检索结果-南通市图书馆

作者：李程颐广西医科大学

学位级别：硕士

目的:H6N6亚型禽流感病毒在野生鸟类和禽类动物中广泛流行,病毒持续进化演变,其宿主范围逐渐由禽类动物扩大至哺乳动物,部分病毒甚至具有识别和结合人型SAα-2,6Gal受体的能力。令人担忧的是,一些暴露人群的血清中H6亚型禽流感病毒特异... 详细信息

目的:H6N6亚型禽流感病毒在野生鸟类和禽类动物中广泛流行,病毒持续进化演变,其宿主范围逐渐由禽类动物扩大至哺乳动物,部分病毒甚至具有识别和结合人型SAα-2,6Gal受体的能力。令人担忧的是,一些暴露人群的血清中H6亚型禽流感病毒特异性抗体检测呈阳性。因此,H6N6亚型禽流感病毒具有跨种属屏障感染哺乳动物甚至感染人的潜能。研究证实,陆禽动物鹌鹑、鸡等是禽流感病毒跨种属传播至人的中间宿主,水禽家鸭有助于禽流感病毒传播至陆禽动物,但鸭源性的H6N6亚型禽流感病毒是否能跨种属屏障直接传播至哺乳动物和人还尚未清楚。本研究应用分离自水禽鸭源性的H6N6亚型禽流感病毒,应用基因测序和进化分析,明确H6N6亚型禽流感病毒起源和各基因片段主要关键氨基酸位点的变化;然后应用病毒接种小鼠、人呼吸道组织,观察病毒对小鼠的致病性及在人呼吸道组织的复制能力,初步探索来自水禽鸭源性的H6N6亚型禽流感病毒是否具有感染哺乳动物小鼠及人的潜能,为进一步探究H6N6亚型禽流感病毒的跨种属传播奠定基础。方法:1.禽流感病毒的扩增及HA效价、EID、TCID测定:将3株水禽鸭源性H6N6亚型禽流感病毒A/DK/KM/1135/2019(简称KM1135)、A/DK/GY/1774/2019(简称GY1774)、A/DK/GY/6952/2019(简称GY6952)在鸡胚中进行扩增,收获鸡胚尿囊液,对尿囊液进行HA效价、EID、TCID测定,以扩增本研究所需要的病毒量、明确接种小鼠和人呼吸道组织所使用的病毒浓度。2.基因测序和进化分析:提取病毒的RNA进行逆转录,PCR扩增c DNA后纯化扩增产物,采用Illumina公司的Solexa系统上机检测病毒全基因序列,Mega 7.0和Bioedit 7.0.9进行序列比较,分析H6N6亚型禽流感病毒各基因片段的变化。3.禽流感病毒体内感染BALB/c小鼠:通过滴鼻、滴眼的方式对小鼠进行病毒接种感染,感染后每天记录小鼠体重、体温、精神状态等。感染后3 d、5 d、7 d、14 d分别采集各组小鼠的咽拭子和血液。感染后3 d、5 d、7 d分别麻醉处死3只小鼠,处死后采集鼻甲、气管、肺组织,一半研磨匀浆后进行病毒的分离培养;另一半放入10%福尔马林中固定,用于HE染色及免疫组化染色。4.禽流感病毒在人肺组织的复制:收集病人的呼吸道手术切除标本,将标本切成小组织块后体外接种病毒。接种后12 h、24 h、36 h、48 h、72h分别收集组织培养液和2块组织块,一块组织块磨匀浆后进行病毒的分离培养;另一块放入10%福尔马林中固定,用于HE染色及免疫组化染色。结果:1.禽流感病毒扩增后的HA效价及EID、TCID检测结果:3株病毒扩增后,KM1135病毒株的HA效价、EID值、TCID值最高,病毒的感染能力和致病性最强;GY6952病毒株的HA效价、EID值、TCID值最低,病毒的感染能力和致病性最弱。2.基因测序和进化分析结果:3株病毒HA裂解位点序列均为PQIETR/GL,为单个碱性氨基酸裂解位点,符合低致病性禽流感病毒特征。3株病毒的HA除发生H156K突变以外,其余224、226、228、190、137等关键氨基酸位点均未发生突变,仍具有与禽型SAα-2,3Gal受体结合的特性。病毒NA、PB1、PB2、PA的多个关键氨基酸位点也未发生突变,病毒仍属于禽流感病毒的基因特点。3.禽流感病毒感染BALB/c小鼠实验结果:在小鼠体内感染实验中,3株病毒感染后小鼠未出现明显的症状,感染过程未出现小鼠死亡情况。KM1135和GY1774病毒株接种小鼠后,小鼠咽拭子标本、鼻甲、气管、肺组织研磨液标本病毒分离培养阳性,组织病理学检查显示小鼠鼻甲、气管、肺组织出现炎症反应,组织内流感病毒NP抗原检测阳性,以KM1135最为典型。GY6952病毒株接种小鼠后,肺组织研磨液病毒分离培养阳性,而咽拭子标本、鼻甲、气管组织研磨液标本病毒分离培养为阴性,组织病理学检查显示小鼠肺组织出现炎症反应而鼻甲、气管组织未见明显病理改变,在鼻甲、气管、肺组织内均未检测出流感病毒NP抗原。3株病毒感染后,小鼠血清标本中流感病毒特异性抗体为阳性,且抗体HI滴度随着感染后天数而增高。4.禽流感病毒在人肺组织的复制实验结果:在人呼吸道组织体外感染实验中,KM1135病毒株感染后的人支气管、肺组织培养液、研磨液标本病毒分离培养阳性,组织病理学检查显示人支气管、肺组织均出现炎症反应,肺泡组织内流感病毒NP抗原检测阳性,而支气管组织内流感病毒NP抗原检测阴性。GY1774病毒株感染后的人支气管、肺组织培养液、研磨液标本病毒分离培养阳性,组织病理学检查显示人支气管、肺组织出现炎症反应,支气管和肺泡组织内流感病毒NP抗原检测阳性。GY6952病毒株感染后的人支气管、肺组织培养液、研磨液标本病毒分离培养阳性;组织病理学检查显示人支气管、肺组织出现炎症反应,肺泡组织内流

关键词：禽流感病毒 H6N6亚型跨种属传播哺乳动物基因特征

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严重急性呼吸综合征冠状病毒2受体血管紧张素转换酶2在人肺的表达

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海军军医大学学报 2022年第11期43卷 1251-1256页

作者：林裕贵李培群钟伟娟解中李周怡李程颐林春秀张增峰广西医科大学基础医学院微生物学教研室南宁530021 广西医科大学生物医药协同创新中心南宁530021 江南大学食品科学与技术国家重点实验室无锡214122

目的考察人肺中严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体血管紧张素转换酶2(ACE2)的表达,探讨ACE2在SARS-CoV-2感染中的意义。方法利用基因型-组织表达(GTEx)数据库分析人体正常组织器官间ACE2的基因转录水平,免疫组织化学检测原... 详细信息

目的考察人肺中严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)受体血管紧张素转换酶2(ACE2)的表达,探讨ACE2在SARS-CoV-2感染中的意义。方法利用基因型-组织表达(GTEx)数据库分析人体正常组织器官间ACE2的基因转录水平,免疫组织化学检测原代人肺组织中不同解剖部位ACE2的蛋白表达水平。结果人肺中ACE2基因及蛋白表达水平均很低,主要表达于肺泡组织中的少量Ⅱ型肺泡上皮细胞,而在血管内皮组织以及支气管、细支气管、终末细支气管、呼吸性细支气管等各级支气管组织中均未见表达。结论ACE2在人肺中表达水平很低,主要表达于少量Ⅱ型肺泡上皮细胞,表明人肺具有引起SARS-CoV-2感染的ACE2分子基础,SARS-CoV-2在人肺中可能存在其他感染机制。

关键词：血管紧张素转换酶2 肺严重急性呼吸综合征冠状病毒2 感染受体

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流感病毒感染中炎症小体的激活和调控机制

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中国人兽共患病学报 2021年第8期37卷 741-747页

作者：林裕贵李程颐李培群钟伟娟林春秀张增峰广西医科大学微生物学教研室南宁530021 江南大学食品学院无锡214122

炎症反应是宿主抗流感病毒感染的一个重要过程,它可以诱导产生抗病毒的炎症微环境以减少病毒的复制和扩散,同时参与对流感病毒的适应性免疫反应,在机体抗流感病毒感染过程中至关重要。然而,过度的炎症反应同时也是流感病毒重症感染、甚... 详细信息

炎症反应是宿主抗流感病毒感染的一个重要过程,它可以诱导产生抗病毒的炎症微环境以减少病毒的复制和扩散,同时参与对流感病毒的适应性免疫反应,在机体抗流感病毒感染过程中至关重要。然而,过度的炎症反应同时也是流感病毒重症感染、甚至死亡的主要因素。研究表明,炎症小体作为炎症反应的重要启动和调节分子,介导IL-1β和IL-18的成熟和分泌并诱导了细胞焦亡,在流感病毒发病机制中起着重要的调节作用,因此,针对炎症小体的激活和调控也成为流感病毒治疗的一个新策略。

关键词：流感病毒感染炎症小体激活调控机制

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鸭源性H6N6禽流感病毒对小鼠致病性研究

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广西医科大学学报 2021年第4期38卷 650-654页

作者：李程颐林裕贵钟伟娟高灵茜张增峰广西医科大学基础医学院微生物学教研室南宁530021

目的:探讨鸭源H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否能跨种间屏障感染哺乳动物小鼠及其基因特点。方法:首先将前期分离的3株鸭源性AIVH6N6,应用基因测序和分析法,比较病毒各基因片段的变化,然后将病毒接种BALB/c小鼠,观察病毒在小鼠复制、感染... 详细信息

目的:探讨鸭源H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否能跨种间屏障感染哺乳动物小鼠及其基因特点。方法:首先将前期分离的3株鸭源性AIVH6N6,应用基因测序和分析法,比较病毒各基因片段的变化,然后将病毒接种BALB/c小鼠,观察病毒在小鼠复制、感染、病理变化及其组织亲嗜性。结果:基因测序和分析显示,鸭源H6N6亚型AIV的血凝素(HA)裂解位点模式属低致病性病毒,其HA、神经氨酸酶(NA)、PB2等关键基因位点未出现突变,病毒与禽型受体SAα-2,3Gal特异性结合。病毒接种小鼠后,小鼠鼻甲、气管、肺组织出现炎症反应和病毒分离阳性。免疫组化检测病毒NP蛋白显示小鼠鼻甲、气管和支气管黏膜上皮细胞以及肺泡细胞阳性,其中A/DK/KM/1135/2019病毒株复制、感染能力较强。结论:鸭源性AIVH6N6可跨种间屏障传播给哺乳动物,提示有必要持续、密切监测水禽H6N6病毒的进化演变,以防其传播给人。

关键词：甲型流感病毒 H6N6亚型致病性基因特点小鼠

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鸡源禽流感病毒H6N6亚型在猪呼吸道组织的复制及其基因特点

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广西医科大学学报 2020年第4期37卷 581-585页

作者：庞夏凤王熹婧高灵茜朱银川林裕贵李程颐张增峰广西医科大学基础医学院微生物学教研室南宁530021

目的:探讨H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否跨种间屏障传播感染猪及其基因特点。方法:将3株鸡源性H6N6亚型AIV体外感染猪呼吸道组织,观察病毒在猪呼吸道组织复制及其病理变化,同时应用基因测序法,比较H6N6亚型AIV各基因片段的变化,筛选H6N6... 详细信息

目的:探讨H6N6亚型禽流感病毒(AIV)是否跨种间屏障传播感染猪及其基因特点。方法:将3株鸡源性H6N6亚型AIV体外感染猪呼吸道组织,观察病毒在猪呼吸道组织复制及其病理变化,同时应用基因测序法,比较H6N6亚型AIV各基因片段的变化,筛选H6N6亚型AIV在猪复制的基因特点。结果:病毒体外接种猪呼吸道组织后病毒分离阳性,肺局部细胞出现坏死,肺泡细胞内病毒核蛋白(NP)抗原阳性,其中A/CK/ZZ/346/2014(ZZ346)病毒株复制能力较强。基因测序和分析显示,H6N6亚型AIV的血凝素(HA)裂解位点模式属低致病性病毒,ZZ346病毒株HA出现P186T突变、HA的158位点有氨基酸缺失以及神经氨酸酶(NA)颈区出现11个氨基酸(59~69)缺失。结论:鸡源性H6N6亚型AIV可感染猪;H6N6病毒HA出现P186T突变、HA158位点出现氨基酸缺失以及NA颈区出现11个氨基酸(59~69)缺失有助于病毒在猪体内有效复制。

关键词：甲型流感病毒 H6N6亚型复制基因特点猪

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水禽H6N6亚型禽流感病毒在猪和人的肺组织中的复制能力的体外研究

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广西医学 2021年第8期43卷 962-965,971页

作者：林裕贵庞夏凤李程颐孙增辉朱银川王熹婧林春秀张增峰广西医科大学微生物学教研室南宁市530021 江南大学食品学院江苏省无锡市214122

目的研究水禽H6N6亚型禽流感病毒(AIV)在体外猪和人的肺组织中的复制能力。方法选取两株分离自鸭或鹅的H6N6亚型AIV(A/DK/GX/750/2010和A/GS/GX/399/2010),行基因测序和遗传进化分析了解其基因来源。将每株病毒分别体外接种于猪肺和人... 详细信息

目的研究水禽H6N6亚型禽流感病毒(AIV)在体外猪和人的肺组织中的复制能力。方法选取两株分离自鸭或鹅的H6N6亚型AIV(A/DK/GX/750/2010和A/GS/GX/399/2010),行基因测序和遗传进化分析了解其基因来源。将每株病毒分别体外接种于猪肺和人肺组织,接种后24 h、48 h、72 h收集组织,取组织匀浆液和培养上清液在10 d鸡胚中分离培养病毒,并行苏木精-伊红染色观察组织病理改变,采用免疫组化法检测病毒核蛋白的表达。结果基因进化分析显示H6N6亚型AIV A/DK/GX/750/2010、A/GS/GX/399/2010属于欧亚谱系的Group-Ⅱ(ST2853-like),为同一重配病毒的不同变型。两株H6N6亚型AIV体外接种于猪肺和人肺组织后,组织匀浆液和培养上清液中均可分离到病毒,免疫组化检测提示病毒核蛋白呈阳性,其主要表达在肺泡细胞和肺泡巨噬细胞,苏木精-伊红染色显示肺组织内出现肺泡细胞坏死和肺泡破坏,人肺组织还伴有炎性细胞浸润。结论水禽H6N6亚型AIV能在体外猪和人的肺组织中有效地复制,提示该病毒具有感染哺乳动物猪及人类的潜能,必须密切监测其流行及进化演变情况,以防止其感染人类。

关键词：禽流感病毒水禽 H6N6亚型复制能力猪人体外实验肺组织

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际遇与机遇:张仃在哈尔滨(1946—1948)

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美术观察 2024年第2期 52-56页

作者：李程清华大学美术学院

1946年夏,张仃跟随鲁艺从张家口转战至哈尔滨后,选择留在哈尔滨东北画报社从事总编辑的工作。因东北大学鲁迅文艺学院与哈尔滨画报社合作的翻身年画创作不甚如人意,该任务改由张仃主持。张仃筹办“翻身农民年画座谈会”等活动,促进艺术... 详细信息

1946年夏,张仃跟随鲁艺从张家口转战至哈尔滨后,选择留在哈尔滨东北画报社从事总编辑的工作。因东北大学鲁迅文艺学院与哈尔滨画报社合作的翻身年画创作不甚如人意,该任务改由张仃主持。张仃筹办“翻身农民年画座谈会”等活动,促进艺术家理解工作内容并创作出一大批呈现东北文化面貌的作品,由此改变自身际遇。本文回顾张仃的这段人生纪程,探寻彼时的思想意识冲突及成长机遇。

关键词：张仃东北画报社哈尔滨新年画变革

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辨味言诗:论中国古典诗学中的“醇”

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浙江大学学报（人文社会科学版） 2024年第3期54卷 138-149页

作者：李程华中师范大学文学院湖北武汉430079

“醇”来自中国古代早期的制酒工艺。由味觉体验而及美学意味,“醇”在儒家政教礼乐秩序中被赋予了醴厚丰熟的象征意味,道家学说中的“醇”更多表现为一种自然美学境界,又被作为个体精神气质向度上的一种美学特质。“醇”在唐代开始进... 详细信息

“醇”来自中国古代早期的制酒工艺。由味觉体验而及美学意味,“醇”在儒家政教礼乐秩序中被赋予了醴厚丰熟的象征意味,道家学说中的“醇”更多表现为一种自然美学境界,又被作为个体精神气质向度上的一种美学特质。“醇”在唐代开始进入诗学范畴。宋代确立起“醇”的辨味诗学。宋人谈论诗味,更为注重其内在的丰富性和品评之中的辨别比较,丰富性主要体现在批评话语方面,由“醇”而派生出的“醇淡”“醇深”“醇粹”等词语时见于宋人日常文字,品评之细致则以“醇醨异味”话题的讨论最为典型。“醇”及其所生发的概念在明代成为复古诗学标举格调、宗尚以及诗歌辨体批评的常用语词。复古诗学还从创作和接受层面提出了“醇味如一”“自别醇醨”等有意味的话题。“醇”在清代诗学语境中展开了更为多样的层面,官方话语着意阐发其儒家政教意味之“醇和”,士人表达强调以学问之“醇”重建风雅正统,诗学批评则标举“醇”之典范。

关键词：醇诗学范畴批评话语

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