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噬菌体药物开发及质控研究进展

国外医药（抗生素分册） 2024年第1期45卷 28-34页

作者：杨蓉赵晨李端华饶峻王辂成都大学药学院成都610106

噬菌体治疗作为抗生素治疗细菌感染的替代方法之一,近年来受到越来越多科学家们的关注,该法主要用于针对由耐药菌及多重耐药菌(Multi-drug resistant,MDR)引起的公共卫生安全问题。如今,噬菌体在农业和兽医治疗方面及其在西方国家用于... 详细信息

噬菌体治疗作为抗生素治疗细菌感染的替代方法之一,近年来受到越来越多科学家们的关注,该法主要用于针对由耐药菌及多重耐药菌(Multi-drug resistant,MDR)引起的公共卫生安全问题。如今,噬菌体在农业和兽医治疗方面及其在西方国家用于人类治疗方面越来越受到重视,过去几十年西方世界进行了许多临床试验和治疗探索,并且国外某些授权药店正在销售人用噬菌体药物。但噬菌体用于人类治疗时仍然存在一些问题,如噬菌体的高度特异性限制了其应用范围和噬菌体制剂管理法规不完善使得其不能进行规模化生产等。本文结合我国现行药典关于生物制品生产、制备及质量控制要求和欧洲药品管理局(The European Medicines Agency,EMA)近年来以噬菌体治疗药物批准途径的探索为参照,着重对噬菌体库构建与控制、噬菌体制备与质控和临床前测试等进行分析。

关键词：噬菌体库细菌抗生素制剂制备工艺

甲基2,3-O-磺酰-α-D-葡萄糖苷合成5-羟甲基糠醛(5-HMF)及其衍生物的新方法

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合成化学 2024年第3期32卷 244-249页

作者：张菡旭李敏娇杨蓉李端华陈国华四川轻化工大学化学工程学院四川自贡643000 成都大学药学院四川成都610106

为解决现有的以生物质为起始原料制备5-羟甲基呋喃甲醛(5-HMF)工业化所存在的问题,本研究开发了一种新颖的5-HMF的制备方法。该制备方法以最重要的生物质——纤维素的酸水解得到的无水D-葡萄糖单体为起始原料,经甲苷化、异丙叉化、环硫... 详细信息

为解决现有的以生物质为起始原料制备5-羟甲基呋喃甲醛(5-HMF)工业化所存在的问题,本研究开发了一种新颖的5-HMF的制备方法。该制备方法以最重要的生物质——纤维素的酸水解得到的无水D-葡萄糖单体为起始原料,经甲苷化、异丙叉化、环硫酸酯化和高温脱水反应,最终获得5-HMF。该方法中,各步所获得的中间体无需纯化即可用于后续制备过程,制备中所涉及到的各类型试剂廉价易获取,因此该方法具有较好的工业应用前景。

关键词：葡萄糖糖类生物质 5-羟甲基呋喃甲醛 5-HMF 硫酸酯

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悍世俏作女

2013年

作者：李端华

李端华编著的《悍世俏作女》内容介绍：曾小白说：来到这世上千万别客气，想做就立即去做，什么都要快，除了死。曾小白的工作丢了，爱情跑了，但她仍然顽强得如同野草。在曾小白眼里工作和男人一样重要，女人之所以工作是因为要寻... 详细信息

ISBN: (纸本)9787219081280

李端华编著的《悍世俏作女》内容介绍：曾小白说：来到这世上千万别客气，想做就立即去做，什么都要快，除了死。曾小白的工作丢了，爱情跑了，但她仍然顽强得如同野草。在曾小白眼里工作和男人一样重要，女人之所以工作是因为要寻找到一份美好的情感，一个平静的归宿，一份在这个竞争残酷的世界中的安全感。做什么都要先下手为强，包括男人。这是一个弱肉强食的年代，不管是出身高贵还是低贱，想保持优越感赢得幸福，那就得“抛头颅洒热血”。曾小白在两年时间内，从事过不下二十份的工作，但她总被打假，被客串，被反客为主，被走投无路……在一次次弹尽粮绝和无畏的牺牲之后，钢筋铁骨般的她决心重新上路，杀出一条血路…… 在以食物链呈现的现代社会，每一个人都可能是一只兔子，经历职场江湖追求属于自己的神话。动机不纯也好，真诚相对也好，我们在讨价还价中期许着未来，一路勇往向前……一起来翻阅《悍世俏作女》吧！

关键词：长篇小说中国现代

来源：汇雅图书（南通市图书馆... 评论

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汇雅图书（南通市图书馆）

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蚕蛹甲壳素的脱色方法与机理探讨

应用化学 2004年第3期21卷 309-312页

作者：李端华周小华重庆大学化学化工学院重庆400044

研究了从粗甲壳素 (分离蚕蛹蛋白质后的残渣 )中提取蚕蛹甲壳素的工艺条件 ,探索了H2 O2 氧化脱色方法。实验结果表明 ,在 70℃的水浴中 ,按照m(蚕蛹渣 )∶m(5 %氢氧化钠 ) =30∶80的质量比处理 2h ,可脱净残余蛋白 ,得到黑褐色的粗蚕... 详细信息

研究了从粗甲壳素 (分离蚕蛹蛋白质后的残渣 )中提取蚕蛹甲壳素的工艺条件 ,探索了H2 O2 氧化脱色方法。实验结果表明 ,在 70℃的水浴中 ,按照m(蚕蛹渣 )∶m(5 %氢氧化钠 ) =30∶80的质量比处理 2h ,可脱净残余蛋白 ,得到黑褐色的粗蚕蛹甲壳素。用H2 O2 脱色漂白 ,工艺条件为 :6 5～ 70℃ ,pH值为 8 5± 0 5 ,时间 5h ,m (蚕蛹渣 )∶m(30 %H2 O2 ) =5 0∶130。所得甲壳素白度为 30 % ,收率为 2 5 %。双氧水脱除蚕蛹甲壳素颜色的机理可能是H2 O2 分解的O2 -2 作用于铁硫蛋白与细胞色素复合物体系中的硫 ,将体系中半胱氨酸硫氧化成亚砜 ,使得色蛋白与甲壳素相连的键断开 ,从而使色素从甲壳素上分离下来。

关键词：甲壳素蚕蛹双氧水脱色

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重组α-氨基酸酯水解酶合成头孢曲嗪

生物工程学报 2013年第4期29卷 501-509页

作者：潘佳林王辂李端华叶丽娟中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所四川成都610052

为了探索酶法合成头孢曲嗪的产业化工艺路线,从红纹黄单胞菌Xanthomonas rubrillineans中克隆-氨基酸酯水解酶基因全序列,转化入大肠杆菌中表达。以头孢曲嗪的合成转化率为指标,分别考察纯化的重组-氨基酸酯水解酶合成头孢曲嗪的最适温... 详细信息

为了探索酶法合成头孢曲嗪的产业化工艺路线,从红纹黄单胞菌Xanthomonas rubrillineans中克隆-氨基酸酯水解酶基因全序列,转化入大肠杆菌中表达。以头孢曲嗪的合成转化率为指标,分别考察纯化的重组-氨基酸酯水解酶合成头孢曲嗪的最适温度、最适pH和最佳底物摩尔比。经聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,重组-氨基酸酯水解酶的单体分子量为70 kDa。催化合成头孢曲嗪的最适pH为(6.0±0.1),最适温度为36℃。底物浓度约为7-ATTC 30 mmol/L、HPGM HCl 120 mmol/L,酶用量22 U/mL时,头孢曲嗪的转化率达到64.3%。结果为优化酶法合成头孢曲嗪的产业化工艺奠定了基础。

关键词： α-氨基酸酯水解酶头孢曲嗪动力学控制转化率

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CTAB反胶束萃取金丝桃苷的研究

CTAB反胶束萃取金丝桃苷的研究

作者：李端华重庆大学

学位级别：硕士

反胶束萃取技术具有条件温和,萃取效率高,成本低,溶剂可重复利用,不引起萃取物变性等优点,用于纯化生物物质前景广阔。黄酮类化合物具有抗氧化、抗癌、抗菌等多种生理功能,是一类有开发前景的先导化合物和生物活性成分,成为国内外研究... 详细信息

反胶束萃取技术具有条件温和,萃取效率高,成本低,溶剂可重复利用,不引起萃取物变性等优点,用于纯化生物物质前景广阔。黄酮类化合物具有抗氧化、抗癌、抗菌等多种生理功能,是一类有开发前景的先导化合物和生物活性成分,成为国内外研究与开发利用的持续热点之一。在一定的pH 条件下,黄酮类化合物呈离子状态,可用反胶束技术进行分离。本文系统研究了用CTAB 反胶束从连翘提取物萃取金丝桃苷(Hyp)的工艺条件。讨论了各因素对Hyp 萃取率(E)和反萃取率(E′)影响和规律。验证实验结果表明:在碱性条件下,金丝桃苷分子带负电荷,不能被阴离子表面活性剂(AOT)反胶束萃取;但是,CTAB 反胶束的阳离子极性头能与带负电的金丝桃苷形成静电相互作用,因此,可被CTAB 反胶束萃取。水相pH 值、离子种类、离子浓度、表面活性剂浓度和相比等因素均影响对金丝桃苷的萃取率E。当水相PH<7.50 时,随着pH 升高,Hpy 分子带电荷逐渐增多,与CTAB 极性头的静电引力增大,E 随PH 的增加而增大,在pH 为7.5-9.5 之间达到最大值;当超过9.50 后,体系[OH-]增大,对CTAB 极性头的竞争增强,因此,E 随pH 升高而减小。在阴离子浓度低于0.2mol/L 时,E 随水相阴离子浓度增加而升高;阴离子浓度浓度为0.2mol/L 时,萃取率达到最大值;超过0.2mol/L 后,由于阴离子压缩了反胶束双电层,增强了对Hyp 与CTAB 间静电引力的屏蔽作用,致使E 减小。由于各离子带电荷数量与离子水合半径的差异,各离子对金丝桃苷最大萃取率的影响顺序为I-

关键词：金丝桃苷反胶束 CTAB 萃取

同方学位论文库评论

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分子串联重复策略用于制备超短肽

生物工程学报 2022年第12期38卷 4587-4600页

作者：赵晨李端华李进军王辂成都大学药学院、四川抗菌素工业研究所、抗生素研究与再评价四川省重点实验室四川成都610106

超短肽具有更好的稳定性、组织渗透性、生物相容性以及更低的免疫原性。GHK(glycyl-L-histidyl-L-lysine)和GQPR(glycyl-L-glutamyl-L-prolyl-L-arginine)具有刺激胶原蛋白产生、减缓胶原蛋白降解的作用,作为抗皱成分广泛应用于化妆品... 详细信息

超短肽具有更好的稳定性、组织渗透性、生物相容性以及更低的免疫原性。GHK(glycyl-L-histidyl-L-lysine)和GQPR(glycyl-L-glutamyl-L-prolyl-L-arginine)具有刺激胶原蛋白产生、减缓胶原蛋白降解的作用,作为抗皱成分广泛应用于化妆品。超短肽一般都是通过固相合成方法制备,其缺陷是制备过程中大量使用有机化学试剂而造成环境负担,故本文探讨了一种设计和制备超短肽的新方法。因序列短而无法直接重组表达,文中首先构建了适用于融合表达的载体骨架pET28a-Trxm。以GHK和GQPR串联重复基因作为滚环扩增的基本单元(tandem repeat of short peptides,TRSP),反应时随机掺入5-甲基胞嘧啶获得长基因片段,然后经Acc65Ⅰ和ApaⅠ消化产生随机长度的基因。胶回收500 bp到1500 bp的DNA片段,克隆得到表达载体pET28a-Trxm-(TRSP)n并转化获得重组菌。双酶切及测序结果表明,成功构建获得串联重复数n=1、2、3、4、6、7、8、9的阳性克隆。蛋白表达结果显示,当串联重复数n=1、2、3、4、8、9时均有相应融合蛋白表达,表达水平随着重复数增加而降低。Trxm-(TRSP)1表达水平最高,达总蛋白的50%,而Trxm-(TRSP)2表达水平为总蛋白的30%。进一步地,含Trxm-(TRSP)1的清液先后经肠激酶和胰蛋白酶切割后,HPLC分析结果表明,成功获得超短肽GHK和GQPR。该结果对于超短肽重组制备的工业化应用具有重要价值。

关键词：串联重复基因滚环扩增超短肽融合蛋白重组制备

不同原子分类方案的电矩矢量对芳香胺类的基因毒性的综合研究

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计算机与应用化学 2013年第9期30卷 998-1002页

作者：陈国华李端华四川理工学院化学与制药工程学院四川自贡643000 四川抗菌素工业研究所四川成都610052

利用电矩矢量(Vmed)的分子结构数字技术,通过不同原子类型分类方法探索芳香胺类的基因毒性与组成原子类型之间的构效关系。随机多组的样本划分方案研究揭示,恰当的回归相关系数(R^2)能够在一定程度上避免模型的"过拟合"状态,原子划分类... 详细信息

利用电矩矢量(Vmed)的分子结构数字技术,通过不同原子类型分类方法探索芳香胺类的基因毒性与组成原子类型之间的构效关系。随机多组的样本划分方案研究揭示,恰当的回归相关系数(R^2)能够在一定程度上避免模型的"过拟合"状态,原子划分类型越详细,就越容易陷入"过拟合"状态中。全分子集的4种原子类型分类方案综合研究揭示,化合物的基因毒性与分子结构的芳香性碳原子多寡、芳香氮原子的替换和稠环化程度等因素相关联。分析结果表明:通过不同的原子类型划分方案的综合研究,Vmed方法能够比较直观反映出分子结构的原子类型变化与性质变化关系,有效的指导化合物设计。

关键词：原子类型 Vmed 芳香胺类 QSA PR 基因毒性

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源于内生真菌的破骨细胞所形成抑制剂的研究

华西药学杂志 2011年第3期26卷 201-203页

作者：褚以文李端华余蓉四川大学华西药学院四川成都610041 中国医药集团总公司四川抗菌素工业研究所四川成都610052

目的分离鉴定由梨果仙人掌内生土曲霉SIIAF5446菌株产生的破骨细胞所生成的抑制剂。方法采用溶剂萃取、硅胶柱层析、反相制备HPLC来分离纯化发酵液,借助光谱学手段鉴定其结构,并采用抗酒石酸磷酸酶阳性多核细胞计数法测定其抑制小鼠骨... 详细信息

目的分离鉴定由梨果仙人掌内生土曲霉SIIAF5446菌株产生的破骨细胞所生成的抑制剂。方法采用溶剂萃取、硅胶柱层析、反相制备HPLC来分离纯化发酵液,借助光谱学手段鉴定其结构,并采用抗酒石酸磷酸酶阳性多核细胞计数法测定其抑制小鼠骨髓破骨细胞生成的活性。结果分离得到3个抑制破骨细胞生成的高活性化合物,即洛伐他汀、3″-羟基洛伐他汀和2″,3″-脱氢洛伐他汀。结论 3″-羟基洛伐他汀和2″,3″-脱氢洛伐他汀为活性新化合物。

关键词：洛伐他汀类似物破骨细胞骨吸收抑制剂土曲霉内生真菌