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在体法评价琥珀酸对骨骼肌收缩特性的影响

江西农业大学学报 2019年第6期41卷 1152-1158页

作者：李忠鑫汪滔彭文桐王志康尹聪解培培束刚高萍华南农业大学动物科学学院/广东省动物营养调控重点实验室

旨在建立在体测定骨骼肌收缩特性的方法,用于评价琥珀酸对C57BL/6J小鼠胫骨前肌收缩性能的影响。试验以C57BL/6J小鼠为研究模型,制作离体胫骨前肌、在体坐骨神经-腓肠肌和坐骨神经-胫骨前肌样本,对比不同方法、不同周龄和不同肌肉最大... 详细信息

旨在建立在体测定骨骼肌收缩特性的方法,用于评价琥珀酸对C57BL/6J小鼠胫骨前肌收缩性能的影响。试验以C57BL/6J小鼠为研究模型,制作离体胫骨前肌、在体坐骨神经-腓肠肌和坐骨神经-胫骨前肌样本,对比不同方法、不同周龄和不同肌肉最大张力和张力半衰时间差异。随后,选取12只6周龄雌性小鼠,按体质量随机分为2组(n=6),分别在饮水中添加0和1%琥珀酸盐,单笼饲养,自由采食及饮水,12 h循环光照,每周记录采食量及体质量。饲养结束后,采用所建立的在体法检测胫骨前肌最大张力、张力半衰时间,以及肌肉中葡萄糖、乳酸含量和乳酸脱氢酶、琥珀酸脱氢酶活性。在体法检测胫骨前肌收缩持久性显著高于离体法。用在体法评价不同日龄、不同部位肌肉发现,腓肠肌的最大张力和张力半衰减时间均极显著高于胫骨前肌(P<0.01),8周小鼠胫骨前肌的最大张力半衰时间极显著短于20周小鼠(P<0.01),说明已成功建立在体测定肌肉收缩特性的方法。随后的饲养试验表明,虽然饮水添加1%琥珀酸盐对小鼠生长性能无显著影响,但采用在体测定肌肉收缩特性发现,琥珀酸盐显著提高了小鼠胫骨前肌的张力半衰时间和收缩后肌肉中琥珀酸脱氢酶的活性(P<0.05),显著降低了收缩后肌肉中的乳酸含量(P<0.05)。实验成功建立了在体检测骨骼肌收缩特性的评价方法,并发现饮水添加琥珀酸能增强骨骼肌抗疲劳性。研究结果对于完善骨骼肌类型转化评价方法,研制改善骨骼肌运动机能和畜禽胴体品质的新型营养素提供依据。

关键词：在体骨骼肌琥珀酸肌纤维类型收缩特性

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α-半乳糖苷酶可诱导表达系统的构建及验证

α-半乳糖苷酶可诱导表达系统的构建及验证

肉豆蔻酸对猪肌内脂肪前体细胞分化聚酯和脂肪酸组成的影响

全国动物生理生化第十二次学术交流会

作者：翟亚峰庄鲁张志歧束刚江青艳华南农业大学动物科学学院

α-半乳糖苷酶可有效降解α-半乳糖苷的抗营养作用,提高饲料养分的利用率。为实现α-半乳糖苷酶的可诱导表达,本研究分别克隆了α-半乳糖苷酶基因和乳糖操纵子序列,构建了α-半乳糖苷酶可诱导表达重组质粒,分别用IPTG和α-乳糖两种诱导...

α-半乳糖苷酶可有效降解α-半乳糖苷的抗营养作用,提高饲料养分的利用率。为实现α-半乳糖苷酶的可诱导表达,本研究分别克隆了α-半乳糖苷酶基因和乳糖操纵子序列,构建了α-半乳糖苷酶可诱导表达重组质粒,分别用IPTG和α-乳糖两种诱导物处理,采用流式细胞仪检测乳糖操

关键词：

来源： cnki会议评论

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畜牧与兽医 2012年第S1期44卷 160-161页

作者：谢秋萍束刚王松波朱晓彤王丽娜高萍江青艳农业部华南动物营养与饲料科学观测试验站华南农业大学动物科学学院广东广州510642

肉豆蔻酸是一种14碳饱和脂肪酸。以往的研究表明,肉豆蔻酸能够影响机体的脂肪代谢,但迄今有关肉豆蔻酸对脂肪前体细胞的分化聚酯是否具有调节作用尚未见报道。为此,本试验选用5-7日龄长白仔猪,采用胶原酶消化法,从背最长肌分离并纯化肌... 详细信息

肉豆蔻酸是一种14碳饱和脂肪酸。以往的研究表明,肉豆蔻酸能够影响机体的脂肪代谢,但迄今有关肉豆蔻酸对脂肪前体细胞的分化聚酯是否具有调节作用尚未见报道。为此,本试验选用5-7日龄长白仔猪,采用胶原酶消化法,从背最长肌分离并纯化肌内脂肪前体细胞,并在分化培养基中添加不同浓度(0μM、10μM、50μM、100μM)的肉豆蔻酸,诱导脂肪前体细胞分化。在不同分化时间点(1天、3天、5天)观察细胞形态并进行油红O染色。

关键词：肌内脂肪脂肪前体细胞肉豆蔻酸背最长肌脂肪代谢胶原酶消化法饱和脂肪酸油红分化培养基长白仔猪

表没食子儿茶素没食子酸酯对育肥猪骨骼肌纤维类型的影响

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畜牧兽医学报 2016年第8期47卷 1581-1591页

作者：王丽娜王珍彭建龙王建兵杨柯林束刚王松波朱晓彤高萍江青艳华南农业大学动物科学学院国家生猪种业工程技术研究中心广州510642

本试验主要研究在饲粮中添加表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)对育肥猪肌纤维类型的影响。试验选用156日龄"杜×长×大"三元杂交育肥猪180头,平均体重为(85.02±1.15)kg,按组间体重、性别比例一致的原则,将育... 详细信息

本试验主要研究在饲粮中添加表没食子儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)对育肥猪肌纤维类型的影响。试验选用156日龄"杜×长×大"三元杂交育肥猪180头,平均体重为(85.02±1.15)kg,按组间体重、性别比例一致的原则,将育肥猪随机分成3组,每组6个重复,每个重复10头猪(5公5母)。对照组饲喂基础饲粮,试验组饲喂在基础饲粮上分别添加0.025%、0.05%EGCG的试验饲粮。研究结果表明:1)育肥猪饲粮中添加0.025%的EGCG,能显著下调背最长肌乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)的活性(P<0.05),减少MyHCⅠ、PGC-1α和mtTFA蛋白水平和MyHCⅠ、Tnnt 1、Cytc和COXⅣmRNA的表达(P<0.05);显著下调腰大肌LDH和琥珀酸脱氢酶(Succinate dehydrogenase,SDH)的活性(P<0.05),显著上调Ⅰ型肌纤维比例(P<0.05),显著下调MyHCⅠmRNA的表达(P<0.05),而MyHCⅡa、MyHCⅡx、MyHCⅡb的mRNA显著上调(P<0.05)。2)育肥猪饲粮中添加0.050%的EGCG,能显著下调背最长肌LDH和SDH的活性(P<0.05),降低活性氧(Reactive oxygen species,ROS)水平(P<0.05),抑制AMPK的磷酸化、下调MyHCⅠ、PGC-1α、mtTFA和NRF-1的蛋白和mRNA表达(P<0.05);显著下调腰大肌LDH和SDH的活性(P<0.05),降低ROS水平(P<0.05),下调MyHCⅠ蛋白和mRNA的表达、抑制AMPK的磷酸化和NRF-1的蛋白表达(P<0.05),显著上调Ⅰ型肌纤维比例(P<0.05)。综上,育肥猪饲粮中添加EGCG后,可能通过EGCG清除ROS后引起AMPK活性减弱,降低PGC-1α表达,最终导致线粒体生物合成下降和慢肌纤维形成减少。

关键词： EGCG 育肥猪肌纤维类型线粒体生物合成

日粮中添加琥珀酸对AA肉鸡生产性能和肠道健康的影响

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中国畜牧杂志 2024年第3期60卷 212-219页

作者：刘佳鑫曾宇贤张丽沈俊填曾建腾徐安佑王韬高萍朱灿俊江青艳束刚华南农业大学动物科学学院广东省动物营养调控重点实验室广东广州510642 畜禽育种国家重点实验室广东广州510642 广州朴成生物科技有限公司广东广州511300

试验旨在探究日粮中添加琥珀酸对AA肉鸡生产性能和肠道健康的影响。选用1日龄健康AA肉鸡240羽,根据体重随机分为4组,每组5个重复,每个重复12羽。对照组饲喂基础日粮,抗生素组在基础日粮中添加15 mg/kg维吉尼亚霉素,低剂量和高剂量琥珀... 详细信息

试验旨在探究日粮中添加琥珀酸对AA肉鸡生产性能和肠道健康的影响。选用1日龄健康AA肉鸡240羽,根据体重随机分为4组,每组5个重复,每个重复12羽。对照组饲喂基础日粮,抗生素组在基础日粮中添加15 mg/kg维吉尼亚霉素,低剂量和高剂量琥珀酸组分别在基础日粮中添加1 g/kg和2 g/kg琥珀酸。试验期为42 d(1~21 d和22~42 d)。结果表明:与对照组相比,高剂量琥珀酸能够提高肉鸡全净膛率(P<0.05);与抗生素组相比,低剂量琥珀酸能够提高肉鸡血清尿酸和尿素氮水平(P<0.05);日粮中添加琥珀酸对肉鸡肠道形态结构和盲肠微生物组成影响较小,但与对照组相比,添加低剂量和高剂量琥珀酸具有下调肠道炎症因子基因IL-4 mRNA表达的趋势(P=0.0992和P=0.0728),添加高剂量琥珀酸还上调了IFN-γ mRNA的表达(P<0.05),提示日粮中添加琥珀酸有利于缓解肉鸡肠道炎症,调节免疫力。由此可见,日粮中添加高剂量(2 g/kg)琥珀酸能够促进肉鸡生长发育、缓解肠道炎症、调节免疫力,而添加低剂量(1 g/kg)琥珀酸则可以改善机体氨氮代谢水平。

关键词： AA肉鸡琥珀酸生产性能肠道健康氨氮代谢

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鸡肠道SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性研究

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畜牧兽医学报 2006年第1期37卷 12-17页

作者：王修启谭会泽束刚苏海林陈黎龙江青艳冯定远华南农业大学动物科学学院广州510642

运用相对定量RT-PCR方法,研究不同肠段Arbor Acre(AA)肉鸡肠道葡萄糖吸收转运主要载体SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性。结果发现,随着肠道空间位置的后移,SGLT1 mRNA的表达量逐步降低。十二指肠SGLT1 mRNA的丰度比结直肠高76.19%,... 详细信息

运用相对定量RT-PCR方法,研究不同肠段Arbor Acre(AA)肉鸡肠道葡萄糖吸收转运主要载体SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性。结果发现,随着肠道空间位置的后移,SGLT1 mRNA的表达量逐步降低。十二指肠SGLT1 mRNA的丰度比结直肠高76.19%,差异极显著(P0.05),但有提高的趋势(P值分别为0.06和0.07)。十二指肠与空肠和回肠相比,SGLT1 mRNA的表达量虽然分别高23.33%和27.59%,但差异不显著(P值分别为0.18和0.10)。相对定量分析表明,十二指肠和空肠GLUT2 mRNA丰度非常接近,差异不显著(P>0.05)。定性研究显示,十二指肠与空肠GLUT2 mRNA丰度高于回肠和结直肠。鸡肠道SGLT1和GLUT2 mRNA表达的组织特异性之生理功能,有待于进一步研究。

关键词：肠道 SGLT1 mRNA GLUT2 mRNA 组织特异性

不同有机酸对断奶仔猪肠道厌氧培养微生物菌群的影响

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华南农业大学学报 2015年第6期36卷 9-14页

作者：王丽娜高飞朱晓彤高萍王松波江青艳习欠云张永亮吴仕林束刚华南农业大学动物科学学院广东广州510642 广州智特奇生物科技股份有限公司广东广州510663

【目的】建立仔猪肠道微生物菌群调控的离体模型,并研究有机酸对断奶仔猪肠道微生物菌群的影响.【方法】每次试验选取2头40日龄杜×（长×大）仔猪,屠宰后取其空肠和回肠混合食糜,按照每管300μL分装于2 m L离心管,分别添加30 mmol·L^-... 详细信息

【目的】建立仔猪肠道微生物菌群调控的离体模型,并研究有机酸对断奶仔猪肠道微生物菌群的影响.【方法】每次试验选取2头40日龄杜×（长×大）仔猪,屠宰后取其空肠和回肠混合食糜,按照每管300μL分装于2 m L离心管,分别添加30 mmol·L^-1不同有机酸（甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸、富马酸、柠檬酸、苯甲酸、苹果酸和山梨酸）,置于厌氧工作站中,厌氧培养4 h后提取食糜中基因组DNA,应用绝对定量PCR技术测定食糜中乳杆菌属Lactobacillus、双歧杆菌属Bifidobacterium、沙门菌属Salmonella和大肠埃希菌Escherichia coli的数量变化.随后进一步选择抑菌活性较强的甲酸、乙酸、丁酸、乳酸、柠檬酸研究其抑菌活性的浓度梯度效应.【结果和结论】成功建立了体外全食糜厌氧培养体系,研究结果发现,甲酸、丁酸和柠檬酸能呈剂量依赖性地抑制细菌增殖,而乙酸对总菌数量影响不大;对益生菌而言,柠檬酸能显著抑制乳杆菌属和双歧杆菌属的增殖,但低剂量的乳酸（10 mmol·L^-1）能显著促进乳杆菌属和双歧杆菌属的增殖,且低剂量的乙酸（15 mmol·L^-1）也能促进双歧杆菌属的增殖;所选择的有机酸在浓度达到10-15 mmol·L^-1时,均能有效抑制病原菌（沙门菌和大肠埃希菌）的增殖.

关键词：有机酸断奶仔猪肠道微生物厌氧培养

FAT/CD36融合蛋白的表达及其对鸡腹脂沉积的特异性调控

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中国农业科学 2009年第2期42卷 650-656页

作者：束刚冯嘉颖余凯凡徐平稳朱晓彤高萍王松波习欠云王修启张永亮江青艳华南农业大学动物科学学院

【目的】脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)是介导脂肪酸跨膜转运和脂肪细胞聚脂的重要载体蛋白。本试验采用主动免疫法研究FAT/CD36在鸡脂肪沉积调控中的作用。【方法】将FAT/CD36膜外区抗原表位基因片段克隆入表达载体pE... 详细信息

【目的】脂肪酸转位酶(fatty acid translocase,FAT/CD36)是介导脂肪酸跨膜转运和脂肪细胞聚脂的重要载体蛋白。本试验采用主动免疫法研究FAT/CD36在鸡脂肪沉积调控中的作用。【方法】将FAT/CD36膜外区抗原表位基因片段克隆入表达载体pET-32a(+),并转化在大肠杆菌BL21(DE3),构建FAT/CD36融合蛋白表达载体。主动免疫试验选取22日龄黄羽肉鸡60只,按公、母各随机分为2组,共4组。公鸡和母鸡的试验组分别在第34、49、和63天肌肉注射1mg重组鸡FAT/CD36融合蛋白,以牛血清白蛋白(bovineserumalbumin,BSA)为对照。【结果】重组菌表达分子量约为29kD的鸡FAT/CD36融合蛋白,在0.1mmol·L-1IPTG诱导6h后,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的32%。表达产物主要以包涵体的形式存在,经纯化并透析复性后得到高纯度的FAT/CD36融合蛋白。主动免疫后,公鸡和母鸡试验组的血清抗FAT/CD36抗体水平逐渐升高,并在首次免疫后显著高于各自对照组。主动免疫FAT/CD36能特异性降低公鸡的腹脂率,但对母鸡无显著性影响。试验组与对照组皮下脂肪厚度差异不显著。【结论】FAT/CD36对鸡脂肪调控具有典型的性别特异性和部位差异。试验结果为进一步阐明禽类脂肪组织特异性沉积的分子机制提供理论依据。

关键词：脂肪酸转位酶融合蛋白主动免疫黄羽肉鸡脂肪沉积

与绍鸭卵巢卵泡发育相关的新EST的分离与表达

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与绍鸭卵巢卵泡发育相关的新EST的分离与表达