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山羊FTL基因克隆、序列分析和组织表达研究

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黑龙江畜牧兽医 2022年第15期 58-63,136,137页

作者：龚静曾献春四川开放大学农林卫生学院成都610073 成都医学院检验医学院成都610500

为了探讨山羊体内铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)的结构及生物学功能,试验利用RT-PCR技术克隆得到山羊FTL基因序列,通过在线软件分析其生物学特性,构建物种进化树揭示物种间亲缘关系;根据克隆获得的FTL基因序列,通过实时荧光定量... 详细信息

为了探讨山羊体内铁蛋白轻链(ferritin light chain,FTL)的结构及生物学功能,试验利用RT-PCR技术克隆得到山羊FTL基因序列,通过在线软件分析其生物学特性,构建物种进化树揭示物种间亲缘关系;根据克隆获得的FTL基因序列,通过实时荧光定量PCR技术检测山羊FTL基因在不同组织中表达水平;复苏前期保存的山羊肌内前体脂肪细胞,利用实时荧光定量PCR技术检测FTL基因在诱导分化各时间点的相对表达量。结果表明:克隆获得的山羊FTL基因编码区(CDS)序列全长为745 bp,其中包括完整的大小为528 bp的ORF,共编码173个氨基酸;FTL蛋白有6个丝氨酸磷酸化位点,4个苏氨酸磷酸化位点,有23个带正电荷的赖氨酸和精氨酸残基,26个带负电荷的谷氨酸和天冬氨酸残基,无跨膜结构域;山羊FTL基因与牛进化亲缘关系最近;FTL基因在山羊体内各器官/组织中均有不同程度的表达,其中在肝脏中的相对表达量最高;FTL基因在24小时时相对表达量最高,24 h后的表达量呈不断下降的趋势。说明山羊FTL蛋白与脂肪代谢具有一定直接或间接关系。

关键词：山羊 FTL基因克隆组织表达时序表达

儿童肠道中乳酸菌的分离、鉴定及其降解3-甲基吲哚的功能研究

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食品与发酵工业 2022年第2期48卷 144-149页

作者：庄伟伟朱雅琴曾献春新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室中亚区域有害生物联合控制国际研究中心干旱区植物逆境生物学实验室新疆师范大学生命科学学院新疆乌鲁木齐830054 四川省南充市西充县农业农村局四川南充637200 成都医学院检验医学院四川成都610500

为研究从人体肠道分离、筛选的乳酸菌(lactic acid bacteria, LAB),其体外降解3-甲基吲哚的功能。采用MRS培养基从3~8岁健康儿童肠道中筛选乳酸菌,提取细菌总DNA,扩增16S rRNA序列,构建系统发育树。在以3-甲基吲哚为唯一碳源、氮源的无... 详细信息

为研究从人体肠道分离、筛选的乳酸菌(lactic acid bacteria, LAB),其体外降解3-甲基吲哚的功能。采用MRS培养基从3~8岁健康儿童肠道中筛选乳酸菌,提取细菌总DNA,扩增16S rRNA序列,构建系统发育树。在以3-甲基吲哚为唯一碳源、氮源的无机盐培养基中胁迫培养乳酸菌,紫外分光光度计测定吸光度值,测定乳酸菌在高浓度3-甲基吲哚环境中的生长曲线;使用GC-MS动态检测3-甲基吲哚残留量,测定乳酸菌对3-甲基吲哚的降解能力。结果显示,筛选获得8株乳酸菌,其中LAB1为干酪乳杆菌属(Lactobacillus casei)、LAB2为类肠膜魏斯氏菌属(Weissella paramesenteroides)、LAB3、LAB5、LAB6、LAB7、LAB8均归属为肠膜明串珠菌属(Leuconostoc mesenteroides)、LAB4为格氏乳球菌属(Lactococcus garvieae)。在添加3-甲基吲哚的无机盐培养基中培养8株细菌,其降解3-甲基吲哚的能力均较强。LAB1~LAB8对3-甲基吲哚的体外降解率在168 h分别达到62.21%、60.45%、52.50%、62.19%、61.91%、61.94%、55.34%、58.73%,其中LAB1(干酪乳杆菌)对3-甲基吲哚的降解率最高,证实来源于儿童肠道的乳酸菌具有降解3-甲基吲哚的功能。该实验结果丰富了降解肠道毒素的微生物资源,同时也为今后扩展乳酸菌的应用范围提供了切实可行的理论依据。

关键词：乳酸菌 3-甲基吲哚降解肠道毒素

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干酪乳杆菌对便秘小鼠肠道菌群的影响

食品与发酵工业 2022年第6期48卷 64-70页

作者：曾献春朱雅琴王明明李佳雯刘蔓萩庄伟伟成都医学院检验医学院四川成都610500 西充县农业农村局四川南充637200 新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室中亚区域有害生物联合控制国际研究中心干旱区植物逆境生物学实验室生命科学学院(新疆师范大学)新疆乌鲁木齐830054

该试验探讨了从健康儿童肠道分离的干酪乳杆菌对便秘小鼠肠道粪便菌群组成的影响。选择体重为(20±2)g的小鼠72只,随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组、干酪乳杆菌低剂量组、中剂量组和高剂量组。用复方地芬诺... 详细信息

该试验探讨了从健康儿童肠道分离的干酪乳杆菌对便秘小鼠肠道粪便菌群组成的影响。选择体重为(20±2)g的小鼠72只,随机分为6组,分别为正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组、干酪乳杆菌低剂量组、中剂量组和高剂量组。用复方地芬诺酯灌胃小鼠,建立便秘模型。正常对照组小鼠灌胃生理盐水,模型对照组小鼠灌胃复方地芬诺酯和生理盐水,阳性对照组灌胃复方地芬诺酯和嗜热链球菌,其余各组便秘小鼠灌胃复方地芬诺酯和相应浓度的干酪乳杆菌。灌胃3 d后,采集小鼠肠道内的粪便,用于分析菌群组成。结果表明,与正常对照组相比,便秘小鼠肠道菌群中乳杆菌属、另枝菌属丰度有不同程度的降低,而普雷沃氏菌属、norank_f_Muribaculaceae丰度升高。干酪乳杆菌干预3 d,优势菌群为norank_f_Muribaculaceae、乳杆菌属、拟普雷沃菌属、嗜冷杆菌属。与模型对照组相比,干酪乳杆菌组小鼠肠道菌群中普雷沃氏菌属、norank_f_Muribaculaceae丰度降低,另枝菌属丰度升高;干酪乳杆菌中剂量组、干酪乳杆菌高剂量组中乳杆菌属丰度升高。提示干酪乳杆菌可通过抑制条件致病菌普雷沃氏菌属的增殖,促进肠道中乳杆菌属、另枝菌属的生长,从而改善肠道菌群,达到缓解便秘的作用。

关键词：干酪乳杆菌肠道菌群便秘小鼠高通量测序

医疗机构合理使用特殊医学用途配方食品(FSMP)综合评价指标体系的构建

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中国循证医学杂志 2023年第11期23卷 1323-1328页

作者：李佳桐吕奕姝母东煜龚杰王蒙妍胡雯曾献春石磊成都医学院检验医学院食品营养教研室成都610500 四川大学华西医院临床营养科成都610041 四川大学华西临床医学院成都610041

目的构建医疗机构合理使用特殊医学用途配方食品(FSMP)综合评价指标体系。方法在文献回顾和对300家医疗机构现况调查的基础上制定专家函询问卷,采用德尔菲法和共识会议法对医疗机构合理使用FSMP综合评价指标体系进行两轮专家咨询,确定... 详细信息

目的构建医疗机构合理使用特殊医学用途配方食品(FSMP)综合评价指标体系。方法在文献回顾和对300家医疗机构现况调查的基础上制定专家函询问卷,采用德尔菲法和共识会议法对医疗机构合理使用FSMP综合评价指标体系进行两轮专家咨询,确定最终的指标体系。结果经过两轮专家咨询和专家共识会议最终确定包括一级目录指标3项,二级目录指标17项,三级目录指标13项的医疗机构合理使用FSMP综合评价指标体系。结论本指标体系有助于促进我国医疗机构FSMP临床应用的合理化和规范化,提升临床营养医疗质量。

关键词：德尔菲法专家咨询法医疗机构特殊医学用途配方食品

基于岗位胜任力为导向的“食品微生物学检验”教学改革探索与实践

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微生物学通报 2022年第9期49卷 4004-4012页

作者：孙丰慧蒲忠慧林琳郭莉娟代娟袁亚曾献春成都医学院检验医学院四川成都610500

为提高学生的综合素质,适应快速发展的食品微生物检验行业和不断变化的食品微生物检验标准,我校开展了以岗位胜任力为导向的“食品微生物学检验”课程改革,从课程目标、课程内容、教学方法和考核方式4个方面开展教学改革,除了培养学生... 详细信息

为提高学生的综合素质,适应快速发展的食品微生物检验行业和不断变化的食品微生物检验标准,我校开展了以岗位胜任力为导向的“食品微生物学检验”课程改革,从课程目标、课程内容、教学方法和考核方式4个方面开展教学改革,除了培养学生获得以专业知识和技能为主的显性胜任力外,还注重发展和提升学生的自主学习能力、解决实际问题能力,以及实事求是、吃苦耐劳等隐性胜任力。通过3年的教学实践,证实基于岗位胜任力的“食品微生物学检验”教学改革可以有效提高学生专业素养、综合素质和岗位胜任力,为食品质量与安全专业教学改革提供借鉴。

关键词：食品微生物检验岗位胜任力课程目标教学方法考核方式

2020年绵竹市中老年超重肥胖人群体成分与代谢性指标的相关性

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卫生研究 2023年第1期52卷 152-156页

作者：林嘉玲蒲芳芳李晶晶肖蕾冯晨廖欣怡石磊胡雯曾献春成都医学院检验医学院成都610500 四川大学华西医院临床营养科成都610041 绵竹市人民医院营养科德阳618200

目的分析绵竹市中老年超重肥胖人群人体成分与代谢性指标的相关性。方法于2020年6—9月采用方便抽样的方式抽取4992例绵竹中老年居民,其中男性占32%,女性占68%;年龄(57.58±8.19)岁;城市占47.2%,农村占52.8%,进行问卷调查、人体成分... 详细信息

目的分析绵竹市中老年超重肥胖人群人体成分与代谢性指标的相关性。方法于2020年6—9月采用方便抽样的方式抽取4992例绵竹中老年居民,其中男性占32%,女性占68%;年龄(57.58±8.19)岁;城市占47.2%,农村占52.8%,进行问卷调查、人体成分检测及实验室检测,收集其基本信息、人体成分结果和代谢性指标结果,进行斯皮尔曼相关性分析。结果调查人群超重肥胖率为44.07%。超重肥胖组体成分表明,男性骨骼肌质量指数(skeletal muscle mass index, SMI)、骨骼肌质量(skeletal muscle mass, SMM)、瘦组织质量(soft lean mass, SLM)、腰围、臀围均高于女性,体脂百分比(percentage body fat, PBF)、内脏脂肪面积(visceral fat area, VFA)低于女性(P<0.05)。超重肥胖组代谢性指标显示,男性丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase, ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase, AST)、甘油三酯(triglyceride, TG)、血糖(glucose, GLU)和血尿酸(uric acid, UA)均高于女性,低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterol, LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、总胆固醇(total cholesterol, TC)低于女性(P<0.05)。超重肥胖人群体成分与代谢性指标相关分析表明,男性SMI、SMM、SLM、BMI、PBF、VFA、腰围、臀围均与TG呈正相关,BMI、PBF、VFA、腰围、臀围与GLU、UA呈正相关;女性的BMI、PBF、VFA、腰围、臀围与ALT、GLU、UA呈正相关,SMI、SMM、SLM与LDL-C、TC呈负相关。结论绵竹市中老年超重肥胖人群体成分结果与代谢性指标具有相关性。

关键词：中老年超重肥胖人体成分代谢性指标相关性

番茄、胡萝卜乳酸菌发酵饮料的研制及其发酵液对免疫功能的影响

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番茄、胡萝卜乳酸菌发酵饮料的研制及其发酵液对免疫功能的影响

作者：曾献春新疆医科大学

学位级别：硕士

目的开发研制新疆地产番茄、胡萝卜混合汁乳酸菌发酵饮料,并探讨番茄、胡萝卜混合汁乳酸菌发酵液对免疫力低下小鼠免疫功能的影响。方法 (1) 以优质番茄酱和胡萝卜浓缩汁为原料,用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为菌种,采用四因素三水平... 详细信息

目的开发研制新疆地产番茄、胡萝卜混合汁乳酸菌发酵饮料,并探讨番茄、胡萝卜混合汁乳酸菌发酵液对免疫力低下小鼠免疫功能的影响。方法 (1) 以优质番茄酱和胡萝卜浓缩汁为原料,用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌为菌种,采用四因素三水平正交实验,确定中间种子扩大液、发酵液及发酵饮料口感稳定性的最佳工艺配方。(2) 以番茄、胡萝卜汁发酵液为受试物,以免疫力低下小鼠为研究对象。研究发酵液对小鼠的外周血白细胞数,脾、胸腺指数,巨噬细胞吞噬功能,脾脏T淋巴细胞转化功能,IL-2,IL-4,抗体分泌功能,血清溶血素(HC50) 等免疫指标的影响。结果 (1) 用保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌按1:1比例作为菌种;种子扩大液的最佳配方:番茄、胡萝卜混合汁配比3:7,2%葡萄糖,4%脱脂乳,3%接种量:发酵液最佳配方:番茄、胡萝卜混合汁配比3:7,发酵温度41℃,发酵时间24小时,接种量3%:发酵饮料调配最佳配方:在发酵原液中添加蔗糖5%,柠檬酸0. 02%,耐酸羧甲基纤维素钠(CMC-Na)0. 2%,黄原胶0. 03%。(2) 番茄、胡萝卜发酵液对免疫力低下小鼠免疫功能的影响。发酵液高、中剂量组对小鼠巨噬细胞吞噬功能有明显的促进作用(p0. 05) 。结论番茄、胡萝卜发酵液对免疫力低下小鼠免疫功能可能有一定的增强作用。

关键词：番茄胡萝卜乳酸菌发酵免疫功能

短期抗生素暴露对氧化偶氮甲烷诱导小鼠结直肠癌前病变相关指征变化的影响

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中国抗生素杂志 2023年第4期48卷 458-465页

作者：林嘉玲何夏梦蒲芳芳蒙婷商正云胡雯曾献春成都医学院检验医学院成都610500 四川大学华西医院成都610041 四川大学华西公共卫生学院成都610041

目的探讨短期抗生素暴露对氧化偶氮甲烷(Azoxymethane,AOM)诱导小鼠结直肠癌前病变相关指征变化的影响。方法40只3~4周龄SPF级雄性ICR小鼠随机分为4组(10只/组):对照组(Control组)、AOM干预组(AOM组)、抗生素+AOM干预组(Antibiotics+Azo... 详细信息

目的探讨短期抗生素暴露对氧化偶氮甲烷(Azoxymethane,AOM)诱导小鼠结直肠癌前病变相关指征变化的影响。方法40只3~4周龄SPF级雄性ICR小鼠随机分为4组(10只/组):对照组(Control组)、AOM干预组(AOM组)、抗生素+AOM干预组(Antibiotics+Azoxymethane,AbxAOM组)以及抗生素组(Antibiotics,Abx组)。AbxAOM组和Abx组灌胃抗生素溶液(氨苄西林100 mg/kg+新霉素100 mg/kg+甲硝唑100 mg/kg+万古霉素50 mg/kg+两性霉素B 1 mg/kg),Control组和AOM组灌胃等体积纯水,2次/天,连续14 d。灌胃结束后,AOM组和AbxAOM组腹腔注射AOM溶液(10 mg/kg·bw),Control组和Abx组腹腔注射相应体积的无菌0.9%NaCl溶液,1次/周,连续4周。HE染色观察小鼠结直肠组织病理学改变;RT-qPCR法检测结直肠组织中VCAM-1、ICAM-1、Ki-67、IL-1β、IL-6、TNF-α、VEGF-A、TLR4、MyD88、NF-κB p65及COX-2的mRNA表达水平;免疫组化法观察结直肠组织中Ki-67、NF-κB p65蛋白表达。结果与Control组相比,AOM组小鼠结肠病理组织学评分显著升高(P<0.01),IL-6、TLR4、NF-κB p65及COX-2的mRNA表达显著升高(P<0.05)。与AOM组比较,AbxAOM组异常隐窝灶(Aberrant crypt foci,ACF)数量增多(P<0.05),ICAM-1、IL-1β、NF-κB p65的mRNA表达显著升高(P<0.05)。结论AOM处理可导致结肠病理损伤及ACF形成,可能与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路的激活有关。抗生素暴露在短期内有加剧AOM所致结肠损伤和TLR4/MyD88/NF-κB信号通路进一步激活的趋势,但此变化趋势还需在长期实验基础上进一步探讨。

关键词：结直肠癌抗生素氧化偶氮甲烷

煤炭污染区土壤中苯并(a)芘降解菌的分离鉴定

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应用与环境生物学报 2015年第6期21卷 1049-1054页

作者：费莹莹曾献春杜为军新疆师范大学生命科学学院乌鲁木齐830054 成都医学院检验医学院成都610500 新疆师范大学化学与化工学院乌鲁木齐830054

苯并(a)芘是石油、煤炭开采区生态环境中具有代表性的有机污染物,利用新疆煤炭开采区本土微生物资源有效降解苯并(a)芘,对开采区环境治理具有一定的应用价值.采集新疆煤炭开采区受污染土壤,经苯并(a)芘(50 mg/L)为唯一碳源胁迫培养5代,... 详细信息

苯并(a)芘是石油、煤炭开采区生态环境中具有代表性的有机污染物,利用新疆煤炭开采区本土微生物资源有效降解苯并(a)芘,对开采区环境治理具有一定的应用价值.采集新疆煤炭开采区受污染土壤,经苯并(a)芘(50 mg/L)为唯一碳源胁迫培养5代,分离筛选出11株降解苯并(a)芘的菌株,通过分子生物学方法确定其分类地位,采用高效液相色谱法(HPLC)检测菌株对苯并(a)芘的降解能力.结果显示:其中8株菌归属为苍白杆菌属(Ochrobactrum sp.),其它3株菌分别为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、污水菌属(Aquamicrobium sp.)和芽孢杆菌属(Geobacillus sp.).获得的11株降解菌以苯并(a)芘为唯一碳源胁迫培养20 d后,降解率可以达到56.1%-82.5%,其中MB-2(Ochrobactrum sp.)和MB-9(Ochrobactrum sp.)对苯并(a)芘的降解率高达82.5%和80.3%.本研究表明,新疆煤矿污染区土壤中蕴含能有效降解苯并(a)芘的微生物,其优势菌种为苍白杆菌属,从而丰富了干旱、寒冷环境中降解有机污染物苯并(a)芘的微生物资源.

关键词：煤炭污染苯并(a)芘微生物降解苍白杆菌属