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基于高通量测序和纯培养技术解析海南东寨港红树植物老鼠簕根际放线菌多样性及其潜在的功能

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热带作物学报 2024年第7期45卷 1498-1510页

作者：刘顺卿何小稳吴金燕易国辉陈芊芊谢欣宜隋金蕾海南医学院科学实验中心海南海口571199 海南医学院基础医学与生命科学学院海南海口571199

根际是土壤-植物根系-微生物进行物质交换的活跃地带。根际放线菌是根系放线菌的重要组成部分,是生物活性物质的主要来源之一。本研究从海南东寨港红树林自然保护区采集了5份红树植物老鼠簕根际土壤样品,采用高通量测序和传统纯培养相... 详细信息

根际是土壤-植物根系-微生物进行物质交换的活跃地带。根际放线菌是根系放线菌的重要组成部分,是生物活性物质的主要来源之一。本研究从海南东寨港红树林自然保护区采集了5份红树植物老鼠簕根际土壤样品,采用高通量测序和传统纯培养相结合的策略探究样品中根际放线菌的多样性和产生生物活性物质的潜力。利用Illumina Novaseq6000测序平台对老鼠簕根际样品细菌的16SrRNA基因的V3~V4区域进行测序与分析,结果显示:(1)老鼠簕根际细菌共注释到32个门(包括25个有效鉴定的门),其中优势门是变形菌门;α多样性分析表明老鼠簕根际细菌群落多样性非常丰富;(2)对放线菌门的微生物群落进行分析,注释到33个有效鉴定的属、4个暂定的属和28个未培养的新放线菌属,KEGG功能预测分析显示老鼠簕根际放线菌主要参与次级代谢产物的生物合成。同时,利用传统纯培养方法分离放线菌,经形态特征分群和排重,通过PCR扩增、测序并比对16SrRNA基因序列后进行放线菌多样性分析,利用琼脂扩散法筛选抑菌活性,通过基于PCR的基因筛选技术检测代表菌株可能存在的PKS-Ⅰ、PKS-Ⅱ和NRPS抗生素生物合成基因,结果显示:(1)共得到4个属的33株放线菌代表菌株,其中链霉菌属为优势菌属,有2个属未被高通量测序分析结果注释到;(2)代表菌株的NRPS和PKS-Ⅱ基因阳性率很高(90%以上),24.24%根际放线菌具有抗1种及以上指示菌的活性。本研究利用高通量测序和纯培养方法得出东寨港红树植物老鼠簕的根际放线菌多样性非常丰富,并具有较好的合成次生代谢产物的潜力,因此,该研究结果可为具有生物活性化合物的筛选提供丰富的菌种资源,同时也为后续新药的开发提供重要参考依据。

关键词：老鼠簕根际放线菌多样性高通量测序纯培养

某医院急诊科住院患者口腔酵母菌分离鉴定及耐药性分析

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现代预防医学 2018年第10期45卷 1911-1915页

作者：吴金燕易国辉周利民何小稳王丽丽郭虹海南医学院科学实验中心云南大学生物资源保护与利用重点实验室

目的了解急诊科住院患者口腔酵母菌的种类分布情况及其药物敏感性,为临床预防真菌感染及合理用药提供依据。方法用常规棉拭子法采集2015-2016年海南省人民医院急诊科352例住院患者口腔黏膜标本进行真菌分离培养、科玛嘉显色及ITS鉴定,... 详细信息

目的了解急诊科住院患者口腔酵母菌的种类分布情况及其药物敏感性,为临床预防真菌感染及合理用药提供依据。方法用常规棉拭子法采集2015-2016年海南省人民医院急诊科352例住院患者口腔黏膜标本进行真菌分离培养、科玛嘉显色及ITS鉴定,分析不同疾病、年龄段患者酵母菌的检出情况,并进行体外两性霉素B、氟康唑、酮康唑、伊曲康唑及氟胞嘧啶纸片法药敏测定。结果 352例住院患者口腔标本中,241例(68.8%)口腔携带酵母菌,其中8例患者携带2种以上菌株,60岁以上患者分离率显著高于60岁以下患者(P<0.05);共分离到10种酵母菌共250株,包括白假丝酵母菌134株,光滑假丝酵母菌61株,热带假丝酵母菌28株,克柔假丝酵母菌13株,其他14株。体外5种抗真菌药物敏感性分析发现,两性霉素B的耐药率为2.0%,氟康唑的耐药率为20.4%,伊曲康唑的耐药率为19.6%,酮康唑的耐药率为11.6%,氟胞嘧啶的耐药率为8.4%。结论急诊科住院患者口腔酵母分离率高,且对临床常见的5种抗真菌药物存在不同的耐药率,尤其是唑类药物存在较高的耐药率。

关键词：口腔酵母菌假丝酵母抗真菌药物耐药性

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临床婴幼儿鹅口疮患病因素分析

临床婴幼儿鹅口疮患病因素分析

番木瓜籽挥发油纳米结构脂质载体的制备及抗假丝酵母菌活性研究

第七届生命科学联合学术大会

作者：黄宪希朱燕燕易国辉周利民郭虹海南医学院科学实验中心

目的通过对临床婴幼儿鹅口疮病例的综合分析,了解该病的发病相关因素,以提高对本病的认识、预防和治疗。方法顾性分析2012年1月至2014年11月在海南省人民医院因支气管肺炎住院治疗的108例鹅口疮患儿的住院病例资料,总结其流行病学特征... 详细信息

目的通过对临床婴幼儿鹅口疮病例的综合分析,了解该病的发病相关因素,以提高对本病的认识、预防和治疗。方法顾性分析2012年1月至2014年11月在海南省人民医院因支气管肺炎住院治疗的108例鹅口疮患儿的住院病例资料,总结其流行病学特征、易患因素、临床表现、辅助检查、治疗及预后。结果108例患儿中,男女比例大约为:3.1:1,患儿最小29d,最大13个月,病例数以1个月左右组最多,2个月到8个月之间病例数基本无差别,具有随着婴幼儿月龄的增加,病例数逐渐降低的趋势;108例中患儿中有过既望病史的占57.4%。75.9%的患儿就诊前使用过抗生素;100%都患有支气管肺炎,是入院主要病因;37%并发有房间隔缺损;15.7%患有不同程度的贫血或营养不良;少数患儿患有其他疾病;鹅口疮的确诊以口腔粘膜病变为准;治疗用药:98.1%患儿在治疗过程中都使用了抗生素,其中52.8%患儿使用一种抗生素;47.2%患儿联合使用两种或两种以上的抗生素;抗真菌用药全部使用制霉菌素。呼吸系统疾病与鹅口疮发病高度相关,先心病、贫血、营养不良、抗菌素的使用等均可影响患儿的免疫系统发育,继发医源性感染。结论婴幼儿鹅口疮的发病与多种因素相关,其中医源性感染是不可忽视的因素,规范的临床婴幼儿护理对该病的预防至关重要。

关键词：婴幼儿鹅口疮抗生素病史用药

来源： cnki会议评论

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热带作物学报 2023年第7期44卷 1478-1487页

作者：姚凯马寅正易国辉王元晓周霞臧旭刘禹棋汪桐何小稳海南医学院科学实验中心海南海口571199 海南医学院药学院海南海口571199 海南医学院公共卫生与全健康国际学院海南海口571199 海南省热带心血管病研究重点实验室海南海口571199

番木瓜(Carica papaya Linn.)属十字花目番木瓜科,广泛分布于热带、亚热带地区。课题组前期研究发现,番木瓜籽挥发油的主成分为异硫氰酸苄酯(BITC),含量高达99%,具有天然、无污染、纯度高等特点,且对多种假丝酵母菌均具有明显的抑制作... 详细信息

番木瓜(Carica papaya Linn.)属十字花目番木瓜科,广泛分布于热带、亚热带地区。课题组前期研究发现,番木瓜籽挥发油的主成分为异硫氰酸苄酯(BITC),含量高达99%,具有天然、无污染、纯度高等特点,且对多种假丝酵母菌均具有明显的抑制作用。但由于BITC水溶性差、易挥发、易降解等缺点,限制了其应用。本研究采用熔融乳化超声法制备异硫氰酸苄酯纳米结构脂质载体(BITC-NLC),并进行形态、粒径及Zeta电位、包封率、载药量等方面的表征及其抗假丝酵母菌活性研究,旨在提高BITC的稳定性和抑菌效果。在单因素试验基础上通过正交试验设计,优化纳米结构脂质载体(NLC)的制备工艺和BITC-NLC的处方组成,得到最佳制备工艺:初乳搅拌20 min,超声分散15 min(振幅80%);最佳处方组成:单硬脂酸甘油酯50 mg,辛癸酸三甘油酯50 mg,聚醚F188400 mg,大豆卵磷脂400 mg,BITC100 mg,蒸馏水20 mL。采用透射电子显微镜观察形态,纳米粒度及Zeta电位测定仪测定粒径及Zeta电位,高效液相色谱法测定包封率和载药量。最终制备得到的BITC-NLC呈类球形,平均粒径为79.13 nm,Zeta电位为–21.77 mV,包封率为91.52%。初步稳定性试验结果显示,BITC-NLC在25℃下贮存30 d的稳定性良好。采用微量稀释法测得制剂对供试白假丝酵母菌(Candida albicans)和热带假丝酵母菌(***)的最低抑菌浓度(MIC)为8~32μg/mL,比原料药BITC的抑菌效果好,且对耐药菌株也具有抑菌效果。综上,本研究制备的番木瓜籽挥发油新剂型BITC-NLC粒径小,稳定性好,包封率高,对假丝酵母菌抑制作用强,为大量存在且多被丢弃的番木瓜籽的合理开发和综合应用提供依据。

关键词：番木瓜籽挥发油异硫氰酸苄酯纳米结构脂质载体假丝酵母菌

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海外市场建筑工业化技术适用性评价体系研究

建筑经济 2024年第S01期45卷 733-737页

作者：许程光易国辉姜田甜何俊彪中国港湾工程有限责任公司北京100027 国住人居工程顾问有限公司北京100044

采用文献研究、专家咨询及问卷调研等研究方法,构建包含4个一级指标、20个二级指标的海外市场建筑工业化技术适用性评价指标体系,采用层次分析法确定了各级指标的权重系数,并建立各指标的评价标准,最后通过实例测算,运用该评价体系计算... 详细信息

采用文献研究、专家咨询及问卷调研等研究方法,构建包含4个一级指标、20个二级指标的海外市场建筑工业化技术适用性评价指标体系,采用层次分析法确定了各级指标的权重系数,并建立各指标的评价标准,最后通过实例测算,运用该评价体系计算案例项目所应用的工业化技术的适应性。

关键词：海外市场建筑工业化技术适用性评价

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481名大学生对粪类圆线虫畏惧情况的调查

中国校医 2019年第2期33卷 89-91页

作者：李笑易国辉周利民范志刚海南医学院病原生物学教研室海南海口571199 海南医学院科学实验中心

目的调查接受粪类圆线虫宣传的大学生对粪类圆线虫的畏惧情况。方法采用自制的大学生对粪类圆线虫畏惧情况的问卷对640名大学生进行调查分析。结果有效问卷481份,大学生的畏惧率为58.41%。女大学生的畏惧率为64.96%,高于男大学生的46.1... 详细信息

目的调查接受粪类圆线虫宣传的大学生对粪类圆线虫的畏惧情况。方法采用自制的大学生对粪类圆线虫畏惧情况的问卷对640名大学生进行调查分析。结果有效问卷481份,大学生的畏惧率为58.41%。女大学生的畏惧率为64.96%,高于男大学生的46.11%,差异有统计学意义(χ~2=17.576,P0.05)。结论通过本次宣传,部分大学生已经对粪类圆线虫及其危害有一定的认识。根据大学生对粪类圆线虫畏惧情况可以推测其在之后的生活中未必会做好相关防护,有必要进一步加强宣传教育。

关键词：大学生粪类圆线虫恐惧健康知识

低压立式水冷甲醇合成塔在20kt/a甲醇装置上的应用总结

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化肥工业 2009年第1期36卷 13-16页

作者：周传华赵金龙姚泽龙易国辉杭州林达化工技术工程有限公司 310012 四川隆昌隆桥化工有限公司 642153

简要介绍了低压立式水冷甲醇合成塔开车及初步运行情况。实际运行结果表明,该甲醇合成塔壳体与内件设计为分体结构,催化剂装御方便,具有操作简单、移热能力强、床层温度分布均匀、反应热利用率高、塔阻力小、运行稳定等特点。

关键词：立式水冷甲醇合成塔应用总结

木瓜籽挥发油的提取、分析及抗假丝酵母菌活性的初步研究

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木瓜籽挥发油的提取、分析及抗假丝酵母菌活性的初步研究

第七届生命科学联合学术大会

作者：何小稳周丽娟易国辉吴金燕周利民郭虹海南医学院科学实验中心

目的研究木瓜籽挥发油的成分和抗假丝酵母菌活性。方法采用水蒸气蒸馏法提取木瓜籽挥发油,通过气相色谱-质谱分析法(GC/MS)分析挥发油的主要成分;再通过纸片法探索其是否具有抑制白假丝酵母菌(Candida albicans,Ca)、热带假丝酵母菌(Can... 详细信息

目的研究木瓜籽挥发油的成分和抗假丝酵母菌活性。方法采用水蒸气蒸馏法提取木瓜籽挥发油,通过气相色谱-质谱分析法(GC/MS)分析挥发油的主要成分;再通过纸片法探索其是否具有抑制白假丝酵母菌(Candida albicans,Ca)、热带假丝酵母菌(Candida tropicalis,Ct)的活性。结果木瓜籽的平均得油率为0.17%;挥发油中共分离和鉴定出化学成分3种,其主要成分是异硫氰酸苄酯(C8H7NS),含量占挥发油成分的99.78%。两种假丝酵母菌抑菌对浓度为10.0mg/m L的木瓜籽油均表现为极度敏感,对5.0 mg/m L的木瓜籽油表现为高度敏感或中度敏感,对2.5 mg/m L的木瓜籽油则表现为低度敏感。结论木瓜籽挥发油对两种假丝酵母菌均具有一定的抑菌活性,为进一步开发其抗真菌药用价值提供实验依据。

关键词：木瓜籽挥发油水蒸气蒸馏法 GC/MS 假丝酵母菌纸片法

来源： cnki会议评论

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甘蓝枯萎病抗性鉴定方法的初步研究

甘蓝枯萎病抗性鉴定方法的初步研究