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在线富集纯化测试海水稀土元素含量方法研究

应用海洋学学报 2024年第3期43卷 588-596页

作者：林梵宇尹希杰殷学博刘建鑫翁蓁洲洪名钊孙治雷自然资源部第三海洋研究所福建厦门361005 中国科学院海洋研究所山东青岛266071 福州市海洋与渔业技术中心福建福州350014 广州谱临晟科技有限公司广东广州510730 中国地质调查局青岛海洋地质研究所山东青岛266071

稀土既是重要战略资源,也是地球化学演变过程重要的示踪元素。海水中的稀土元素含量极低,同时受限于其高盐基质影响,高效准确测定一直是具有挑战性的工作。本研究旨在通过一套在线除盐装置去除海水基质的背景干扰,同时对14种稀土元素进... 详细信息

稀土既是重要战略资源,也是地球化学演变过程重要的示踪元素。海水中的稀土元素含量极低,同时受限于其高盐基质影响,高效准确测定一直是具有挑战性的工作。本研究旨在通过一套在线除盐装置去除海水基质的背景干扰,同时对14种稀土元素进行富集之后,直接利用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)进行定量检测。通过空白样品分析,发现各稀土元素定量限在0.01~0.50 ng/L之间。14种稀土元素标曲线性系数r 2均大于0.999,相关性良好。样品pH梯度实验表明,当pH在2~6之间,测试结果准确度较好。对NASS-6标准海水样品稀土含量进行3次平行测试,各元素STD值在0.01~0.16之间;测定均值与文献报道值接近。加标回收实验显示各稀土元素回收率在94.81%~105.82%之间,进一步证明了该方法的准确度良好。测试大洋孔隙水样品稀土元素并绘制其配分曲线,曲线平滑度符合规律。海水中稀土元素含量既可用于指示海洋地球化学活动,也可用于污染物示踪,本研究探讨了快速在线富集检测海水稀土元素的方案,为后续相关研究的开展提供技术支撑。

关键词：海洋化学在线除盐装置稀土元素海水 ICP-MS

高效液相色谱-原子荧光光谱法分析鱼肌中的总硒和形态硒

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分析仪器 2024年第2期 53-58页

作者：刘建鑫尹希杰林梵宇殷学博自然资源部第三海洋研究所厦门361005 中国科学院海洋研究所青岛266071

硒是人体必需的15种营养素之一,人体内不同形态硒的生物活性存在明显差异,鱼类是含硒量较高的动物,是人体摄入硒的重要来源,因此准确测试鱼肌中总硒和形态硒含量具有重要的意义。将鱼肌样品消解,采用原子荧光光谱法对消解液进行分析,总... 详细信息

硒是人体必需的15种营养素之一,人体内不同形态硒的生物活性存在明显差异,鱼类是含硒量较高的动物,是人体摄入硒的重要来源,因此准确测试鱼肌中总硒和形态硒含量具有重要的意义。将鱼肌样品消解,采用原子荧光光谱法对消解液进行分析,总硒浓度在0~10μg/L内线性关系良好,标准曲线相关系数大于0.999,检出限为0.09μg/L,相对标准偏差(RSD)为0.77%,加标回收率为104.2%,表明方法准确度较好。优化高效液相色谱-原子荧光光谱法的测试参数分析形态硒,其测试结果为硒代胱氨酸、亚硒酸盐、硒代蛋氨酸、硒酸盐等4种形态硒的标准曲线在10~200μg/L浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出限在2.87~4.47μg/L之间,相对标准偏差(RSD)在1.14%~2.13%之间,各形态消解前加标的加标回收率在91.6%~108.9%之间,消解后加标的加标回收率在90.1%~109.7%之间,结果表明该方法对鱼肌形态硒测定有很好的准确性和可靠性。

关键词：总硒形态硒高效液相色谱-原子荧光光谱法鱼肌

对虾白斑综合症病毒（WSSV）膜蛋白VP52B的鉴定和功能研究及极早期基因启动子的筛选

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对虾白斑综合症病毒（WSSV）膜蛋白VP52B的鉴定和功能研究及极早...

作者：林梵宇国家海洋局第三海洋研究所

学位级别：硕士

对虾白斑综合症病毒(WSSV)是危害养殖对虾的主要病原,致病能力强,传播范围广,给世界对虾养殖业造成了巨大的损失,至今依然没有有效的防治方法。本文围绕病毒膜蛋白开展研究,此外,还对病毒的极早期基因启动子进行了初步的筛选鉴定。研究... 详细信息

对虾白斑综合症病毒(WSSV)是危害养殖对虾的主要病原,致病能力强,传播范围广,给世界对虾养殖业造成了巨大的损失,至今依然没有有效的防治方法。本文围绕病毒膜蛋白开展研究,此外,还对病毒的极早期基因启动子进行了初步的筛选鉴定。研究工作主要包括以下几个方面: (1)本文对WSSV膜蛋白VP52B进行了鉴定和功能分析。该蛋白是病毒基因wsv256的编码产物。在*** BL-21菌株中表达了GST-VP52B,并制备了相应的抗血清。GST pull-down分析发现VP52B能与另一个病毒膜蛋白VP26相互作用。之前的研究认为VP26是重要的连接蛋白,为了确定该蛋白与VP52B的结合位点,表达了不同长度的VP26突变体,并发现VP26和VP52B相互作用的位点位于VP26 135～170Aa。 (2)通过超声法将WSSV基因组随机断裂至400～900bp DNA片段,并插入PIZ△IE/V5-EGFP载体以构建文库,转染昆虫细胞Hi5后,发现其中部分细胞有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,说明这部分细胞中的DNA片段可能具有极早期启动子活性。这对于进一步筛选和鉴定WSSV极早期基因及开展极早期启动子研究具有重要意义。 (3)从WSSV基因组中选择了20多个有锌指结构域或其他转录调控相关结构域的基因,克隆其上游400～500bp的启动子序列,连接到检测启动子活性的载体中。转染昆虫细胞Hi5发现有两个ORF(ORF249、ORF403)上游序列具有较强的启动子活性。这两个ORF序列分析发现,它们都具有Ring-H2 finger motif,因此推测这种结构特点与WSSV极早期基因启动子活性相关。

关键词： VP52B 启动子极早期基因

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒荧光病毒样颗粒的构建

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应用海洋学学报 2015年第3期34卷 411-418页

作者：侯路红林梵宇国家海洋局第三海洋研究所国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室福建厦门361005

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是对虾养殖业中主要的致病病毒之一.在原核系统中表达该病毒的衣壳蛋白,发现其能够自组装成与天然病毒大小、形态相似的病毒样颗粒.本研究通过在衣壳蛋白原核表达质粒上融合表达增强型绿色荧光... 详细信息

对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)是对虾养殖业中主要的致病病毒之一.在原核系统中表达该病毒的衣壳蛋白,发现其能够自组装成与天然病毒大小、形态相似的病毒样颗粒.本研究通过在衣壳蛋白原核表达质粒上融合表达增强型绿色荧光蛋白(EGFP),并在两融合蛋白之间插入一段接头序列(linker),使自组装不受空间位阻的影响.通过原核表达纯化,成功得到IHHNV的荧光病毒样颗粒(f VLPs).电镜下观察样品具有完整的二十面体形态,免疫金标实验发现EGFP成功展示在病毒样颗粒外表面.

关键词：海洋生物学对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒荧光病毒样颗粒融合蛋白接头序列

对虾白斑综合症病毒极早期基因启动子筛选文库的构建

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台湾海峡 2010年第2期29卷 184-188页

作者：林梵宇徐丽美杨丰国家海洋局第三海洋研究所生物遗传资源国家海洋局重点实验室福建厦门361005

对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是危害对虾养殖业的主要病原,而WSSV极早期基因对病毒功能基因的转录翻译和调控起着至关重要的作用.本研究将WSSV基因组以超声法随机断裂至400～900bp DNA片段,并插入启动子缺失且... 详细信息

对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是危害对虾养殖业的主要病原,而WSSV极早期基因对病毒功能基因的转录翻译和调控起着至关重要的作用.本研究将WSSV基因组以超声法随机断裂至400～900bp DNA片段,并插入启动子缺失且多克隆位点下游具有报告基因的载体来构建文库,转染昆虫细胞Hi5.倒置荧光显微镜观察发现部分转染后的细胞有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达,表明这部分细胞中的DNA片段可能具有极早期启动子活性.流式细胞仪分析显示,这部分荧光细胞占总细胞的比例为0.35%.由于转染效率为50%,可认为占比0.7%的WSSV基因组随机片段能在Hi5细胞中激发下游报告基因的转录翻译,可能具有极早期基因启动子活性.这对于进一步筛选和鉴定WSSV极早期基因及开展极早期启动子研究具有重要的意义.

关键词：海洋生物学对虾白斑综合症病毒极早期基因启动子筛选文库增强型绿色荧光蛋白

索马里海盆多金属结核中关键金属富集机制及古环境记录

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岩石学报 2023年第9期39卷 2778-2794页

作者：程宇龙徐勇航李东义陈坚李云海林梵宇尹希杰自然资源部第三海洋研究所海洋与海岸地质研究室厦门361005 福建省海洋物理与地质过程重点实验室厦门361005 中国科学院海洋研究所海洋地质与环境重点实验室青岛266071 中国科学院大学北京100049

多金属结核富含Mn、Fe、Ni、Cu等元素以及Co和REY(稀土元素和钇)等关键金属,是重要的大洋矿产资源。为了探究西北印度洋索马里海盆结核中关键金属的富集机制及古环境记录,本文使用X射线衍射仪(XRD)分析了一个结核的矿物成分,并通过激光... 详细信息

多金属结核富含Mn、Fe、Ni、Cu等元素以及Co和REY(稀土元素和钇)等关键金属,是重要的大洋矿产资源。为了探究西北印度洋索马里海盆结核中关键金属的富集机制及古环境记录,本文使用X射线衍射仪(XRD)分析了一个结核的矿物成分,并通过激光剥蚀电感耦合等离子体质谱仪(LA-ICPMS)和电子探针(EPMA)原位分析了该结核的微区元素组成。结果表明,研究区结核内层为柱状结构,中间为掌状,外层又变为柱状。结核主要由水成型富铁层构成,但外层中还存在薄的(100~200μm)成岩-混合型富锰层。富铁层MnO平均含量为25.1%,FeO为30.4%,Co为0.26%,Ni为0.24%,Cu为0.09%,ΣREY为1981×10^(-6)。富锰层MnO平均含量为52.0%,FeO为7.40%,Co为0.09%,Ni为2.45%,Cu为0.53%,ΣREY为719×10^(-6)。富铁层主要由含铁水羟锰矿构成,而富锰层主要由Ⅰ型布赛尔矿构成。Ni和Cu主要赋存于Ⅰ型布赛尔矿,Co和REY则主要赋存于含铁水羟锰矿中,并且Co存在一个“拐点”。富锰矿物(Ⅰ型布赛尔矿)相对更富集HREE,而含铁水羟锰矿中更富集LREE。从内到外,结核中ΣREY呈下降趋势,REY的变化主要受Ce影响。结核Mn/Fe比值与δCe不相关,但生长速率与δCe显著负相关,表明生长速率可能是控制Ce异常的主要因素,仅凭Ce异常不能区分结核微区的成因及氧化还原环境。根据Co经验公式估算,索马里海盆结核形成年龄为~1.46Ma。柱状结构的开始形成可能与早更新世晚期的古海洋环境转型有关。而掌状结构开始生长于~0.6Ma,中更新世气候转型之后风尘增加使得结核中Si和Al增加,并稀释了其他成矿元素。结核富锰层可能生长于末次间冰期的亚氧化底层水环境,且具有一定对称性和渐变性,指示了氧化还原环境的逐渐改变和恢复。

关键词：索马里海盆多金属结核关键金属富集机制古环境记录

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微区XRF技术分析无机元素在植物中的原位分布

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植物学报 2020年第6期55卷 733-739页

作者：林梵宇尹希杰梁毓娜黄杰超自然资源部第三海洋研究所厦门361005

植物的无机元素分布特征对植物生理过程具有重要的指标作用,可揭示营养物质分布、代谢途径及毒理耐受性等多种生命过程。用微区XRF技术测试样品中无机元素的分布,具有原位无损、可进行较大面积样品连续成像分析以及前处理过程简单等诸... 详细信息

植物的无机元素分布特征对植物生理过程具有重要的指标作用,可揭示营养物质分布、代谢途径及毒理耐受性等多种生命过程。用微区XRF技术测试样品中无机元素的分布,具有原位无损、可进行较大面积样品连续成像分析以及前处理过程简单等诸多优势。将微区XRF技术应用于植物样品不同器官的无机元素分布检测,旨在探讨该技术在植物样品测试中的仪器参数选择、样品前处理方法和数据后处理手段等对测试结果的影响。为得到可靠的实验结果,对不同含水量的器官进行不同的前处理,并比较不同驻留时间、测试腔体真空与否等仪器条件对测试结果的影响,同时对数据处理方法进行探索,包括对获得的数据进行图像叠加及对不同元素浓度比例进行半定量分析。研究结果表明,微区XRF技术测试植物样品中无机元素分布具有一定的技术优势。

关键词：植物微区XRF 元素分布原位无损

利用微区XRF技术的大洋固体矿产成分快速无损检测

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海洋地质与第四纪地质 2021年第1期41卷 223-232页

作者：林梵宇尹希杰黄威黄杰超梁毓娜自然资源部第三海洋研究所厦门361005 中国地质调查局青岛海洋地质研究所青岛266071

深海固体矿产主要由铁锰结核、富钴结壳和多金属热液硫化物组成,元素在矿产中原位的分布和含量,对了解矿物成因、品位以及评估其经济价值有重要指示作用。本研究利用微区XRF分析技术对铁锰结核、富钴结壳、热液硫化物3种大洋类型矿产样... 详细信息

深海固体矿产主要由铁锰结核、富钴结壳和多金属热液硫化物组成,元素在矿产中原位的分布和含量,对了解矿物成因、品位以及评估其经济价值有重要指示作用。本研究利用微区XRF分析技术对铁锰结核、富钴结壳、热液硫化物3种大洋类型矿产样品,进行高分辨、原位和无损的多元素空间分布检测,结果显示了不同元素在3种类型矿物中的空间分布特征。通过对测试数据进一步处理和优化成图流程,可以获得特定元素在矿物中半定量分布图,并对不同元素在矿物空间分布的差异性和相关性进行对比分析,从而建立一种肉眼可见的测试大洋矿产资源样品中元素原位分布的新方法。

关键词：结核结壳热液硫化物微区XRF 元素分布原位无损

绣球属(Hydrangea L.)不育花萼片微形态以及元素含量和分布的分析

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分子植物育种 2023年

作者：张梅杨加文林梵宇刘雅倩童琪汤升虎何选泽徐建贵州省植物园自然资源部第三海洋研究所西宁市园林植物园

绣球属(Hydrangea)隶属于绣球花科(Hydrangeaceae)的绣球族(Hydrangeeae)。该属多数为灌木，蒴果顶端突出或截平，其最大的特点是具有不育花，花序硕大、色彩丰富，具有重要的观赏价值。然而，如何控制该属不育花的花色是育种领域的一... 详细信息

绣球属(Hydrangea)隶属于绣球花科(Hydrangeaceae)的绣球族(Hydrangeeae)。该属多数为灌木，蒴果顶端突出或截平，其最大的特点是具有不育花，花序硕大、色彩丰富，具有重要的观赏价值。然而，如何控制该属不育花的花色是育种领域的一大难题。应用能谱-扫描电子显微镜技术和微区X射线荧光元素分析测试，对绣球属14种植物不育花萼片的微形态性状进行观察、元素分布和含量进行分析。结果表明：不育花萼片表面的细胞轮廓分为2种类型为轮廓明显型和轮廓不明显型；垂周壁为波状或者进平直型；细胞表面纹饰为皱褶状、脊状、条状以及脑纹状雕纹；不育花萼片毛被为光滑型或棘状突起型；气孔形状可分为椭圆型、狭椭圆形、纺锤形和近圆形；这些性状在绣球属植物物种演化研究方面具有重要的参考价值。在绣球属不育花瓣中分析了元素周期表钠(Na)以后的14种元素，即镁(Mg)、铝(Al)、磷(P)、硫(S)、钾(K)、钙(Ca)、钛(Ti)、铬(Cr)、锰(Mn)、铁(Fe)、镍(Ni)、铜(Cu)、锌(Zn)、铂(Pb)；其中，含量比较高的元素是钾(56.497%)、钙(28.481%)，含量比较少的元素是镍(0.266%)、锌(0.315%)、铜(0.438%)和铝(0.461%)；在花瓣组织和细胞水平上，元素分布和含量特征基本一致。

关键词：绣球属分类学微形态不育花元素分布