、1.1%、2.2%和10.3%。

关键词：急性冠状动脉综合征卒中危险因素治疗机制

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钢铁冶金废渣活化过硫酸盐降解丁基黄药

东北大学学报（自然科学版） 2024年第2期45卷 187-192页

作者：李美杭苗思雨张巍巍胡恩柱东北大学冶金学院辽宁沈阳110819 沈阳大学区域污染环境生态修复教育部重点实验室辽宁沈阳110044

以钢铁冶金废渣(钢渣、含钛高炉渣、提钒尾渣)活化过硫酸盐降解水中的丁基黄药.分析了废渣种类与用量、过硫酸盐浓度、初始pH等因素对丁基黄药降解效能的影响,采用双因素方差分析揭示了不同因素之间的交互特征.结果表明丁基黄药的降解... 详细信息

以钢铁冶金废渣(钢渣、含钛高炉渣、提钒尾渣)活化过硫酸盐降解水中的丁基黄药.分析了废渣种类与用量、过硫酸盐浓度、初始pH等因素对丁基黄药降解效能的影响,采用双因素方差分析揭示了不同因素之间的交互特征.结果表明丁基黄药的降解率随废渣用量和过硫酸盐浓度增加而增大.在废渣用量1 g/L,过硫酸盐浓度为0.5 mmol/L,反应时间96 h时,钢渣、含钛高炉渣、提钒尾渣活化过硫酸钠对丁基黄药的降解率分别可达96.47%,97.70%和95.12%.三种废渣活化效能分别在碱性、近中性和酸性条件下达到最优.其中钢渣活化以非自由基(^(1)O_(2))和SO_(4)·-,HO·共同作用;含钛高炉渣以^(1)O_(2)为主,伴随着HO·的产生;提钒尾渣则仅以^(1)O_(2)为主.

关键词：过硫酸盐丁基黄药钢渣含钛高炉渣提钒尾渣

跨学科知识建构:内涵特征、概念模型和实践原则

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中国远程教育 2024年第7期44卷 38-48页

作者：董艳阳思雨周欣雨郑娅峰北京师范大学科学教育研究院北京100875 北京师范大学教育学部北京100875 北京师范大学教育科技中心珠海519087

知识建构作为一种高阶认知活动,对学习者创新能力发展具有重要作用。当前,知识建构的应用场景已由单一学科知识习得转化为跨学科知识整合。然而,传统知识建构理论主要应对单一学科知识整合问题,缺少对跨学科场景知识建构的理论探索,难... 详细信息

知识建构作为一种高阶认知活动,对学习者创新能力发展具有重要作用。当前,知识建构的应用场景已由单一学科知识习得转化为跨学科知识整合。然而,传统知识建构理论主要应对单一学科知识整合问题,缺少对跨学科场景知识建构的理论探索,难以应对当前跨学科复杂问题解决的新型知识生产方式和教育实践的急切育人诉求。鉴于此,本研究在分析知识建构理论现存问题及挑战的基础上,首先解析跨学科知识建构的内涵特征;并从情境认知理论和社会调节理论等角度出发,构建跨学科知识建构的多层概念模型;同时结合当前教育发展变革诉求,提出跨学科知识建构的四项实践原则,以期为跨学科实践活动提供参考,进而助力跨学科创新人才的培养。

关键词：跨学科学习知识建构知识创造学习共同体

非金属介导下乙缩醛酸与异硫氰酸酯反应合成ɑ-缩醛基酰胺

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有机化学 2024年

作者：丁柔石思雨马超魏伟吕玉芬曲阜师范大学化学与化工学院中国科学院藏药研究重点实验室中国科学院西北高原生物研究所

报道了一种非金属介导下异硫氰酸酯与乙缩醛酸进行缩合反应合成ɑ-乙缩醛基酰胺的方法.该反应简单地采用DBU作为碱，无需任何金属催化剂及偶联试剂,在室温下实现了一系列ɑ-乙缩醛基酰胺的绿色构建.

关键词：非金属介导 ɑ-缩醛基酰胺乙缩醛酸芳基异硫氰酸酯