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N-乙酰-D-神经氨酸的酶法合成和正选择表达载体的构建

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N-乙酰-D-神经氨酸的酶法合成和正选择表达载体的构建

作者：朱宇鹏南京师范大学

学位级别：硕士

N-乙酰-D-神经氨酸是化学合成扎那米韦的关键中间体,也是合成其他抗流感药物的主要原料。目前,N-乙酰-D-神经氨酸主要通过酶催化法制备。首先由N-酰基-D-葡萄糖胺2-异构酶将N-乙酰-D-葡萄糖胺异构化为N-乙酰-D-甘露糖胺;从后者到N-乙酰... 详细信息

N-乙酰-D-神经氨酸是化学合成扎那米韦的关键中间体,也是合成其他抗流感药物的主要原料。目前,N-乙酰-D-神经氨酸主要通过酶催化法制备。首先由N-酰基-D-葡萄糖胺2-异构酶将N-乙酰-D-葡萄糖胺异构化为N-乙酰-D-甘露糖胺;从后者到N-乙酰-D-神经氨酸有两个途径：一种是神经氨酸醛缩酶催化N-乙酰-D-甘露糖胺与丙酮酸之间的缩合而得到N-乙酰-D-神经氨酸;另一种是神经氨酸合成酶催化N-乙酰-D-甘露糖胺与磷酸烯醇式丙酮酸缩合为N-乙酰-D-神经氨酸。本研究通过同源搜索找到与已知神经氨酸合成酶具有较高同源性的蛋白,进而在大肠杆菌中进行克隆、表达和纯化。同时测定了不同来源的神经氨酸醛缩酶、神经氨酸合成酶以及N-酰基-D-葡萄糖胺2-异构酶的活性。结果表明来源于大肠杆菌的醛缩酶活性最高,以全细胞进行催化,37℃下反应1h后,神经氨酸的摩尔收率最高可以达到23.31%;来源于脑膜炎双球菌的神经氨酸合成酶在全细胞水平具有很高的合成酶活性,37℃下全细胞催化反应30分钟后Neu5Ac的摩尔收率最高可以达到50.96%;来源于多拟形杆菌的BT0453蛋白的异构酶活性较好,与大肠杆菌醛缩酶偶联反应,反应时间为4h后,神经氨酸的摩尔收率最高达到2.77%。目前将来源自大肠杆菌的三种伴侣蛋白作为融合标签构建了伴侣蛋白融合表达载体。选取A113695和RB3348与伴侣蛋白基因融合表达。结果表明,目的基因与三种伴侣蛋白融合表达的重组蛋白可溶性明显增加,启动因子作为融合标签的融合蛋白表达量最高。BandScan软件分析表明,a113695基因与启动因子基因融合表达时,表达出95.5KD融合蛋白,所表达的融合蛋白几乎均为可溶性蛋白,其可溶性蛋白的表达量占总表达蛋白的比例为37.2%,高于a113695单独表达时的7.1%的比例;RB3348基因与启动因子基因融合表达时,可溶性蛋白的表达量占总表达蛋白的比例为53.0%,远高于单独表达时4.4%的比例。正选择克隆载体是一类通过抗生素或化合物对重组克隆进行直接筛选的载体,最大优点是其可保证很高的克隆效率,有时可达100%。有报道显示β-内酰胺酶基因(bla)在缺失C端密码子(290位色氨酸密码子)时,将不能很好的表达氨苄青霉素抗性功能;而定向插入外源基因后将重建bla的C端密码子,进而使β-内酰胺酶重获氨苄青霉素抗性功能。本研究将色氨酸缺失的β-内酰胺酶基因克隆至带有TEV蛋白酶酶切位点的表达载体上,构建了正选择表达载体pPAE以及pPAE-MBP。选取大肠杆菌醛缩酶nanA和人源肾素结合蛋白hRnBP做克隆范例。实验结果证明pPAE和pPAE-MBP的克隆效率均达100%,同时所克隆的基因成功在大肠杆菌中表达。

关键词： N-乙酰-D-神经氨酸 N-乙酰神经氨酸合成酶活性测定伴侣蛋白融合表达载体正选择表达载体

基于可调光延迟线的微波光子零中频接收机研究

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中国激光 2021年第9期48卷 113-121页

作者：梅理崇毓华朱宇鹏彭卫王冰中国电子科技集团公司第三十八研究所安徽合肥230000 安徽省天线与微波工程实验室安徽合肥230000

提出了一种基于可调光延迟线的微波光子正交解调技术,并基于该技术设计了微波光子零中频接收机。通过调节光延迟线实现本振信号的90°移相,并采用波分复用方法在共用的级联马赫-曾德尔调制器结构中实现两条正交链路的射频信号与本振信... 详细信息

提出了一种基于可调光延迟线的微波光子正交解调技术,并基于该技术设计了微波光子零中频接收机。通过调节光延迟线实现本振信号的90°移相,并采用波分复用方法在共用的级联马赫-曾德尔调制器结构中实现两条正交链路的射频信号与本振信号的混频,从而提高了光正交解调的幅相一致性。所设计的微波光子零中频接收机可对光正交解调之后的中频处理器件如光电探测器、滤波器以及模数转换器等引起的链路幅相不平衡进行数字补偿。经数字幅相失衡补偿后,微波光子零中频接收机在中心频率为12 GHz、瞬时带宽为4 GHz的工作频段内测得幅度不平衡小于0.4 dB,相位不平衡小于1.5°,镜频抑制度大于45 dB,最高镜频抑制度可达79 dB。

关键词：光通信微波光子宽带接收机零中频镜频抑制

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中国对RCEP国家直接投资的贸易效应研究

中国对RCEP国家直接投资的贸易效应研究

作者：朱宇鹏云南财经大学

学位级别：硕士

随着世界各国经济增长放缓,贸易保护主义逐步抬头,开展区域经济合作成为地理邻近的国家应对发展挑战的共同选择,这也导致近年来全球范围内经济合作区域化趋势愈发明显。在这种背景下,2012年11月在柬埔寨举行的东亚峰会上,东盟国家提出... 详细信息

随着世界各国经济增长放缓,贸易保护主义逐步抬头,开展区域经济合作成为地理邻近的国家应对发展挑战的共同选择,这也导致近年来全球范围内经济合作区域化趋势愈发明显。在这种背景下,2012年11月在柬埔寨举行的东亚峰会上,东盟国家提出了《区域全面经济伙伴关系协定》(RCEP)。2022年1月1日,RCEP正式生效,该协定涵盖了全球近30%的人口和GDP,是全球覆盖范围最广、成员最多的自由贸易协定。2022年,中国对RCEP其他成员国的贸易总额达1.94万亿美元,占中国对外贸易进出口总额的30.8%;直接投资流量达224.84亿美元,占当年中国对外直接投资流量总额的13.78%。这表明加强对中国与RCEP其他国家直接投资和贸易关系的研究是十分必要的。虽然RCEP刚刚生效,其协定产生的效应还未能充分显现,但本研究仍具有较强的总结性与参考性。它提供了RCEP生效前中国与该组织其他成员国之间的经贸合作状态,可作为RCEP生效后相关研究的比较参考,为未来进一步探索和评估RCEP对区域经济合作的影响提供了重要依据。本文基于直接投资对贸易进出口影响的相关理论,从国别、地区、行业的角度具体分析了中国对RCEP各成员国的直接投资与贸易现状。通过文献梳理和利用贸易引力模型结合2013年至2022年的相关数据,建立模型进行实证分析。随后进行了分位数回归、多重共线性分析、内生性分析和稳健性分析,对实证结果进行检验,并利用异质性分析对RCEP国家按区位和发达程度分组进行了分析,得出以下结论:(1)中国对RCEP成员国的直接投资不仅可以带来出口创造效应和进口效应,而且反向进口效应明显高于出口创造效应。(2)对东盟国家的直接投资同样可以带来出口创造和反向进口效应,其中反向进口效应更为显著;而对于日韩和新澳来说,直接投资并未带来明显的贸易效应。(3)在高收入国家组和中等偏上收入国家组中,直接投资对贸易有明显的促进效应;而对于中等偏下收入国家来说,直接投资对贸易效应不明显。最后,结合上述结论,本文基于国家发展战略、精准选择行业、积极应对风险等三方面为中国对RCEP国家的直接投资提出了对策建议。

关键词：区域全面经济伙伴关系协定直接投资投资的贸易效应高质量发展

基于IQ光调制的16-QAM光发射机多偏置电压反馈控制性能分析

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激光与光电子学进展 2013年第6期50卷 52-58页

作者：曹剑超杨彦甫朱宇鹏姚勇哈尔滨工业大学深圳研究生院广东深圳518055

主要研究基于IQ光调制器的16进制正交振幅调制(16-QAM)光发射机中多偏置电压反馈控制性能,着重分析了装置内部两个马赫曾德尔调制器(MZM)的偏置电压与马赫曾德尔干涉仪(MZI)的偏置电压之间的协同控制问题,以及以光发射机的平均输出光功... 详细信息

主要研究基于IQ光调制器的16进制正交振幅调制(16-QAM)光发射机中多偏置电压反馈控制性能,着重分析了装置内部两个马赫曾德尔调制器(MZM)的偏置电压与马赫曾德尔干涉仪(MZI)的偏置电压之间的协同控制问题,以及以光发射机的平均输出光功率作为反馈控制两个MZM偏置电压的监测信号所面临的多极值问题。研究证明了当MZM偏置电压处于传输曲线的最低点时监测的输出光功率为极值,且不受MZI偏置电压的影响。分析发现,合适的驱动信号幅度可保证两个MZM偏置电压的反馈控制过程中不存在多局部极值问题。

关键词：光通信 16进制正交振幅调制 IQ光调制器偏置控制

A novel reconfigurable modulator implementation for generating optical eight-ary PSK/QAM signals

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Chinese Optics Letters 2014年第A01期12卷 35-37页

作者：颜丙阳杨彦甫朱宇鹏钟杰昌曹剑超吴炳雄姚勇 Department of Electronic and Information Engineering Shenzhen Graduate School Harbin Institute of Technology Shenzhen 518055 China

We propose a reconfigurable 8PSK/8QAM modulator implementation by employing two cascaded QPSK modulators with an interferometer in between. With simple control of bias voltage of the interferometer, a flexible switching between 8PSK/8QAM can be achieved. The transmission performance of the generated 8PSK/8QAM signals over different link scenarios is compared via numerical simulations. The results reveal that the proposed implementation has the capability of maximizing transmission distance in the case of dynamic optical network.

关键词： QPSK调制器 QAM信号 8PSK 可重构八进制 QAM调制器偏置电压数值模拟

构建链霉菌小型基因文库的新型正选择克隆载体

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中国抗生素杂志 2010年第11期35卷 835-839页

作者：马超朱宇鹏尚广东江苏省微生物工程技术研究中心江苏省生物多样性与生物技术重点实验室南京师范大学生命科学学院南京210046

目的构建链霉菌小型基因文库是获得链霉菌基因的一个重要手段,常规使用的克隆载体常有着一定程度的假阳性,因此构建的高效率的克隆载体有着实际的意义。方法本研究通过重叠延伸PCR手段将一个96bp的多克隆位点序列插入至rpsL基因的启动... 详细信息

目的构建链霉菌小型基因文库是获得链霉菌基因的一个重要手段,常规使用的克隆载体常有着一定程度的假阳性,因此构建的高效率的克隆载体有着实际的意义。方法本研究通过重叠延伸PCR手段将一个96bp的多克隆位点序列插入至rpsL基因的启动子和开放阅读框之间,将此DNA片段克隆至pBluescript KS（-）而获得了新型的正选择克隆载体pLS975。结果 pLS975有18个酶切位点可用于外源DNA片段的克隆,重组克隆以氨苄青霉素抗性和链霉素抗性进行筛选,宿主菌为链霉素抗性菌株如Escherichia coli DH10B。两个小型基因文库的制备显示pLS975具有很高的克隆效率（96%~100%）。结论 pLS975可成为构建链霉菌小型基因文库的良好载体。

关键词：正选择克隆载体链霉菌小型基因文库 rpsL基因链霉素

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基于三维视觉的海洋生物区域种类识别仿真

计算机仿真 2018年第5期35卷 402-405,443页

作者：张珊朱宇鹏海南大学旅游学院海南海口570208 海南大学南海海洋资源利用国家重点实验室海南海口570208

对海洋生物区域种类的识别,能够对海洋生物种类构成和丰度进行有效识别和定量分析。对海洋生物区域种类进行识别,需要结合边缘结构的方向和强度,丰富海洋生物同质区域的边缘特征,完成生物种类识别。传统方法将图像第一卷积层特征图划分... 详细信息

对海洋生物区域种类的识别,能够对海洋生物种类构成和丰度进行有效识别和定量分析。对海洋生物区域种类进行识别,需要结合边缘结构的方向和强度,丰富海洋生物同质区域的边缘特征,完成生物种类识别。传统方法将图像第一卷积层特征图划分为多个子块图像,计算海洋生物子块图像矩阵的奇异值,但忽略了对海洋生物边缘特征的强化处理,导致分类精度偏低。提出基于三维视觉的海洋生物种类识别方法。将海洋生物图像边缘曲线投影至空间平面,对海洋生物结构表面信息进行空间恢复,获得海洋生物图像边缘三维坐标,将海洋生物图像的边缘像素识别出来,计算各个有效像素的梯度。加入边缘结构的方向和强度,丰富海洋生物同质区域的边缘特征。实验结果表明,该方法对于区域自遮挡下的测点三维坐标恢复精度较高,提高了海洋生物边缘的匹配精度以及识别效果。

关键词：三维视觉海洋生物种类识别

延时干涉结构辅助的电吸收调制波长变换研究(英文)

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光子学报 2014年第7期43卷 21-25页

作者：朱宇鹏杨彦甫颜丙阳钟杰昌姚勇哈尔滨工业大学深圳研究生院高速光通信公共服务平台广东深圳518055

基于电吸收调制器,对比分析了无延时干涉仪装置和有延时干涉仪装置条件下波长变换的情形.10Gb/s归零码光信号波长变换的实验证明,延时干涉仪装置可有效消除变换后光信号的脉冲拖尾,并极大地改善信号的消光比指标.分析了电吸收调制器偏... 详细信息

基于电吸收调制器,对比分析了无延时干涉仪装置和有延时干涉仪装置条件下波长变换的情形.10Gb/s归零码光信号波长变换的实验证明,延时干涉仪装置可有效消除变换后光信号的脉冲拖尾,并极大地改善信号的消光比指标.分析了电吸收调制器偏置电压、数据信号功率、变换波长等工作参数对波长变换性能的影响,发现无论有无延时干涉仪装置,均需合理设置偏置电压来优化波长变换信号的接收灵敏度;在-3.0V偏置电压条件下,有延时干涉仪装置时,灵敏度增益达2.0dB.

关键词：电吸收调制器延时干涉仪交叉吸收调制波长变换消光比

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我国汽车产业的重组战略

商业经济 2005年第2期 88-89页

作者：朱宇鹏哈尔滨商业大学黑龙江哈尔滨150028

我国汽车产业要想同国外的汽车巨人同台竞争 ,必须进行产业重组 ,走集团化发展之路。从方式多样化、空间多元化、内容全面化上进行重组 ,从组织结构、产品结构和区域结构上构建我国汽车产业的发展战略 ,实现质的提升。

关键词：汽车工业中国产业重组自主知识产权核心技术产品结构经济效益