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鸽圆环病毒抗体间接ELISA检测方法的建立及应用

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中国兽医科学 2024年第10期 1327-1333页

作者：杨颖路文彬向凤君雷白时赵款安峥张武超袁万哲保定市久盟生物科技有限公司河北农业大学动物医学院

为建立一种检测鸽圆环病毒(pigeon circovirus，PiCV)抗体的间接ELISA方法，本研究将大小为828 bp的PiCV Cap基因片段克隆至载体pGEX-4T-1，通过低温诱导获得了可溶性Cap重组蛋白，经Western-blot验证后发现，该重组蛋白与抗GST标签抗... 详细信息

为建立一种检测鸽圆环病毒(pigeon circovirus，PiCV)抗体的间接ELISA方法，本研究将大小为828 bp的PiCV Cap基因片段克隆至载体pGEX-4T-1，通过低温诱导获得了可溶性Cap重组蛋白，经Western-blot验证后发现，该重组蛋白与抗GST标签抗体和抗Cap蛋白抗体均可发生特异性反应。利用纯化的Cap重组蛋白作为包被抗原，通过棋盘滴定法优化各反应条件，建立了PiCV抗体间接ELISA检测方法。结果显示，最佳抗原包被浓度为0.25 mg/L，5%BSA作为封闭液37 ℃孵育2 h，待检血清最佳稀释度为1∶800，孵育时间为45 min，家兔抗鸽IgG-HRP二抗最佳稀释度为1∶8 000，孵育时间为30 min，最佳显色时间为15 min，当检测样品D450≥0.341则判定其为阳性。用该方法检测鸽腺病毒、鸽疱疹病毒、鸽Ⅰ型副黏病毒和轮状病毒的阳性血清时结果呈阴性，对稀释至1∶12 800的阳性血清进行检测时结果仍为阳性，批内和批间变异系数均小于10%。与常规PCR符合率为88.2%，用该方法对86份临床血清样品进行检测，阳性率为17.4%。综上所述，该间接ELISA方法的建立，作为一种特异性强，灵敏度高，重复性好的血清学检测方法，为后续PiCV候选疫苗免疫后抗体水平的评价及PiCV感染状况的评估提供了技术支持。

关键词：鸽圆环病毒 Cap蛋白原核表达间接ELISA方法

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优化营商环境壮大民营经济 008

优化营商环境壮大民营经济

一个标准的动物肺叶切除模型——猪肺的基本解剖

云南日报

作者：李春林李铁成段明杰

街道笔直，商铺林立，初到永德县永康镇，商贸繁荣人气旺给人们留下了深刻印象。“2023年永康镇新增市场主体874个。目前，全镇共有市场主体7345个，其中规上企业8个、合作社109个、企业1103个、个体工商户6133个，经济总量达到5.21亿... 详细信息

街道笔直，商铺林立，初到永德县永康镇，商贸繁荣人气旺给人们留下了深刻印象。“2023年永康镇新增市场主体874个。目前，全镇共有市场主体7345个，其中规上企业8个、合作社109个、企业1103个、个体工商户6133个，经济总量达到5.21亿元。”说起镇内的经济数据，永康镇党委副书

关键词：营商环境永德县永康镇民营经济

来源： cnki报纸评论

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中华胸部外科电子杂志 2024年第1期11卷 16-22页

作者：陈立如李志刚李春光 330006　南昌，江西省人民医院（南昌医学院第一附属医院）胸外科 200030　上海，上海交通大学医学院附属胸科医院胸外科

目的通过猪肺实地解剖展示猪各个肺叶的支气管、肺动脉和肺静脉的解剖特征,为猪肺叶切除术的动物实验提供参考。方法取1例心肺连体的成年猪心肺器官,观察猪肺叶,进一步在肺叶水平对该猪肺进行实地解剖,观察肺叶水平的支气管、肺动脉和... 详细信息

目的通过猪肺实地解剖展示猪各个肺叶的支气管、肺动脉和肺静脉的解剖特征,为猪肺叶切除术的动物实验提供参考。方法取1例心肺连体的成年猪心肺器官,观察猪肺叶,进一步在肺叶水平对该猪肺进行实地解剖,观察肺叶水平的支气管、肺动脉和肺静脉的解剖特征。结果猪肺分为左肺和右肺。猪左肺有3叶,分别为尖叶、心叶和膈叶,其中左尖叶和左心叶叶间裂融合,形成类似于人左肺上叶和左肺下叶的2肺叶构成方式;猪右肺有4叶,分别为尖叶、心叶、膈叶和副叶。每个肺叶均有独立的支气管、肺动脉和肺静脉;左尖叶和左心叶支气管共干,该共干类似于人左肺上叶支气管;左肺尖叶有2支肺动脉分支入肺,左膈叶和右肺各叶均只有一支肺动脉入肺;右副叶有2支肺静脉,其中一支副叶肺静脉与膈叶肺静脉根部汇合后进入心包内,其余肺叶均只有一支肺静脉。结论猪肺的肺叶解剖标识清晰,支气管、肺动脉和肺静脉的解剖特征与人体肺叶解剖具有相似性,可作为肺叶切除术的动物模型,熟悉猪肺解剖有助于顺利开展相关实验和研究。

关键词：猪肺解剖肺叶切除术动物实验

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VI型凿井井架快速安装技术研究

中文科技期刊数据库（全文版）工程技术 2024年第6期 0028-0031页

作者：贾文明高胡林李明辉李春智陕西亿华矿业开发有限公司陕西榆林719000

凿井井架是金属、非金属矿井在立井井简掘砌施工用的主要装备,担负着物料人员等提升运输任务, 选用合适型号凿井井架能提高提升运输能力,大型井架组装速度快慢对施工成本和建井工期有较大影响,本文以陕西亿华矿业开发有限公司海则滩煤... 详细信息

凿井井架是金属、非金属矿井在立井井简掘砌施工用的主要装备,担负着物料人员等提升运输任务, 选用合适型号凿井井架能提高提升运输能力,大型井架组装速度快慢对施工成本和建井工期有较大影响,本文以陕西亿华矿业开发有限公司海则滩煤矿副立井建设使用的VI型凿井井架为研究对象,论述了当前凿井井架发展历程并叙述了VI型凿井井架的特点,井架快速组装方法,此方法综合了“接装法”与“分扇组装法”,使安装效率大大提高,历时23天安装完成,其方法值得推广。

关键词：立井凿井井架快速安装

甲苯咪唑对大鳞副泥鳅肝脏氧化损伤的毒性作用

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农业环境科学学报 2024年第2期43卷 271-277页

作者：曾贤良方汉孙王润萍隗黎丽阮记明李福贵熊六凤高瑾梁惜梅江西农业大学动物科学技术学院南昌330045 江西农业大学国土资源与环境学院南昌330045

为了探究甲苯咪唑对大鳞副泥鳅肝脏氧化损伤的毒性作用,将大鳞副泥鳅暴露于浓度为0(对照)、0.004、0.02、0.1 mg·L^(-1)的甲苯咪唑溶液中,分别于24、72、144 h测定大鳞副泥鳅肝脏谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD... 详细信息

为了探究甲苯咪唑对大鳞副泥鳅肝脏氧化损伤的毒性作用,将大鳞副泥鳅暴露于浓度为0(对照)、0.004、0.02、0.1 mg·L^(-1)的甲苯咪唑溶液中,分别于24、72、144 h测定大鳞副泥鳅肝脏谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、乙酰胆碱酯酶(AChE)活性和总抗氧化能力(T-AOC)及丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明:24 h时GOT活性随着甲苯咪唑浓度的增加呈下降趋势,72 h和144 h时则呈先升高后下降趋势;低(0.004 mg·L^(-1))、中(0.02 mg·L^(-1))和高(0.1 mg·L^(-1))浓度组GPT活性在甲苯咪唑整个暴露过程中均低于对照组;SOD活性除了中浓度组在72 h时显著高于对照组外(P副泥鳅肝脏组织产生氧化胁迫和损伤作用,干扰神经递质系统,并对鱼类机体产生神经毒性效应。

关键词：甲苯咪唑大鳞副泥鳅抗氧化系统酶活性

双能源CT在高原地区检测痛风患者尿酸盐沉积检测中的应用

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西藏医药 2024年第3期45卷 16-17页

作者：李春辉雷彦明格桑罗布西藏自治区人民医院放射科西藏拉萨850000

目的探讨双能CT对高原地区关节痛风尿酸盐结晶形成中的应用价值。方法收集2021年6月~2022年5月在本院确诊为通风性关节炎患者20例。按检查方法分为手检组(20例,由1名多年临床经验的风湿科医生对患者进行查体并记录尿酸盐结晶沉积节的... 详细信息

目的探讨双能CT对高原地区关节痛风尿酸盐结晶形成中的应用价值。方法收集2021年6月~2022年5月在本院确诊为通风性关节炎患者20例。按检查方法分为手检组(20例,由1名多年临床经验的风湿科医生对患者进行查体并记录尿酸盐结晶沉积节的数目和形态)和CT组(20例,由1名多年放射诊断经验的医生在双能CT重建后的关节图像观察并记录有无尿酸盐结晶沉积,结晶的位置、数目、形态等),并进行统计分析。结果 20例痛风患者,平均血尿酸量为(439.15±150.36)μmol/L,血清尿酸超过360μmol/L者占75.0%。尿酸盐结晶沉积常见部位膝关节、足关节和腕关节为主,其次为肘关节;膝关节主要分布在前后交叉韧带、内外侧副韧带、髌上囊、髌韧带,足踝部以第一跖趾关节、踝关节距腓韧带、跟腱及手腕关节背侧肌腱深处为主。双源CT发现516处尿酸盐结晶,临床体格检查发现结晶为195处,两者比较差异有统计学意义(p<0.05)。结论双源CT双能量成像技术具有简便、无创优势,可清晰显示关节隐蔽部位的尿酸盐结晶,优于临床体格检查,可用于高原地区痛风性关节患者评估中。

关键词：痛风双源CT 高原

整体式箱体结构矿用行星减速器锥齿轮副接触区调整关键技术研究

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煤矿机械 2024年第3期45卷 63-65页

作者：陈云管凤花张学刚宁夏天地奔牛实业集团有限公司银川750001

针对煤矿井下采煤工作面刮板输送机配套的行星齿轮减速器整体式箱体结构,研究其输入轴和第二轴的结构和定位方式等,实现其在箱体内的整体组装和圆锥齿轮副接触区的调整,满足设计和使用要求。新的结构和技术为整体式结构矿用行星齿轮减... 详细信息

针对煤矿井下采煤工作面刮板输送机配套的行星齿轮减速器整体式箱体结构,研究其输入轴和第二轴的结构和定位方式等,实现其在箱体内的整体组装和圆锥齿轮副接触区的调整,满足设计和使用要求。新的结构和技术为整体式结构矿用行星齿轮减速器圆锥齿轮副接触区调整提供了一种新的解决方案。

关键词：整体式箱体结构接触区锥齿轮副行星减速器

牛病毒性腹泻病毒1型E2蛋白抗体侧流免疫层析检测方法的建立

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南京农业大学学报 2024年

作者：刘鑫欢张纹纹程子龙金前跃郭志睿郭大伟龙云凤杨蕾蕾刘茂军白娟李文良南京农业大学动物医学院江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/江苏省食品质量安全重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心河南省农业科学院动物疫病防控研究所南京医科大学附属第二医院南京海关动植物与食品检测中心

[目的]本研究使用金-银纳米颗粒标记纯化的牛病毒性腹泻病毒1型（BVDV-1）重组E2蛋白，建立基于金-银纳米颗粒的E2蛋白抗体侧流免疫层析检测方法。[方法]通过对金-银纳米颗粒标记条件进行优化，选取2 mg·mL-1的金黄色葡萄球菌A蛋白（St... 详细信息

[目的]本研究使用金-银纳米颗粒标记纯化的牛病毒性腹泻病毒1型（BVDV-1）重组E2蛋白，建立基于金-银纳米颗粒的E2蛋白抗体侧流免疫层析检测方法。[方法]通过对金-银纳米颗粒标记条件进行优化，选取2 mg·mL-1的金黄色葡萄球菌A蛋白（Staphylococal Protein A，SPA）和，BVDV-1 单克隆抗体1E2B3包被于硝酸纤维膜（NC膜）上，分别作为检测线（Test line，T线）和质控线（Control line，C线），对反应条件进行优化，建立侧流免疫层析检测方法。[结果]金-银纳米颗粒最佳标记条件为：以pH=7.4的硼酸-硼砂缓冲液作为金-银纳米颗粒的溶剂；最佳标记蛋白浓度为10 μg·mL-1。进而优化侧流免疫层析检测方法的反应条件为：2 mg·mL-1的SPA作为T线；0.6 mg·mL-1的mAb-1E2B3作为C线；待检血清作用浓度为1：50。特异性实验结果表明建立的金-银纳米颗粒免疫层析试纸条不与猪瘟病毒（CSFV）、牛病毒性腹泻病毒2型（BVDV-2）、牛副流感病毒3型（BPIV3）、传染性牛鼻气管炎病毒（IBRV）、口蹄疫病毒（FMDV）、牛支原体和布鲁氏菌阳性血清发生交叉反应。敏感性试验结果显示，将BVDV阳性血清（中和抗体效价为1:2048）稀释512倍时金-银纳米颗粒免疫层析试纸条仍可检出。使用金-银纳米颗粒试免疫层析纸条检测125份牛血清，并与中和试验结果比较。两者阴性血清符合率为100%，阳性血清符合率为96.04%，总体符合率为96.80%。[结论]实验表明基于金-银纳米颗粒的免疫层析抗体检测方法具有特异性好、灵敏度高、操作简便快捷的特点，为临床一线简便快速地检测BVDV-1抗体提供了有力的支撑。

关键词：牛病毒性腹泻病毒 E2蛋白抗体金-银纳米颗粒侧流免疫层析方法