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基于糖谱法的地黄药材及饮片定性定量分析

中国实验方剂学杂志 2024年第18期30卷 157-163页

作者：戴梦茹李春李娆娆林丽美沈春修张永欣冯伟红王智民中国中医科学院中药研究所中药质量控制技术国家工程实验室北京100700 宜春学院江西省作物生长发育调控重点实验室江西宜春336000 湖南中医药大学长沙410208

目的:以地黄中低聚糖类成分为研究对象,建立含量测定方法及薄层色谱法(TLC)鉴别方法,探究不同地黄药材及饮片中低聚糖类成分含量及分布规律。方法:收集鲜地黄和生地黄药材各10批,生地黄和熟地黄饮片各12批,采用硅胶G薄层板,以乙酸乙酯-... 详细信息

目的:以地黄中低聚糖类成分为研究对象,建立含量测定方法及薄层色谱法(TLC)鉴别方法,探究不同地黄药材及饮片中低聚糖类成分含量及分布规律。方法:收集鲜地黄和生地黄药材各10批,生地黄和熟地黄饮片各12批,采用硅胶G薄层板,以乙酸乙酯-水-无水甲酸-冰乙酸(12∶6∶5∶4)为展开剂,10%硫酸乙醇溶液为显色剂,建立地黄中果糖、蔗糖、棉籽糖、甘露三糖和水苏糖的TLC鉴别方法;采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD),建立不同地黄药材及饮片中果糖、葡萄糖、蔗糖、蜜二糖、棉籽糖、甘露三糖和水苏糖7种糖类成分的含量测定方法。对不同地黄药材及饮片中7种糖类成分含量进行主成分分析(PCA)及偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA),以变量重要性投影(VIP)值>1筛选差异性成分。结果:TLC鉴别结果显示,鲜地黄、生地黄药材和生地黄饮片样品在与水苏糖、棉籽糖和蔗糖对照品相应的位置上显现相同颜色的斑点,而熟地黄饮片在此基础上与甘露三糖和果糖对照品相应的位置上显示相同颜色的斑点。7种待测成分的方法学考察结果均符合含量测定的要求。鲜地黄、生地黄药材中仅检出葡萄糖、蔗糖、棉籽糖和水苏糖,其在鲜地黄药材中的平均质量分数分别为0.84%、4.62%、2.42%和57.90%,在生地黄药材中的平均质量分数分别为3.16%、9.36%、7.05%和38.10%。生地黄饮片中,果糖、葡萄糖、蔗糖、蜜二糖、棉籽糖、甘露三糖和水苏糖的平均质量分数分别为1.68%、4.27%、9.96%、0.53%、6.85%、3.05%和37.52%;熟地黄饮片中,上述7种糖的平均质量分数分别为10.62%、11.01%、1.25%、3.35%、1.12%、28.16%和6.39%。多元统计分析结果显示,糖类成分可明显区分鲜地黄、生地黄和熟地黄,三者的主要差异性成分分别为水苏糖、蔗糖、棉籽糖和甘露三糖。结论:地黄不同药材及饮片中糖类成分的含量及种类存在较大差异,且基于此建立的薄层色谱鉴别方法可用于区分生地黄和熟地黄,可为地黄质量标准提升和地黄不同炮制品中低聚糖开发及应用奠定基础。

关键词：地黄单糖低聚糖定性分析定量分析主成分分析(PCA) 偏最小二乘法-判别分析(PLS-DA)

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肿瘤微环境中NLRP3炎症小体对乳腺癌转移的研究现状

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中国临床药理学杂志 2024年第14期40卷 2148-2152页

作者：华林晔罗弘杉林秀莲林丽美夏伯候李亚梅湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208 湖南中医药大学医学院湖南长沙410208

NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在乳腺癌组织中的表达水平明显升高,高水平的NLRP3炎症小体与乳腺癌的转移密切相关。NLRP3炎症小体激活可诱导炎性因子释放至肿瘤微环境(TME)。炎性因子通过向癌细胞传递信号而重构TME促... 详细信息

NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体在乳腺癌组织中的表达水平明显升高,高水平的NLRP3炎症小体与乳腺癌的转移密切相关。NLRP3炎症小体激活可诱导炎性因子释放至肿瘤微环境(TME)。炎性因子通过向癌细胞传递信号而重构TME促进肿瘤生长和侵袭,进而促进细胞发生上皮-间充质转化,赋予癌细胞获得向远处靶器官定植的能力,增加转移性病灶。本文针对乳腺癌TME下NLRP3炎症小体与乳腺癌转移的研究现状以及研究前景进行综述,以期能为研究乳腺癌转移机制和治疗方案提供新思路。

关键词：乳腺癌肿瘤转移 NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3炎症小体肿瘤微环境

基于UPLC-MS/MS的夏枯草不同时期的果穗差异代谢物分析

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2734-2744页

作者：陆玉爱刘恃君林丽美侯师艺戈玉莹谢菁琛严婧夏伯候湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

夏枯草因夏至而枯得名,不同采收时期对其品质的形成影响重大。然而,目前对夏枯草不同时期果穗化学成分的变化研究较少,所涉及的代谢产物尚不清楚。为了阐明夏枯草果穗的代谢物及代谢通路,该实验采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)... 详细信息

夏枯草因夏至而枯得名,不同采收时期对其品质的形成影响重大。然而,目前对夏枯草不同时期果穗化学成分的变化研究较少,所涉及的代谢产物尚不清楚。为了阐明夏枯草果穗的代谢物及代谢通路,该实验采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)结合广泛靶向代谢组学技术整体表征夏枯草不同时期的果穗化合物差异性,利用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)等多元统计方法鉴定差异代谢物,并且对相关代谢通路进行分析。代谢组学的结果共鉴定出了602种代谢物,其中有机酸及其衍生物数量最多,黄酮类次之;根据VIP>1且P<0.05,发现羟基苯甲酸、没食子酸等为其主要差异代谢物;富集分析结果提示异黄酮类化合物的生物合成、氨基苯甲酸盐的降解、苯甲酸盐的降解、花青素的生物合成、代谢途径、不同环境中的微生物代谢、植物次级代谢物的生物合成、色氨酸的代谢、苯丙酸类物质的生物合成等代谢通路为主要通路。这些结果旨在阐明夏枯草差异代谢物的动态变化情况,为深入研究夏枯草果穗采收机制提供理论依据。

关键词：夏枯草不同时期 UPLC-MS/MS 代谢组学代谢通路

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细胞生物学实验教学的BOPPPS教学模式构建和探索

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科教导刊（电子版） 2024年第16期 187-189页

作者：林艳李亚梅林丽美湖南中医药大学药学院湖南长沙 410208

细胞生物学是培养实践创新能力重要环节之一,而实验教学更是起着重要的作用.细胞生物学实验在中医药院校多个专业中开设,但学生因积极主动性差,学时安排紧张,学生创新实践能力得不到充分提高.因此,探索一种有效可行的细胞生物学实验教... 详细信息

细胞生物学是培养实践创新能力重要环节之一,而实验教学更是起着重要的作用.细胞生物学实验在中医药院校多个专业中开设,但学生因积极主动性差,学时安排紧张,学生创新实践能力得不到充分提高.因此,探索一种有效可行的细胞生物学实验教学模式十分必要.文章就中医药院校细胞生物学实验课程的现阶段存在的问题进行阐述,并引入BOPPPS教学模式,以经典实验"细胞骨架"为例,探索该模式在细胞生物学实验教学中的具体应用模式,激发学生的主观能动性,提高学生学习热情,促进创新思维能力和创新实践能力的提高,为中医药院校细胞生物学实验课程教学提供一定的参考.

关键词： BOPPPS教学模式细胞生物学实验教学细胞骨架

来源：博看期刊评论

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竹节伸筋饮片质量标准研究

中医药导报 2024年第3期30卷 66-69页

作者：欧巧玲王竹鑫周宜林丽美包敏胡冠羽湖南中医药大学第二附属医院湖南长沙410005 湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 株洲市食品药品检验所湖南株洲412000

目的:基于2010年版《湖南省中药饮片炮制规范》优化竹节伸筋饮片质量标准。方法:以收集的样本复核原标准中性状和理化鉴别;采用电子显微镜观察横截面和粉末鉴别特征;参照2020年版《中华人民共和国药典》标准测定水分、总灰分和醇溶性浸... 详细信息

目的:基于2010年版《湖南省中药饮片炮制规范》优化竹节伸筋饮片质量标准。方法:以收集的样本复核原标准中性状和理化鉴别;采用电子显微镜观察横截面和粉末鉴别特征;参照2020年版《中华人民共和国药典》标准测定水分、总灰分和醇溶性浸出物的含量。结果:性状鉴别和理化鉴别均沿用原标准。横截面鉴别中,未见原标准所述“外韧型维管束”。新增粉末鉴别,特征结构含针晶束、非腺毛、网纹导管等。新增水分、灰分及醇浸出物限量值,并推荐限量值分别为不得过12%、不得过7.0%及不得少于28.0%。结论:该质量标准在原标准上有较大提升,能够更为全面地控制竹节伸筋饮片的质量。

关键词：竹节伸筋中药饮片质量标准显微鉴别含量测定

基于GC-MS的血清代谢组学探究夏枯草茎叶酚酸抗慢性盆腔炎的作用机制

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湖南中医药大学学报 2024年第2期44卷 235-244页

作者：李珊谭知浩肖志葵熊苏慧罗弘杉谢菁琛林丽美湖南中医药大学药学院湖南长沙410208 湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的基于GC-MS的血清代谢组学探究夏枯草茎叶酚酸抗慢性盆腔炎的有效成分及其作用机制。方法本实验采用60只雌性大鼠,采用混合菌液加机械损伤对40只大鼠进行慢性盆腔炎造模处理,正常组10只大鼠不做处理,假手术组10只大鼠只做机械损伤。... 详细信息

目的基于GC-MS的血清代谢组学探究夏枯草茎叶酚酸抗慢性盆腔炎的有效成分及其作用机制。方法本实验采用60只雌性大鼠,采用混合菌液加机械损伤对40只大鼠进行慢性盆腔炎造模处理,正常组10只大鼠不做处理,假手术组10只大鼠只做机械损伤。造模成功后,将模型大鼠分为模型组、康妇炎胶囊组、头孢克洛分散片组和夏枯草茎叶酚酸组,每组10只,连续给药21 d;取正常组、假手术组、模型组和夏枯草茎叶酚酸组、康妇炎胶囊组、头孢克洛分散片组大鼠血清进行代谢组学分析,并对筛选后的差异表达基因进行GO功能分析和KEGG通路富集分析。结果夏枯草茎叶酚酸能修复慢性盆腔炎组织病理损伤;代谢组学鉴定出47种代谢物,主要以糖类、氨基酸、有机酸、脂肪酸、多元醇等多种内源性物质为主;多因素分析表明,夏枯草可改善炎症大鼠血清代谢产物异常。主要差异代谢通路为氨基酸代谢、抗坏血酸和醛糖二酸代谢途径,主要差异代谢物为尿素、葡萄糖酸、D-葡萄糖醛酸、L-赖氨酸、甘氨酸、L-丝氨酸、L-苏氨酸、L-脯氨酸、L-苯丙氨酸等,还影响机体苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸生物合成,抗坏血酸和醛糖二酸代谢,苯丙氨酸代谢,花生四烯酸代谢,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢。GO功能分析表明,对激素的反应、细胞对氮化合物的反应和磷酸化的正向调节等是主要参与的生物过程。KEGG通路富集结果显示,PI3K-Akt信号通路、甲状腺激素信号通路和内分泌抵抗等为主要富集的通路。结论夏枯草茎叶酚酸对慢性盆腔炎大鼠具有明显的治疗作用,其机制可能与作用于COBT、ADH1C、MAOB等靶点,干预PI3K-Akt信号通路、甲状腺激素信号通路和内分泌抵抗等信号通路,引起差异代谢物变化有关。

关键词：夏枯草茎叶酚酸慢性盆腔炎血清代谢组学气相色谱-质谱法

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基于顶空气相色谱-离子迁移谱法评价金银花和山银花风味性物质的差异

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中国中药杂志 2022年第14期47卷 3798-3805页

作者：汤杨黔南李利林丽美李亚梅夏伯候湖南中医药大学湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

金银花与山银花作为药食同源的传统中药材,在药品、食品、保健品等行业广泛应用,然而,其风味性物质的差异分析尚缺整体研究。该研究基于顶空气相色谱-离子迁移谱法(headspace gas chromatography-ion mobility spectroscopy, HS-GC-IMS... 详细信息

金银花与山银花作为药食同源的传统中药材,在药品、食品、保健品等行业广泛应用,然而,其风味性物质的差异分析尚缺整体研究。该研究基于顶空气相色谱-离子迁移谱法(headspace gas chromatography-ion mobility spectroscopy, HS-GC-IMS)分析金银花与山银花的风味性物质差异,并通过多元统计分析筛选差异标志物。结果表明,金银花与山银花中共鉴定47个风味性物质之间存在显著差异,其差异的主要标志物为乙酸乙酯(ethyl acetate)、丙醇(propyl alcohol)、 1-辛醇(1-octanol)、1-己醇(1-hexanol)、己醛(hexanal)和顺式-3-己烯-1-醇[(Z)-3-hexen-1-ol],通路分析表明这些标志物参与了主要次生代谢的合成、硫代谢通路及其他风味性物质的形成。该研究为金银花与山银花的风味性物质评价及药食两用产品的开发提供了重要的参考。

关键词：金银花山银花 HS-GC-IMS 风味物质多元统计分析

山香圆叶挥发油化学成分及抗氧化和抗炎活性研究

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天然产物研究与开发 2022年第5期34卷 723-738页

作者：刘昭李利汤杨黔南林丽美夏伯候湖南中医药大学长沙410208 湖南省中医药研究院长沙410013

山香圆叶具有较好的临床疗效,但其挥发油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文应用超临界萃取法提取其挥发油,采用GC-MS对其小极性物质进行全面分析(甲酯化和非甲酯化),并对其中等极性物质进行LC-MS分析,采用了DPPH法和ABTS法测定了... 详细信息

山香圆叶具有较好的临床疗效,但其挥发油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文应用超临界萃取法提取其挥发油,采用GC-MS对其小极性物质进行全面分析(甲酯化和非甲酯化),并对其中等极性物质进行LC-MS分析,采用了DPPH法和ABTS法测定了其抗氧化活性,采用LPS诱导RAW 264.7细胞模型探索山香圆叶挥发油的抗炎活性。GC-MS非甲酯化和甲酯化分别鉴定了38和42个化合物,主要为亚油酸、γ-谷甾醇、角鲨烯、2,2′-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)、反-9-十八碳烯酸、棕榈酸等物质。LC-MS的正负离子模式下,共鉴定出256个化合物,主要为萜类、苯丙素类、酚类、黄酮类、生物碱类、香豆素及其衍生物类、脂肪酰类、倍半萜类、脂肪酸类等化合物。活性研究表明,山香圆叶挥发油具有较好的抗DPPH和ABTS自由基能力,同时能显著抑制LPS诱导RAW 264.7细胞NO和IL-6的释放量,且成剂量依赖性。以上结果表明,山香圆叶挥发油具有较复杂的化学成分,并具有较好的抗氧化和抗炎作用,可作为开发功能性食品和药品的天然来源。

关键词：山香圆叶挥发油化学成分抗氧化抗炎

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低温作用下公路路面沥青混合料性能研究

江西建材 2023年第6期 36-38页

作者：林丽美福建省华福工程检测有限公司福建泉州362000

为分析低温环境下公路的性能特点,文中开展低温劈裂试验、低温弯曲试验以及低温蠕变试验,对3种沥青混合料的劈裂强度、弯拉强度以及蠕变性能进行分析,并选取SMA-13沥青混合料进行对比试验,以此分析出低温性能更佳的沥青混合料。结果表明... 详细信息

为分析低温环境下公路的性能特点,文中开展低温劈裂试验、低温弯曲试验以及低温蠕变试验,对3种沥青混合料的劈裂强度、弯拉强度以及蠕变性能进行分析,并选取SMA-13沥青混合料进行对比试验,以此分析出低温性能更佳的沥青混合料。结果表明,SMA-13沥青混合料低温性能较强,15℃为SMA-13弯拉强度和AC-13弯拉强度的性能分界点;低温蠕变速率不能作为混合料抗裂性能的重要指标;SMA-13环氧沥青混合料的劈裂强度和弯拉强度比改性沥青材料SMA-13高,在实际应用中,环氧沥青混合料应多加推广。

关键词：沥青低温试验蠕变变形