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噬菌体作为载体传递CRISPR系统的应用研究进展

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中国抗生素杂志 2024年

作者：陈曦文远汐阚飙樊粉霞中国疾病预防控制中心传染病预防控制所山东大学公共卫生学院

噬菌体作为能够裂解细菌的病毒，是地球上数量最多、种类最丰富的生物实体。噬菌体研究曾推进生物学和分子生物学许多领域的发展。基于目前因抗生素过度使用和滥用引发细菌耐药，导致威胁人群健康的全球卫生问题，作为潜在疗法的噬菌体... 详细信息

噬菌体作为能够裂解细菌的病毒，是地球上数量最多、种类最丰富的生物实体。噬菌体研究曾推进生物学和分子生物学许多领域的发展。基于目前因抗生素过度使用和滥用引发细菌耐药，导致威胁人群健康的全球卫生问题，作为潜在疗法的噬菌体再次引起重视。噬菌体治疗有其优越性，也存在一定的局限性。利用基因工程改造和合成生物学技术，把CRISPR系统与噬菌体基因组整合到一起，让噬菌体作为传递载体，最终形成噬菌体精准靶向特定病原菌和CRISPR精准靶向特定基因的双重靶向清除策略。本文介绍噬菌体与CRISPR序列的重组整合的相关改造策略及应用研究报道，同时也讨论了噬菌体作为传递载体的优缺点，对于噬菌体-CRISPR的应用进行了展望。

关键词：温和性噬菌体烈性噬菌体裂解改造 CRISPR-Cas 靶向治疗

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基于丝素蛋白材料的多功能改性研究

基于丝素蛋白材料的多功能改性研究

作者：文仲远武汉纺织大学

学位级别：硕士

基于噬菌体核酸检测霍乱弧菌的TaqMan-qPCR方法的建立

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中国生物工程杂志 2024年第8期44卷 97-104页

作者：陈曦闫梅英文远汐阚飙樊粉霞中国疾病预防控制中心传染病预防控制所山东大学公共卫生学院

目的：建立一种基于噬菌体特异基因检测霍乱弧菌的TaqMan-qPCR方法。方法：基于VP1噬菌体的特异性基因gp46,建立TaqMan-qPCR方法，根据VP1潜伏期为50～60 min,爆发周期持续110～120 min,确定TaqMan-qPCR体系检测时间点。比对分析基于gp4... 详细信息

目的：建立一种基于噬菌体特异基因检测霍乱弧菌的TaqMan-qPCR方法。方法：基于VP1噬菌体的特异性基因gp46,建立TaqMan-qPCR方法，根据VP1潜伏期为50～60 min,爆发周期持续110～120 min,确定TaqMan-qPCR体系检测时间点。比对分析基于gp46与基于霍乱弧菌毒力基因ctxB建立的两种TaqMan-qPCR方法。结果：基于VP1噬菌体gp46成功建立TaqMan-qPCR反应，扩增效率接近93%,Ct值与样本中噬菌体浓度的相关系数高达0.998。TaqMan-qPCR和琼脂双层噬菌斑计数两种方法结果一致性很高，偏差低于2.45%。基于噬菌体gp46基因比基于毒力基因ctxB建立的TaqMan-qPCR方法的LB模拟样本灵敏度提高10倍，粪便及环境水体模拟样本灵敏度可提高100倍。结论：成功建立快速、高灵敏度和高特异性的TaqMan-qPCR方法，可实现在几小时内对含有霍乱弧菌疑似样本进行快速检测。

关键词：噬菌体 TaqMan-qPCR DNA检测灵敏度霍乱弧菌

新型阻尼耗能式泥石流格栅坝的工作机制及理论计算方法

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水利学报 2024年第6期55卷 711-722页

作者：王永胜郭文祥张晓研潘远文王彦兵兰州理工大学土木工程学院甘肃兰州730050 兰州理工大学西部土木工程防灾减灾教育部工程研究中心甘肃兰州730050 甘肃省交通工程建设监理有限公司甘肃兰州730050

为解决泥石流冲击作用下传统格栅坝容易损坏问题,提出新型阻尼耗能式泥石流格栅坝,阐述了其结构组成及工作原理。利用力法、变形协调方程与温克尔弹性地基梁理论,建立了新结构耗能与复位阶段各构件的力学计算模型,给出了立柱埋深的计算... 详细信息

为解决泥石流冲击作用下传统格栅坝容易损坏问题,提出新型阻尼耗能式泥石流格栅坝,阐述了其结构组成及工作原理。利用力法、变形协调方程与温克尔弹性地基梁理论,建立了新结构耗能与复位阶段各构件的力学计算模型,给出了立柱埋深的计算方法。运用有限元软件分析新结构的力学特性,并将理论计算与模拟值进行了对比。结果表明:(1)新型阻尼耗能式泥石流格栅坝基于柔性消能理念,通过迎流面格栅与阻尼耗能撑杆协同变形来消耗泥石流冲击能量,与传统泥石流格栅坝相比,大大提高了抗冲击性能;(2)新型阻尼耗能式泥石流格栅坝受力分耗能与复位两阶段,耗能阶段变形协调使最边跨横梁在滑移支座端内力急剧突变,设计时应着重考虑;复位阶段顶层竖杆与横梁内力大于其他层,应重点验算;(3)理论计算与有限元模拟的各构件内力变化趋势基本吻合,验证了本文计算方法的可靠性,结果可为新型阻尼耗能式泥石流格栅坝的推广应用提供理论依据。

关键词：泥石流新型阻尼耗能式泥石流格栅坝工作机制内力计算协同受力

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基于室内模型试验的深层堆积层古滑坡破坏机理

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兰州大学学报（自然科学版） 2024年第2期60卷 235-242,247页

作者：窦晓东杨校辉强远文王信甘肃省地质环境监测院兰州730050 兰州理工大学土木工程学院兰州730050

采用物理模型试验、理论分析及有限元数值模拟等,研究滑坡的变形破坏机理.结果表明,50 mm/h降雨条件下滑坡下部首先出现裂缝,随着降雨持续,裂缝向滑坡中部延伸,前缘局部垮塌,滑坡后缘地形坡度转折处相继出现横向裂缝;滑坡前部降雨入渗... 详细信息

采用物理模型试验、理论分析及有限元数值模拟等,研究滑坡的变形破坏机理.结果表明,50 mm/h降雨条件下滑坡下部首先出现裂缝,随着降雨持续,裂缝向滑坡中部延伸,前缘局部垮塌,滑坡后缘地形坡度转折处相继出现横向裂缝;滑坡前部降雨入渗速度为5.56×10^(-4) cm/s,滑坡下部裂缝形成后,降雨沿裂缝优势入渗浸润、软化滑带,导致滑带土抗剪强度降低,滑坡发生牵引式破坏;降雨2 h后,滑坡上部滑带土压力开始持续减小,表明滑带土抗剪强度降低至滑坡滑动的临界值,导致滑坡上部沿滑带处发生整体推移式蠕滑变形.滑坡破坏机理为初始降雨,坡表入渗较慢,主要以孔隙流入渗为主,由于裂缝的存在导致降雨迅速入渗,在碎石土与炭质板岩碎屑接触面形成饱水带,增加滑坡内部孔隙水压,降低滑带土炭质板岩抗剪强度,导致抗滑力减小而复活.

关键词：深层堆积层古滑坡降雨室内模型试验破坏机理江顶崖

人工智能背景下会计资料勘验的困境及对策研究

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会计师 2024年第9期 19-21页

作者：苗文远山西警察学院侦查系

在人工智能背景下,经济犯罪案件的侦办发生了本质转变。在会计资料勘验上,从传统的账本侦查转变为依托电子平台开展智慧会计资料勘验工作。介绍智慧侦查和会计资料勘验理论,阐述人工智能背景下会计资料勘验的意义及影响,分析人工智能背... 详细信息

在人工智能背景下,经济犯罪案件的侦办发生了本质转变。在会计资料勘验上,从传统的账本侦查转变为依托电子平台开展智慧会计资料勘验工作。介绍智慧侦查和会计资料勘验理论,阐述人工智能背景下会计资料勘验的意义及影响,分析人工智能背景下会计资料勘验面临的困境,并提出相应的优化对策,以进一步深化智慧侦查在经侦领域的研究。

关键词：会计资料勘验人工智能智慧侦查

山西红色文化融入青年学警忠诚教育路径研究——以经济犯罪侦查专业为例

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中共太原市委党校学报 2024年第4期 43-45页

作者：苗文远山西警察学院山西太原030401

丰富多彩的山西红色文化为青年学警忠诚教育提供了丰富的教育资源。将山西红色文化深度融入青年学警忠诚教育培养体系中,有助于加强对青年学警的政治引领,树立正确忠诚观;有助于传承红色文化,坚定青年学警忠诚的历史自信;有助于坚定以... 详细信息

丰富多彩的山西红色文化为青年学警忠诚教育提供了丰富的教育资源。将山西红色文化深度融入青年学警忠诚教育培养体系中,有助于加强对青年学警的政治引领,树立正确忠诚观;有助于传承红色文化,坚定青年学警忠诚的历史自信;有助于坚定以人民为中心的服务理念,系好忠诚的第一颗扣子;有助于树立法治思维,为执法公正夯实忠诚之基。公安院校可进一步丰富“两个课堂”教育教学内容,深度挖掘山西红色文化中的忠诚元素丰富忠诚价值体系,开展多维度忠诚教育评价体系提升忠诚教育实效性,丰富忠诚教育培养模式渗透青年学警全过程,推动青年学警“山西红色文化+忠诚教育”的教育模式时度效、知信行统一,为全面提升新质公安战斗力,奋力推进公安工作现代化夯实基础。

关键词：山西红色文化青年学警忠诚教育

家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶NbHK对家蚕基因表达及相关通路的调控作用

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微生物学报 2024年第4期64卷 1203-1218页

作者：文远邹子筠汪春霞于滨周泽扬李田西南大学资源昆虫高效养殖与利用全国重点实验室重庆400715 西南大学微孢子虫感染与防控重庆市重点实验室重庆400715 重庆师范大学生命科学学院重庆400047

【目的】微孢子虫是一种营专性细胞内寄生的微生物,它可以感染几乎所有动物种类,包括人类和重要的经济动物。本研究对家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶(Nosema bombycis hexokinase,NbHK)在家蚕胚胎细胞中表达特征、亚细胞定位、调控作用... 详细信息

【目的】微孢子虫是一种营专性细胞内寄生的微生物,它可以感染几乎所有动物种类,包括人类和重要的经济动物。本研究对家蚕微粒子虫分泌蛋白己糖激酶(Nosema bombycis hexokinase,NbHK)在家蚕胚胎细胞中表达特征、亚细胞定位、调控作用和宿主互作蛋白质进行了系统分析,为阐明该蛋白在侵染中的作用与机理提供参考。【方法】利用原核表达蛋白免疫小鼠,制备NbHK的多克隆抗体,并利用Western blotting和间接免疫荧光法分析家蚕微粒子虫在感染的家蚕胚胎细胞(Bombyx mori embryo,BmE)中的表达和定位;通过过表达和RNA干扰实验,分析NbHK对病原增殖的作用;利用RNA-seq分析NbHK调控的家蚕基因表达和通路;利用生物素-链霉亲和素系统和质谱技术,从NbHK::APEX2转基因细胞中分离鉴定NbHK的互作蛋白。【结果】在感染家蚕微粒子虫的BmE中,NbHK持续上调表达,主要被定位于宿主细胞核内。过表达NbHK显著促进了病原增殖,而敲低NbHK则明显抑制了病原增殖,说明在NbHK感染过程中发挥关键作用。利用RNA-seq分析鉴定了94个差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),其中58个基因上调,36个基因下调。DEGs的富集分析显示,细胞寿命和内质网蛋白加工通路受到显著激活,而线粒体自噬途径受到明显抑制。互作蛋白鉴定分析发现,NbHK可能与宿主细胞核内的核蛋白易位启动子区(nucleoprotein translocated promoter region,NTPR)等蛋白间存在相互作用。【结论】NbHK主要被定位至家蚕细胞核中,调控家蚕细胞寿命等多个重要通路的基因表达,以利于病原增殖。本研究为深入解析NbHK在感染过程中的功能及其调控机理提供了新的参考。

关键词：微孢子虫家蚕微粒子虫己糖激酶分泌蛋白功能

基于Nvivo质性分析的中学地理项目式学习实践——以“暹岗村人文地理考察”为例

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中学地理教学参考 2024年第19期 40-44页

作者：刘媛文远金广州市黄埔区教育研究院广东广州广东省广州市第二中学广东广州

利用Nvivo 12plus软件对项目式学习实践困境的文献进行了文本分析,经过三级编码,总结了项目式学习实践困境的3个维度,即学习环节面临的困境、实施人员面临的困境和其他困境,并在此基础上,以“暹岗村人文地理考察”为例,对中学地理项目... 详细信息

利用Nvivo 12plus软件对项目式学习实践困境的文献进行了文本分析,经过三级编码,总结了项目式学习实践困境的3个维度,即学习环节面临的困境、实施人员面临的困境和其他困境,并在此基础上,以“暹岗村人文地理考察”为例,对中学地理项目式学习提出了针对性的对策和建议,以促进中学地理项目式学习的不断完善。

关键词：项目式学习文本分析实践困境 Nvivo 12plus