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基于p38 MAPK信号通路探讨电针对大鼠失神经骨骼肌萎缩的影响

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中国针灸 2024年

作者：邱玮唐成林廖偲杨云昊杨燕杨康彭万春重庆医科大学中医药学院中医药防治代谢性疾病重庆市重点实验室

目的：评估电针对失神经骨骼肌萎缩大鼠步态、氧化应激、炎性反应及蛋白质降解的影响，探讨电针缓解失神经骨骼肌萎缩的可能机制。方法：将40只雄性8周龄SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、p38 MAPK抑制剂组，每组10只。模型组... 详细信息

目的：评估电针对失神经骨骼肌萎缩大鼠步态、氧化应激、炎性反应及蛋白质降解的影响，探讨电针缓解失神经骨骼肌萎缩的可能机制。方法：将40只雄性8周龄SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、p38 MAPK抑制剂组，每组10只。模型组、电针组、p38 MAPK抑制剂组予手术横断右侧坐骨神经构建大鼠失神经骨骼肌萎缩模型，假手术组仅暴露神经，不离断。造模成功1 d后，电针组大鼠予电针干预，穴取右侧“环跳”“足三里”，选择连续波，频率2 Hz，电流1 mA，每次15 min，每天1次，每周6次；p38 MAPK抑制剂组予SB203580（5 mg/kg）腹腔注射，每天1次，每周6次，共干预3周。干预结束后，采用CatWalk XT 10.6动物步态分析仪记录大鼠步态参数；取材后计算大鼠腓肠肌湿重比；HE染色观察大鼠腓肠肌肌纤维形态与横截面积；ELISA法检测大鼠腓肠肌白介素（IL）-6、IL-1β、肿瘤坏死因子（TNF）-α含量；生化羟胺法检测大鼠腓肠肌中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量；免疫组化染色法和Western Blot法检测大鼠腓肠肌中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化(p)-p38 MAPK、肌肉萎缩盒F基因（Atrogin-1）、肌肉环状指基因1（Murf-1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）的表达。结果：与假手术组比较，模型组大鼠站立持续时间、摆动时间、步行周期增加（P<0.001），最大接触时间的足印面积、最大接触时间的平均强度、平均强度、打印面积、摆动速度、步周长减少（P<0.001），腓肠肌湿重比和肌纤维横截面积减少（P＜0.001），腓肠肌IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA含量升高（P＜0.001），SOD含量降低（P＜0.001），腓肠肌中p-p38、Atrogin-1、Murf-1阳性表达和蛋白表达升高（P＜0.001），Nrf2、HO-1阳性表达和蛋白表达降低（P＜0.001）；与模型组比较，电针组和p38 MAPK抑制剂组大鼠站立持续时间、摆动时间、步行周期减少（P＜0.01），最大接触时间的足印面积、最大接触时间的平均强度、平均强度、打印面积、摆动速度、步周长增加（P<0.01），腓肠肌湿重比和肌纤维横断面积增加（P＜0.01，P<0.05），腓肠肌IL-6、IL-1β、TNF-α、MDA含量降低（P＜0.01，P<0.05），SOD含量升高（P＜0.01，P<0.05），腓肠肌中p-p38、Atrogin-1、Murf-1阳性表达和蛋白表达降低（P＜0.01，P<0.05），Nrf2、HO-1阳性表达和蛋白表达升高（P＜0.01，P<0.05）。结论：电针可能通过介导失神经骨骼肌萎缩大鼠骨骼肌中的p38 MAPK信号通路，进而抑制氧化应激、炎性反应和蛋白质降解，缓解骨骼肌萎缩。

关键词：失神经骨骼肌萎缩电针 p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号通路步态分析氧化应激炎性反应

硬X射线显微和纳米CT技术在细胞成像中的应用

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硬X射线显微和纳米CT技术在细胞成像中的应用

作者：杨云昊中国科学技术大学

学位级别：硕士

X射线显微技术和纳米CT技术,可解析完整细胞的内部三维结构,有着传统细胞成像技术无法比拟的优势。而硬X射线显微术因为焦深大、穿透能力强,因此可以克服软X射线显微术难以成像较厚细胞的缺陷,具有重要的应用价值。硬X射线显微术用于细... 详细信息

X射线显微技术和纳米CT技术,可解析完整细胞的内部三维结构,有着传统细胞成像技术无法比拟的优势。而硬X射线显微术因为焦深大、穿透能力强,因此可以克服软X射线显微术难以成像较厚细胞的缺陷,具有重要的应用价值。硬X射线显微术用于细胞成像主要困难在于成像衬度低。我们发展了一套适合硬X射线细胞成像的样品准备流程,结合泽尼克相位衬度,在8keV下成功地实现了裂殖酵母细胞的二维和三维成像,成像衬度足以解析细胞超微结构。从成像结果中可以得到很多生物学上的有用信息。此研究证明了硬X射线显微术用于细胞成像的可行性。本论文主要开展了以下几个方面的工作:1.总结了细胞成像和X射线显微技术。结合相位衬度成像和纳米CT等新技术,分析了X射线显微技术应用于细胞成像的优势、现状和前景。特别的,分析了硬X射线显微技术在细胞成像中的独特优势,阐明了开发硬X射线显微和纳米CT技术在细胞成像方面的能力和方法学的重要意义。2.硬X射线细胞成像的方法学研究。发展出了适合硬X射线细胞成像的样品准备流程:固定、染色、脱水、干燥。经过这些处理的裂殖酵母细胞,在8 keV下的相位衬度模式中,显示了良好衬度,足以解析细胞超微结构。运用纳米CT技术在优于100 nm的分辨率下,在三维上揭示了完整细胞的亚细胞结构组织。对比了相位衬度与吸收衬度的成像结果,阐明了相位衬度在硬X射线细胞成像中的显著优势。另外,还分析了各种因素对成像结果的影响。3.硬X射线细胞成像的生物学研究。从生物学上分析了裂殖酵母细胞成像结果。分析了细胞壁所显现的层状结构,得出了三层结构的来源和组成;对胞内细胞器进行了三维分割,并进一步进行了鉴定;分析了两种具有显著不同的结构组织的细胞,推断出它们分别处于指数生长期和静止期,并定量测量了它们之间各种亚细胞结构的差别。

关键词：细胞成像硬X射线显微技术纳米CT 相位衬度样品处理亚细胞结构

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S市社会养老保险基金保值增值策略研究

S市社会养老保险基金保值增值策略研究

作者：杨云昊东北大学

学位级别：硕士

人口老龄化,是世界各国都将面临的一个重要问题。而人口老龄化带来的最直接的问题就是社会养老问题,社会养老问题如果无法妥善解决,国家政治、经济将无法稳定发展。目前,随着我国人口老龄化日益严重,如果不能实现社会养老保险基金的保... 详细信息

人口老龄化,是世界各国都将面临的一个重要问题。而人口老龄化带来的最直接的问题就是社会养老问题,社会养老问题如果无法妥善解决,国家政治、经济将无法稳定发展。目前,随着我国人口老龄化日益严重,如果不能实现社会养老保险基金的保值增值,将会对社会的政治经济发展带来巨大的隐患。长期以来,社会养老保险基金的投资受到国家政策的严格把控,只能存入银行或者购买国债,投资收益率相对较低。另一方面,由于历史原因造成的个人账户空账运行,社会养老保险基金支出方面压力巨大,已经开始出现收不抵支的趋势。近年来,国家也开始逐步放宽对社会养老保险基金的投资渠道的限制,允许基金进行专业化、市场化运营。同时各地方基金管理部门也在积极探索委托给专业运营机构进行运营的方式,并取得了不错的成效。此外,随着各地社会养老保险基金挪用、贪腐案件的不时曝光,社会养老保险基金监管问题也逐渐被暴露出来,因此为了基金的安全运营,如何切实有效的对基金进行监管也成为了亟待解决的问题。S市,隶属于辽宁省,由于工业化起步较早,大规模的劳动力进入工厂成为产业工人,为建国初期的经济建设做出了重要贡献。但是随着S市人口老龄化的加剧,个人账户的空账运行导致缺少相应的基金积累,因此S市社会养老保险基金支付压力尤其突出。本文将以S市为例,结合本人的实际工作,运用Markowitz资产组合理论模型,在基金保值目标和基金增值目标之下分别列出最优投资组合策略。此外,通过借鉴国内外社会养老保险基金监管的先进经验,对S市社会养老保险基金监管方面所面临的问题提出一些建议,让基金在科学、安全而有效的监管之下进行投资运营,达到基金保值增值的目标。

关键词：社会养老保险基金基金监管保值增值投资组合市场化

电针对快速衰老小鼠肝脏自噬及脂质代谢影响的研究

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电针对快速衰老小鼠肝脏自噬及脂质代谢影响的研究

作者：杨云昊重庆医科大学

学位级别：硕士

目的研究电针对快速衰老小鼠(SAMP8)肝脏中自噬相关因子LC3-Ⅱ、Beclin1、Atg7、p62表达的影响,探讨电针改善快速衰老小鼠肝脏脂质代谢紊乱,延缓其肝脏衰老的机制。方法将30周龄雄性SAMP8小鼠按照随机数字表法分组,分别为模型组、电针... 详细信息

目的研究电针对快速衰老小鼠(SAMP8)肝脏中自噬相关因子LC3-Ⅱ、Beclin1、Atg7、p62表达的影响,探讨电针改善快速衰老小鼠肝脏脂质代谢紊乱,延缓其肝脏衰老的机制。方法将30周龄雄性SAMP8小鼠按照随机数字表法分组,分别为模型组、电针组、雷帕霉素组,每组7只;用7只同周龄抗快速老化SAMR1小鼠作为对照组。对照组和模型组动物常规饲养4周,不进行任何干预;电针组予双侧“肾俞”“太冲”穴电针治疗4周(15 min/次,1次/d,连续6 d/w);雷帕霉素组采用雷帕霉素按(10 mg·kg·d)腹腔注射干预4周(1次/d,连续6 d/w)。检测小鼠的血清脂质代谢情况、肝脏脂质沉积情况、肝脏自噬体的分布、肝脏LC3-Ⅱ、Beclin1、Atg7、p62蛋白表达与m RNA表达的变化。结果与对照组比较,模型组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)显著升高(p0.05)。结论电针能够减轻肝脏脂质代谢紊乱,可能与调节肝脏自噬相关因子LC3-Ⅱ、Beclin1、Atg7、p62的表达变化,促进SAMP8小鼠肝脏自噬有关。

关键词：衰老电针自噬脂质代谢

基于TLR4/NF-κB/NLRP3通路探讨电针对阿尔茨海默病小鼠认知障碍的影响

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针刺研究 2022年第7期47卷 565-572页

作者：廖冬梅庞芳周敏李怡杨云昊郭啸唐成林重庆医科大学中医药学院重庆400016

目的:观察电针对APP/PS1双转基因小鼠结肠和海马中紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1及海马Toll样受体4/核转录因子κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)通路的影响,探讨电针改善阿尔茨海默病认知障碍的机制。方法:5月龄雄性APP/PS1双... 详细信息

目的:观察电针对APP/PS1双转基因小鼠结肠和海马中紧密连接相关蛋白Claudin-5、ZO-1及海马Toll样受体4/核转录因子κB/NOD样受体蛋白3(TLR4/NF-κB/NLRP3)通路的影响,探讨电针改善阿尔茨海默病认知障碍的机制。方法:5月龄雄性APP/PS1双转基因小鼠随机分为模型组、电针组,同月龄雄性C57BL/6小鼠作为对照组,每组9只。电针组电针“百会”“大肠俞”“足三里”,15min/次,每周5次,干预5周。干预结束后,用Morris水迷宫评估小鼠学习记忆能力,尼氏染色法观察小鼠海马区病理形态,免疫组织化学法检测小鼠脑组织β淀粉样蛋白(Aβ)表达,ELISA法检测小鼠结肠、血清、海马组织中脂多糖(LPS)含量,Western blot法检测小鼠结肠Claudin-5、ZO-1和海马Claudin-5、ZO-1及TLR4/NF-κB/NLRP3通路相关蛋白的表达。结果:与对照组比较,从第3天开始,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.05,P<0.01),穿越原平台次数、目标象限停留时间百分比显著减少(P<0.01),结肠、血清及海马组织中LPS含量显著升高(P<0.01),海马TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达及脑组织Aβ表达均显著升高(P<0.01),结肠及海马Claudin-5、ZO-1蛋白表达均显著降低(P<0.01)。与模型组比较,电针组小鼠第4、5天逃避潜伏期缩短(P<0.05,P<0.01),穿越原平台次数、目标象限停留时间百分比增加(P<0.01,P<0.05),血清及海马组织LPS含量降低(P<0.05),海马TLR4、NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-1β、TNF-α蛋白表达及脑组织Aβ表达均降低(P<0.05,P<0.01),结肠及海马Claudin-5、ZO-1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。对照组小鼠海马CA1和CA3区神经元排列整齐、紧密;模型组神经元排列疏散,层数减少,部分细胞固缩、深染,尼氏小体数量减少;电针组神经元排列相对紧密,层数增加,无明显固缩,尼氏小体数量增加。结论:电针可能通过上调Claudin-5、ZO-1的表达,减少肠源性LPS向中枢易位,抑制中枢TLR4/NF-κB/NLRP3炎性通路过度活化,减轻中枢神经炎性反应,改善APP/PS1小鼠的认知障碍。

关键词：阿尔茨海默病脑-肠轴电针 TLR4/NF-κB/NLRP3通路认知障碍

基于肠道菌群探讨电针对APP/PS1小鼠认知能力的改善机制

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中国病理生理杂志 2021年第10期37卷 1774-1783页

作者：廖冬梅庞芳杨云昊夏青倩李怡郭啸唐成林重庆医科大学中医药学院重庆400016 重庆医科大学基础医学院重庆400016

目的:观察电针对APP/PS1双转基因小鼠肠道菌群及相关炎症因子表达的影响,探讨其对小鼠认知能力的改善机制。方法:14只5月龄APP/PS1雄性小鼠随机分成模型组和电针组,同月龄C57BL/6雄性小鼠作为对照组,每组7只。电针组选取"百会"、"大肠俞... 详细信息

目的:观察电针对APP/PS1双转基因小鼠肠道菌群及相关炎症因子表达的影响,探讨其对小鼠认知能力的改善机制。方法:14只5月龄APP/PS1雄性小鼠随机分成模型组和电针组,同月龄C57BL/6雄性小鼠作为对照组,每组7只。电针组选取"百会"、"大肠俞"和"足三里"穴干预,连续波,频率2 Hz,强度1.0 mA,每日1次,每次15 min,1周5次,连续5周。Morris水迷宫评估小鼠认知能力;Western blot检测结肠组织核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)的表达;ELISA检测结肠组织及血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-18的含量;16S rDNA扩增子测序法检测小鼠粪便菌群。结果:与对照组相比,从训练第2天开始,模型组小鼠逃避潜伏期延长(P0.05);属水平上,相较于模型组,电针组副萨特氏菌、理研菌等相对丰度降低(P0.05)。结论:电针改善APP/PS1小鼠认知能力的机制可能与调节肠道菌群,降低结肠组织NLRP3蛋白表达量,结肠及血清TNF-α,IL-1β和IL-18含量,改善肠源性及外周血炎症反应有关。

关键词：阿尔茨海默病肠道菌群电针炎症认知

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车货供需匹配模型与算法研究综述

交通运输工程与信息学报 2024年第1期22卷 191-205页

作者：徐新昊张小强杨云王光超西南交通大学交通运输与物流学院成都611756 综合交通大数据应用技术国家工程实验室成都611756 综合交通运输智能化国家地方联合工程实验室成都611756 华中师范大学信息管理学院武汉430079

随着货车保有量及货运需求的迅速增长,车货供需匹配问题成为了货运电子商务平台的核心和热点。本文主要针对车货供需匹配问题从模型和算法两个方面对现有文献进行梳理和总结。在车货供需匹配模型方面,考虑的优化目标主要包括满意度、公... 详细信息

随着货车保有量及货运需求的迅速增长,车货供需匹配问题成为了货运电子商务平台的核心和热点。本文主要针对车货供需匹配问题从模型和算法两个方面对现有文献进行梳理和总结。在车货供需匹配模型方面,考虑的优化目标主要包括满意度、公平性和稳定性三个方面的评价指标,根据应用场景,将车货供需匹配模型分为一对一、一对多和多对多三类,其中一对一车货供需匹配模型针对整车运输,其他两种则对应零担运输。随着三种应用场景的模型复杂程度越来越高,相应求解难度、求解时间也呈现递增趋势。在车货供需匹配算法方面,根据货运需求数据的结构与特点可以划分为最优化算法、人工智能算法、推荐算法以及其他算法四类:对于小规模、时效性要求不高的货运需求,可以根据模型的特点与特性设计最优化求解算法;对于大数据、交互性数据或实时性要求高的货运需求,人工智能算法和推荐算法则是车货供需匹配问题的有效途径,其中人工智能算法通过预测车主行为或匹配结果实现匹配任务,而推荐算法可以针对车货需求大数据实现有效的召回并推荐。最后,本文总结了现有研究的不足之处,并从中归纳出三个值得进一步研究的方向:一是结合实际业务场景和车货信息大数据背景,提高车货供需匹配方法的实际可行性;二是进一步挖掘更多的评价指标,如车主偏好以及订单目的地接单概率等指标;三是关注车货供需匹配的实时决策问题,重点考虑货运需求的动态随机性以及平台和车主的长期收益目标。

关键词：公路运输货运电子商务平台车货供需匹配模型车货供需匹配算法

电针“夹脊”穴调节细胞自噬及内质网应激对脊髓损伤小鼠的修复作用

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针刺研究 2021年第1期46卷 45-51页

作者：代攀黄思琴唐成林代妮赵鸿娣谭燕玲杨云昊陶春鹤重庆医科大学中医药学院重庆400016

目的:通过观察电针"夹脊"穴对脊髓损伤(SCI)小鼠细胞自噬及内质网应激水平的影响,探讨电针对SCI小鼠的作用及其相关机制。方法:将雌性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组及电针组,每组20只;每组再分成7、14 d两个亚组,每... 详细信息

目的:通过观察电针"夹脊"穴对脊髓损伤(SCI)小鼠细胞自噬及内质网应激水平的影响,探讨电针对SCI小鼠的作用及其相关机制。方法:将雌性C57BL/6小鼠按照随机数字表法分为假手术组、模型组及电针组,每组20只;每组再分成7、14 d两个亚组,每个亚组10只。采用血管夹压迫脊髓法制备SCI模型。电针组于造模后3 h开始采用电针双侧"夹脊"穴,每日1次,分别治疗7、14 d。各组于造模后第7、14天采用Basso mouse scale(BMS)评分评估小鼠后肢运动功能变化;HE染色法观察脊髓组织形态变化;Western blot法测定内质网应激指标葡萄糖调节蛋白-78(GRP78)、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12(Caspase-12)及细胞自噬指标微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、P62的表达变化;免疫荧光染色法检测SCI区CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)和P62的蛋白表达。结果:造模后第7、14天,与假手术组比较,模型组小鼠的BMS评分显著下降(P<0.05);脊髓组织中细胞核固缩、肿胀,神经元坏死数目相对较多;LC3Ⅱ蛋白表达水平下降(P<0.05),P62、GRP78、Caspase-12蛋白表达水平明显升高(P<0.05);CHOP和P62阳性表达增高(P<0.05)。与模型组比较,电针组小鼠的BMS评分显著升高(P<0.05);脊髓组织中细胞核固缩、肿胀减轻,神经元坏死数目相对减少;LC3Ⅱ蛋白表达水平升高(P<0.05),P62、GRP78、Caspase-12蛋白表达水平明显下降(P<0.05);CHOP和P62的阳性表达显著减少(P<0.05)。结论:电针"夹脊"可以通过抑制小鼠SCI后内质网应激和促进细胞自噬,从而促进神经功能恢复,其机制可能与电针调节自噬及内质网应激的相关蛋白表达有关。

关键词：电针脊髓损伤内质网应激细胞自噬

电针对衰老性肌萎缩小鼠腓肠肌中促血管生成和蛋白转运相关因子的影响

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针刺研究 2020年第12期45卷 973-979页

作者：朱正威唐成林李小宏杨之雪杨云昊庞芳廖冬梅郭啸重庆医科大学中医药学院重庆400016 重庆医科大学附属第一医院康复科重庆400016

目的:观察电针对衰老性肌萎缩小鼠腓肠肌中促血管生成和蛋白转运相关因子的影响,探讨电针抗衰老性肌萎缩的潜在分子机制。方法:将14只30周龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组和电针组,每组7只,以7只同周龄抗快速衰老SAMR1小鼠为对照组。电... 详细信息

目的:观察电针对衰老性肌萎缩小鼠腓肠肌中促血管生成和蛋白转运相关因子的影响,探讨电针抗衰老性肌萎缩的潜在分子机制。方法:将14只30周龄雄性SAMP8小鼠随机分为模型组和电针组,每组7只,以7只同周龄抗快速衰老SAMR1小鼠为对照组。电针组小鼠予以1 mA、4 Hz的连续波电针干预双侧"足三里""阳陵泉",1次/d,每次20 min,每周6次,干预4周。应用力竭跑台实验检测小鼠运动功能;测量腓肠肌质量并计算与体质量的比值;HE染色法和透射电镜观察腓肠肌形态,并计算腓肠肌横截面积;Western blot法检测腓肠肌中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化(p)-AKT、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-mTOR、p70核糖体蛋白S6激酶(p70S6K)、p-p70S6K和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白的相对表达量;实时荧光定量PCR法检测HIF-1α、血管内皮生长因子A(VEGF-A)、肌肉环指蛋白1(MuRF1)、肌萎缩盒F蛋白(MAFbx)mRNA的相对表达量。结果:与对照组比较,模型组小鼠力竭跑台实验的跑步时间与跑步距离减少(P<0.01),体质量和腓肠肌质量减少(P<0.05,P<0.01),腓肠肌质量/体质量减小(P<0.01),腓肠肌细胞萎缩且横截面积变小(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K和HIF-1α蛋白的相对表达量减少(P<0.01),HIF-1α和VEGF-A mRNA相对表达量减少(P<0.01),MuRF1、MAFbx mRNA相对表达量增加(P<0.01)。与模型组比较,电针干预后小鼠力竭跑台实验的跑步时间与跑步距离增加(P<0.05),腓肠肌质量和腓肠肌质量/体质量增加(P<0.05),腓肠肌萎缩程度减轻且横截面积增大(P<0.01),p-AKT、p-mTOR、p-p70S6K和HIF-1α蛋白的相对表达量增加(P<0.01),HIF-1α和VEGF-A mRNA相对表达量增加(P<0.01),MuRF1、MAFbx mRNA相对表达量减少(P<0.01,P<0.05)。结论:电针可能通过调控腓肠肌促血管生成程序和蛋白转运,延缓小鼠衰老性肌萎缩。

关键词：衰老性肌萎缩电针缺氧血管生成蛋白转运