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中华生殖与避孕杂志 2024年第6期44卷 562-573页

作者：胡颖怡倪其承钟瑞华杨文捷李国停周洁芸郭湘洁谢淑武周佳铃朱焰复旦大学药学院上海200032 上海市生物医药技术研究院国家卫生健康委生育调节药械重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海200032 上海市实验动物研究中心上海201203 上海健康医学院药学院上海201318

目的探讨连续重复给予含左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)紧急避孕药(emergency contraception pills,ECPs)对雌性大鼠生育力及其F1代仔鼠健康的影响。方法成年SPF级雌性大鼠于每个动情周期连续给予3次LNG-ECPs,分别给予3个(P-3)、6个(P... 详细信息

目的探讨连续重复给予含左炔诺孕酮(levonorgestrel,LNG)紧急避孕药(emergency contraception pills,ECPs)对雌性大鼠生育力及其F1代仔鼠健康的影响。方法成年SPF级雌性大鼠于每个动情周期连续给予3次LNG-ECPs,分别给予3个(P-3)、6个(P-6)和12个(P-12)动情周期。雌性大鼠每个给药时程下,采用Excel产生随机数按体质量分层随机分为2组,分别为LNG-ECPs组和溶媒对照组,分别灌胃给予0.12 mg/kg LNG-ECPs和等体积溶媒。各组于末次给药后4 h分别取1/2动物(12~18只)进行解剖(6~9只)和交配(6~9只);剩余1/2动物(12~18只)于停药恢复3个动情周期后再分别进行解剖(6~9只)和交配(6~9只),计算脏器系数。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测雌性大鼠血清中卵泡刺激素(follicle-stimulating hormone,FSH)、黄体生成素(lutenizing hormone,LH)、雌激素、孕激素、睾酮、抗苗勒管激素(anti-Müllerian hormone,AMH)以及游离甲状腺激素3(free thyroid hormone,fT3)的水平。雌性大鼠卵巢组织切片苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色后进行卵泡计数。记录LNG-ECPs给药结束和停药恢复期雌性大鼠妊娠率及窝仔数,测定F1代仔鼠生长指数以及主动和被动运动能力等指标。取P-12大鼠卵巢组织进行转录组学测序,建立LNG-ECPs致卵巢差异表达基因谱,分析LNG-ECPs致卵巢损伤的差异基因,并进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。结果①连续给予3个和6个动情周期后,LNG-ECPs组雌鼠的血清激素水平和生育力与溶媒对照组相比,差异均无统计学意义(均P>0.05);F1代仔鼠生长指数和行为学结果与溶媒对照组仔鼠相比差异均无统计学意义(均P>0.05)。②连续给予12个动情周期后,与溶媒对照组相比,LNG-ECPs组大鼠血清中FSH[(0.21±0.17)U/L]、LH[(0.27±0.08)U/L]和孕激素[(0.68±0.23)μg/L]水平显著低于溶媒对照组[(1.00±0.82)U/L,P=0.043;(1.00±0.50)U/L,P=0.006;(1.00±0.20)μg/L,P=0.027],雌二醇[(2.24±1.03)μg/L]和睾酮[(1.25±0.25)μg/L]水平明显高于溶媒对照组[(1.00±0.35)μg/L,P=0.019;(1.00±0.07)μg/L,P=0.044];卵巢中原始卵泡数量(4.88±2.36)显著少于溶媒对照组(16.13±9.36,P=0.005),闭锁卵泡数量(24.38±5.01)显著高于溶媒对照组(19.13±2.30,P=0.018);LNG-ECPs组中F1代仔鼠负重游泳时间[(157.13±32.29)s]明显低于溶媒对照组[(198.06±40.01)s,P=0.003]。停药恢复3个动情周期后,LNG-ECPs可造成大鼠血清中FSH[(2.48±1.18)U/L]、LH[(1.60±0.41)U/L]、睾酮[(1.37±0.23)μg/L]及FSH/LH值(1.61±0.41)显著高于溶媒对照组[(1.00±0.67)U/L,P=0.024;(1.00±0.27)U/L,P=0.014;(1.00±0.18)μg/L,P=0.011;1.00±0.49,P=0.042],且雌激素水平[(0.49±0.15)μg/L]和AMH水平[(0.79±0.15)μg/L]显著低于溶媒对照组[(1.00±0.37)μg/L,P=0.011;(1.00±0.10)μg/L,P=0.016],同时,大鼠卵巢中原始卵泡数量(6.25±5.06)仍显著少于溶媒对照组(12.00±5.56,P=0.048);F1代仔鼠在旷场中的运动总距离[(89.85±36.98)m]以及负重游泳时长[(112.00±29.52)s]均显著低于溶媒对照组[(147.55±23.13)m,P<0.001;(137.69±25.85)s,P=0.014]。③转录组测序结果表明,与溶媒对照组相比,LNG-ECPs组雌性大鼠卵巢组织中存在Cd5、Cxcr1、Lexm、Fga、Mybphl和Gstm5等显著差异表达的基因,参与萜类骨架生物合成、卵巢类固醇生成和皮质醇的合成与分泌等类固醇激素合成相关过程

关键词：左炔诺孕酮生育力行为学卵巢损伤转录组学

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同种异体子宫内膜异位症大鼠模型用于GnRH激动剂类药物的药效评价研究

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实验动物与比较医学 2024年第2期44卷 127-138页

作者：钟瑞华李国停杨文捷郭湘洁周洁芸胡颖怡倪其承杨野张敏朱焰国家卫生健康委员会生育调节药械重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组上海200237 复旦大学药学院上海200032 长春金赛药业有限公司长春130012

目的用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型,并评价促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响。方法取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠... 详细信息

目的用同种异体移植的方法构建大鼠子宫内膜异位症模型,并评价促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormone,GnRH)激动剂GenSci006对实验大鼠子宫内膜异位症模型的影响。方法取供体SPF级雌性SD大鼠的子宫内膜移植于受体雌性大鼠的腹腔壁上,构建同种异体的子宫内膜异位症模型。3周后,测量异位内膜的长、宽、高,计算给药前异位内膜的体积V1。将进行假手术操作的大鼠设为假手术组,将造模大鼠随机分为模型组、曲普瑞林组(0.25mg/kg)、GenSci006-1组(0.125mg/kg)和GenSci006-2组(0.25mg/kg)共4组,每组大鼠16只。各组大鼠单次给予相应的药物,假手术组和模型组给予同等体积的溶剂。3周后,再次测量异位内膜,计算给药后异位内膜的体积V2和抑制率;通过比较脏器系数及病理切片的变化,判断GenSci006对大鼠子宫和卵巢组织的影响;ELISA法测定血清中雌二醇(estradiol,E_(2))、孕酮(progesterone,P_(4))、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)和黄体生成素(luteinizinghormone,LH)水平的变化;实时荧光定量PCR法测定下丘脑和垂体中GnRH受体(GnRHreceptor,GnRHR)mRNA的表达水平。蛋白质印迹法检测异位内膜组织中雌激素受体(estrogen receptor,ER)α、ERβ和孕激素受体(progesterone receptor,PR)蛋白的表达。结果给药3周后发现,与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠的体重显著增加(P0.05);与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组子宫脏器系数及子宫内膜厚度显著降低(P0.05);与模型组相比,曲普瑞林组、GenSci006-1组和GenSci006-2组大鼠的卵巢脏器系数和血清P4水平均显著降低(P0.05)。与模型组相比,曲普瑞林组和GenSci006-2组大鼠垂体GnRHRmRNA表达水平显著下调(P0.05)。结论大鼠同种异体子宫内膜异位症模型适宜作为筛选和评价子宫内膜异位症治疗药物的动物模型,而且异位内膜体积、抑制率、子宫及卵巢脏器系数、血清E_(2)水平均可作为检测药物疗效的指标。

关键词：子宫内膜异位症 GenSci006 曲普瑞林异位内膜大鼠

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男性节育药物的研发进展

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中国新药杂志 2014年第1期23卷 55-61页

作者：李国停谢淑武朱焰复旦大学上海200032 上海市计划生育科学研究所生殖药理组国家卫生和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海200032

男性节育药物主要有激素和非激素两大类。激素类男性节育药主要通过服用外源性的激素抑制精子的发生,包括雄激素、雄激素与孕激素联合应用、雄激素与GnRH类似物联合应用等。非激素类男性节育药种类较多且处于不同的研发阶段。首先是干... 详细信息

男性节育药物主要有激素和非激素两大类。激素类男性节育药主要通过服用外源性的激素抑制精子的发生,包括雄激素、雄激素与孕激素联合应用、雄激素与GnRH类似物联合应用等。非激素类男性节育药种类较多且处于不同的研发阶段。首先是干扰支持细胞功能的Adjudin,Gamendazole,CDB4022;其次为睾丸"溴"结构域特异性蛋白(BRDT)抑制剂JQ1;最后是顶体酶抑制剂KF-950及棉酚,以及视黄酸抑制剂等。本文就近几年男性节育药的研究进展作一综述。

关键词：男性节育药激素类非激素类

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恶病质模型的构建及诺美孕酮对恶病质模型大鼠的影响研究

恶病质模型的构建及诺美孕酮对恶病质模型大鼠的影响研究

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：钟瑞华李国停杨文捷郭湘洁朱焰国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组

目的:建立顺铂诱导的恶病质模型,探索诺美孕酮对大鼠体重及脂肪的影响。方法:将大鼠随机分成三组,每组9只,分别腹腔注射1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg的化疗药物顺铂,每天对大鼠进行称重,大鼠体重下降5%停止给予顺铂,给药时间最长为5天。确定... 详细信息

目的:建立顺铂诱导的恶病质模型,探索诺美孕酮对大鼠体重及脂肪的影响。方法:将大鼠随机分成三组,每组9只,分别腹腔注射1mg/kg、2mg/kg、3mg/kg的化疗药物顺铂,每天对大鼠进行称重,大鼠体重下降5%停止给予顺铂,给药时间最长为5天。确定构建恶病质大鼠的剂量及给药时间。通过预先给予顺铂,筛选出对顺铂有反应的大鼠,随机分为空白组、模型对照组,甲地孕酮组(5、10mg/kg),诺美孕酮(2.5、5、10mg/kg),每组10只,给药方式为灌胃。大鼠给予甲地孕酮和诺美孕酮1周后,除空白组外,其他组腹腔注射顺铂,给药持续3天。给予顺铂期间,每天对大鼠进行称重,给予诺美孕酮11天后,大鼠进行麻醉取血处死。通过Image Pro Plus 6.0软件计算病理切片中大鼠腹股沟脂肪和附睾周围脂肪的横截面积及周长的变化。Western blot测定腹股沟脂肪细胞脂肪降解相关基因激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase, HSL)、脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase, ATGL),脂肪生成相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ (peroxisome proliferator activated receptor γ, PPARγ)、脂肪酸合成酶(fatty acid synthase FASN)、甾醇调节元件结合蛋白-1 (sterol regulatory element binding protein-1, SREBP-1)表达的变化。结果:给予2mg/kg的顺铂连续给药3天,能够构建大鼠恶病质模型。与模型组相比,2.5、5mg/kg诺美孕酮和10mg/kg的甲地孕酮能减轻顺铂诱导的恶病质大鼠的体重降低(p0.05)。诺美孕酮能够降低脂质降解基因HSL和ATGL在腹股沟脂肪的表达(p<0.05),增加脂质生成基因FASN、SREBP-1和PPARγ的表达(p<0.05)。结论:2mg/kg的顺铂连续腹腔给药3天能够构建大鼠恶病质的模型及诺美孕酮能够通过降低脂肪的萎缩改善顺铂诱导的恶病质大鼠的体重降低。

关键词：诺美孕酮恶病质顺铂脂肪

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基于P450酶的诺美孕酮与紫杉醇/顺铂相互作用的研究

基于P450酶的诺美孕酮与紫杉醇/顺铂相互作用的研究

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：郭湘洁李钊李国停钟瑞华杨文捷谢淑武朱焰国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组

目的基于不同药物对细胞色素P450酶（CYP450）的代谢亚型酶活性的影响,考察醋酸诺美孕酮（NOMAc）体外与紫杉醇（PTX）、顺铂（CDDP）的相互作用,初步探讨NOMAc、PTX、CDDP的相互作用,为NOMAc用于多药联合化疗辅助治疗子宫内膜腺癌提供... 详细信息

目的基于不同药物对细胞色素P450酶（CYP450）的代谢亚型酶活性的影响,考察醋酸诺美孕酮（NOMAc）体外与紫杉醇（PTX）、顺铂（CDDP）的相互作用,初步探讨NOMAc、PTX、CDDP的相互作用,为NOMAc用于多药联合化疗辅助治疗子宫内膜腺癌提供数据支持。方法建立适合的肝微粒体酶体外孵育体系:包含肝微粒体、MgCl2、探针底物混合样品、不同浓度的药物及抑制剂,37℃水浴预孵育5min后,加入NADPH再生系统启动反应,继续孵育60min;加入含内标氘代来曲唑的冰甲醇终止反应,涡旋震荡30 S后,4℃下13000×g离心10 min,取上清液进液质联用仪（HPLC-MS/MS）测定。确定探针药物的米氏常数、半数抑制浓度及CYP酶对应探针药物底物产物的浓度。结果 1、探针药物米氏常数（Km）分别为氯唑沙宗（CYP2E1）:0.4949;咪达唑仑（CYP3A4）:5.852;紫杉醇（CYP2C8）:3.041。2、药物半数抑制浓度（IC50）分别为双硫仑（CYP2E1）:5.533;酮康唑（CYP3A4）:3.145;槲皮素（CYP2C8）:0.07728。3、NOMAc与PTX/CDDP对3种CYPs酶活性的影响结果分别为:（1）CYP3A4酶:空白组浓度为22.975±1.168μmol·L,NOMAc组23.445±0.382μmol·L,NOMAc+PTX组21.593±0.985μmol·L,NOMAc+CDDP组24.329±0.727μmol·L,NOMAc+PTX+CDDP组21.224±1.462μmol·L;（2）CYP2E1酶:空白组浓度为0.892±0.069μmol·L,NOMAc组0.780±0.138μmol·L,NOMAc+PTX组0.447±0.026μmol·L,NOMAc+CDDP组0.799±0.080μmol·L,NOMAc+PTX+CDDP组0.499±0.107μmol·L;（3）CYP2C8酶:空白组浓度为16.472±1.332μmol·L,NOMAc组15.782±1.287μmol·L,NOMAc+PTX组15.926±0.973μmol·L,NOMAc+CDDP组16.631±0.419μmol·L, NOMAc+PTX+CDDP组15.973±1.331μmol·L。讨论1、NOMAc及NOMAc和CDDP联合用药组对三种酶均无显著影响;2、、NOMAc联合PTX、NOMAc联合PTX/CDDP用药时,与空白组相比对CYP3A4、CYP2C8无显著影响,但对CYP2E1有显著的抑制作用。临床上NOMAc与PTX联合用药时,在同时使用通过CYP2E1代谢的药物（如苯妥英钠、双香豆素、甲苯磺丁脲、优降糖、格列齐特、普萘洛尔、维拉帕米、利福平等）时应特别注意药物不良反应。联合用药时体内相互作用的实际情况需进行更深入研究。

关键词：诺美孕酮、紫杉醇、顺铂 P450酶药物相互作用肝微粒体

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沉默甲状腺激素受体β对孕激素抗子宫内膜癌细胞mTOR-4EBP1/eIF4G信号通路的影响

沉默甲状腺激素受体β对孕激素抗子宫内膜癌细胞mTOR-4EBP1/eIF4G...

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：周洁芸任冰涛钟瑞华李国停杨文捷朱焰国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组

目的从内分泌调节角度出发,研究甲状腺激素受体β与子宫内膜癌孕激素耐药的相关性及作用机制。方法采用免疫组化法测定20例临床患者子宫内膜癌和子宫内膜不典型增生组织样本中甲状腺激素受体α(TRα)和甲状腺激素受体β(TRβ)的表达,其... 详细信息

目的从内分泌调节角度出发,研究甲状腺激素受体β与子宫内膜癌孕激素耐药的相关性及作用机制。方法采用免疫组化法测定20例临床患者子宫内膜癌和子宫内膜不典型增生组织样本中甲状腺激素受体α(TRα)和甲状腺激素受体β(TRβ)的表达,其中孕激素敏感组织13例,孕激素不敏感组织7例;体外建立人子宫内膜癌(RL95-2)细胞模型并沉默THRA、THRB基因,测定给予醋酸甲羟孕酮(MPA)后的细胞存活率;采用转录组学技术,对MPA处理后的THRB沉默的RL95-2细胞(si-THRB-RL95-2)进行测序和KEGG富集分析;采用western blotting测定MPA处理后si-THRB-RL95-2细胞中Akt、mTOR、4EBP1、eIF4G蛋白表达的变化。结果 TRα、TRβ蛋白的染色主要定位于细胞质,部分定位于细胞核,呈黄色或棕色。在孕激素敏感组织和不敏感组织中,TRα的阳性面积表达比率分别为14.13±3.75%、17.81±2.33%,两者无显著性差异(P>0.05)。在孕激素敏感组织和不敏感组织中,TRβ的阳性面积表达比率分别为37.23±2.28%、19.27±2.58%,TRβ在孕激素敏感组织中的表达明显增加(P0.05),si-THRB-RL95-2在培养72、96 h后细胞存活率明显增加(P0.05);测序和KEGG富集分析结果显示,MPA(30μM)处理si-THRB-RL95-2细胞48 h后,si-THRB-DMSO和si-THRB-MPA组富集到MPAK,Ras,PI3K/Akt,mTOR,ErbB,IL-17信号通路。与si-Ctrl相比,si-THRB-RL95-2细胞p-mTOR,p-4EBP1,p-eIF4G表达水平明显增加(P<0.05),p-Akt表达水平明显降低(P<0.05);MPA(30μM)处理si-THRB-RL95-2细胞48 h后,si-THRB-RL95-2细胞p-mTOR,p-4EBP1表达水平明显增加(P<0.05),p-eIF4G表达增加,p-Akt表达降低。结论沉默TRβ能增加Ⅰ型子宫内膜癌细胞对孕激素的抵抗作用,其作用机制与mTOR-4EBP1/eIF4G信号通路激活相关,提示TRβ低表达与孕激素耐药相关。

关键词：甲状腺激素受体人子宫内膜癌醋酸甲羟孕酮 mTOR信号通路

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鬼臼毒素诱导离体大鼠附睾上皮细胞凋亡机制研究

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中国药理学通报 2017年第10期33卷 1357-1363页

作者：李国停钟瑞华周洁芸谢淑武陈平钱越英朱焰复旦大学生殖与发育研究院上海市计划生育科学研究所药物发展室生殖药理组国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室上海200032 浙江大学理学院化学系浙江杭州310028 中国科学院物理化学研究所北京100190

目的探讨鬼臼毒素(podophyllotoxin,PPT)抑制SD大鼠附睾上皮细胞增殖作用,揭示其诱导凋亡的相关分子机制。方法体外培养大鼠原代附睾上皮细胞,CCK-8法检测鬼臼毒素作用24、48、72 h后对细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞内部结构变化;Ann... 详细信息

目的探讨鬼臼毒素(podophyllotoxin,PPT)抑制SD大鼠附睾上皮细胞增殖作用,揭示其诱导凋亡的相关分子机制。方法体外培养大鼠原代附睾上皮细胞,CCK-8法检测鬼臼毒素作用24、48、72 h后对细胞增殖的影响;透射电镜观察细胞内部结构变化;Annexin V-FITC/PI检测细胞凋亡率;原位末端标记法(TUNEL)观察细胞凋亡形态;RT-PCR技术研究TNF-αmRNA的变化;ELISA法检测鬼臼毒素对细胞培养上清液TNF-α水平的影响;Western blot法检测细胞色素C、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的表达水平。结果CCK-8结果显示,鬼臼毒素能明显抑制大鼠附睾上皮细胞增殖并诱导凋亡,并呈剂量及时间依赖性(P<0.05),24、48、72 h的半数抑制浓度(95%置信区间)分别为59.36(15.50~227.41)、0.37(0.080~1.70)、0.077(0.017~0.35)μmol·L^(-1);透射电镜下观察发现,鬼臼毒素引起附睾上皮细胞形态变圆,细胞核破碎,线粒体空泡化;RT-PCR和ELISA检测结果显示,鬼臼毒素能升高TNF-αmRNA水平及细胞培养上清中TNF-α的含量;Western blot结果显示,鬼臼毒素能明显增加细胞中细胞色素C、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达。结论鬼臼毒素可通过线粒体调控的内源性通路和TNF受体介导的外源性通路,诱导大鼠附睾上皮细胞发生凋亡。

关键词：鬼臼毒素生育力大鼠附睾上皮细胞细胞凋亡线粒体 TNF-α caspase活化

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鳖甲煎丸对复合因素致大鼠脂肪性肝纤维化的治疗作用

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中药材 2014年第7期37卷 1241-1246页

作者：周娴颖谢淑武桂幼伦周洁芸李钊李国停朱焰上海市计划生育科学研究所/国家人口和计划生育委员会计划生育药具重点实验室/上海生殖健康药具工程技术研究中心上海200032 复旦大学上海200032

目的:观察鳖甲煎丸对脂肪性肝纤维化大鼠的治疗作用。方法:SD大鼠60只随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.25 mg/kg)阳性组以及鳖甲煎丸0.75、1.5、3.0 g/kg组,每组10只。皮下注射40%CCl4花生油1 mL/kg,同时以高脂饲料混合酒精灌胃... 详细信息

目的:观察鳖甲煎丸对脂肪性肝纤维化大鼠的治疗作用。方法:SD大鼠60只随机分为正常对照组、模型组、秋水仙碱(0.25 mg/kg)阳性组以及鳖甲煎丸0.75、1.5、3.0 g/kg组,每组10只。皮下注射40%CCl4花生油1 mL/kg,同时以高脂饲料混合酒精灌胃8 w造模。从造模第4周分别给予对应药液,连续用药5 w后解剖,计算肝、脾脏器系数;HE染色观察各组大鼠肝脏纤维化和脂肪变性程度;Elisa测定大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)水平和透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、Ⅰ型胶原(COLⅠ)、Ⅲ型胶原(COLⅢ)、Ⅳ型胶原(COLⅣ)含量;免疫组化检测肝组织基质金属蛋白酶(MMP-1)、基质金属蛋白酶抑制因子(TIMP-1)的表达。结果:复合因素可成功诱导大鼠脂肪性肝纤维化模型。鳖甲煎丸3 g/kg可显著降低大鼠肝脏器系数(P<0.05);HE染色显示,鳖甲煎丸0.75、3 g/kg组大鼠肝脏纤维化和脂肪变性均出现不同程度改善;鳖甲煎丸3.0 g/kg可显著降低模型大鼠血清ALT、AST和HA、LN、COLⅠ、COLⅢ含量(P<0.05),并显著抑制肝组织TIMP-1的高表达(P<0.05)。结论:鳖甲煎丸对复合因素所诱导的大鼠脂肪性肝纤维化有良好的治疗作用。

关键词：鳖甲煎丸肝纤维化脂肪性复合因素

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鬼臼毒素对大鼠附睾上皮细胞基因表达差异的影响

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中国药理学与毒理学杂志 2016年第10期30卷 1086-1087页

作者：李国停谢淑武钟瑞华陈平钱越英朱焰上海市计划生育科学研究所上海200030 浙江大学浙江杭州310058 中国科学院理化技术研究所北京100190

目的研究鬼臼毒素对体外培养大鼠附睾上皮细胞基因表达的影响。方法离体培养大鼠附睾上皮细胞给予溶剂(DMSO)和鬼臼毒素0.01μg·mL-1,作用48 h后分别抽提RNA,纯化定量质检后制备荧光标记探针标记样品cD NA,将纯化后的c DNA样品片段化... 详细信息

目的研究鬼臼毒素对体外培养大鼠附睾上皮细胞基因表达的影响。方法离体培养大鼠附睾上皮细胞给予溶剂(DMSO)和鬼臼毒素0.01μg·mL-1,作用48 h后分别抽提RNA,纯化定量质检后制备荧光标记探针标记样品cD NA,将纯化后的c DNA样品片段化后与芯片杂交,检测芯片并记录结果。结果鬼臼毒素组细胞与空白对照组相比,差异倍数在5倍以上的有137个基因,其中73个基因上调,64个基因下调;差异倍数在10倍以上的有40个,包括26个上调基因(U2SURP,DANJB7,ARHGAP15,TEMEM47,CCL3,MMP9,CSF3,IL23A,CXCL2,MMP13,CSF2,CXCL3,MMP10,CXCL5,SCIN,LOC500846,OLR540,PLA2G2A,CXC3CLL,IL1B,LOC363060,DCHS2,CCL20,RNASE10,LOC360228,TNF-A)和14个下调基因(RAB44,KRT5,ADAMTSL2,LOC685767,LOC688842,RGD1564513,POP1,KCNJ10,POLR3A,CNTROB,FAM109A,ORL578,COL1LA2,TAS2R71)。两组差异表达基因Pathway富集功能分析显示,显著上调基因主要涉及细胞因子受体间相互作用(cytokine-cytokine receptor interaction)、肿瘤坏死因子信号通路、NF-kappa B信号通路、趋化因子信号通路、凋亡通路及风湿性关节炎通路;显著下调基因主要涉及神经刺激性配体受体通路和嗅觉传到通路等。差异基因最集中的通路是细胞因子间相互作用及细胞凋亡。结论鬼臼毒素主要通过两条途径影响大鼠附睾上皮细胞生长,分别是诱导凋亡和引发炎症反应。

关键词：鬼臼毒素附睾上皮细胞基因表达细胞凋亡炎症反应

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附睾精子成熟和低双氢睾酮不育发病机制研究

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第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会

作者：谢淑武李国停郭湘洁钟瑞华杨文捷周洁芸朱焰沈如凌范春上海实验动物研究中心国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理研究组

睾丸产生的精子还不具备精卵识别和精卵结合能力,在附睾运行和贮存过程中,精子发生一系列形态结构、生化代谢和生理功能的改变,最终成熟并获得受精能力。附睾管腔微环境与精子相互作用,使精子表面蛋白质的成分得以部分改变,或已有的蛋...

睾丸产生的精子还不具备精卵识别和精卵结合能力,在附睾运行和贮存过程中,精子发生一系列形态结构、生化代谢和生理功能的改变,最终成熟并获得受精能力。附睾管腔微环境与精子相互作用,使精子表面蛋白质的成分得以部分改变,或已有的蛋白质得以部分修饰(如磷酸化或去磷酸化,酯化或脱酯化,酰化或脱酰化,羧基化或脱羧基化,醣基化或去醣基化等)而被激活或抑制,从而逐步获得成熟时所具备的功能,保护其自身能在附睾中储存及与卵子结合。

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