沉默甲状腺激素受体β对孕激素抗子宫内膜癌细胞mTOR-4EBP1/eIF4G信号通路的影响
作者单位：国家卫生健康委员会计划生育药具重点实验室上海生殖健康药具工程技术研究中心上海市生物医药技术研究院生殖药理组
会议名称：《第十二届全国基础与临床生殖药理暨出生缺陷防控与遗传咨询学术研讨会》
会议日期：2023年
学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100706[医学-药理学] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学]
关 键 词：甲状腺激素受体 人子宫内膜癌 醋酸甲羟孕酮 mTOR信号通路
摘 要：目的从内分泌调节角度出发,研究甲状腺激素受体β与子宫内膜癌孕激素耐药的相关性及作用机制。方法采用免疫组化法测定20例临床患者子宫内膜癌和子宫内膜不典型增生组织样本中甲状腺激素受体α(TRα)和甲状腺激素受体β(TRβ)的表达,其中孕激素敏感组织13例,孕激素不敏感组织7例;体外建立人子宫内膜癌(RL95-2)细胞模型并沉默THRA、THRB基因,测定给予醋酸甲羟孕酮(MPA)后的细胞存活率;采用转录组学技术,对MPA处理后的THRB沉默的RL95-2细胞(si-THRB-RL95-2)进行测序和KEGG富集分析;采用western blotting测定MPA处理后si-THRB-RL95-2细胞中Akt、mTOR、4EBP1、eIF4G蛋白表达的变化。结果 TRα、TRβ蛋白的染色主要定位于细胞质,部分定位于细胞核,呈黄色或棕色。在孕激素敏感组织和不敏感组织中,TRα的阳性面积表达比率分别为14.13±3.75%、17.81±2.33%,两者无显著性差异(P0.05)。在孕激素敏感组织和不敏感组织中,TRβ的阳性面积表达比率分别为37.23±2.28%、19.27±2.58%,TRβ在孕激素敏感组织中的表达明显增加(P0.05),si-THRB-RL95-2在培养72、96 h后细胞存活率明显增加(P0.05);测序和KEGG富集分析结果显示,MPA(30μM)处理si-THRB-RL95-2细胞48 h后,si-THRB-DMSO和si-THRB-MPA组富集到MPAK,Ras,PI3K/Akt,mTOR,ErbB,IL-17信号通路。与si-Ctrl相比,si-THRB-RL95-2细胞p-mTOR,p-4EBP1,p-eIF4G表达水平明显增加(P0.05),p-Akt表达水平明显降低(P0.05);MPA(30μM)处理si-THRB-RL95-2细胞48 h后,si-THRB-RL95-2细胞p-mTOR,p-4EBP1表达水平明显增加(P0.05),p-eIF4G表达增加,p-Akt表达降低。结论沉默TRβ能增加Ⅰ型子宫内膜癌细胞对孕激素的抵抗作用,其作用机制与mTOR-4EBP1/eIF4G信号通路激活相关,提示TRβ低表达与孕激素耐药相关。