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安菲博肽生物活性测定

医药导报 2024年第3期43卷 431-435页

作者：戴向荣梁杰蒋涛李刚许雷鸣兆科药业(合肥)有限公司合肥230088 安徽省食品药品检验研究院合肥230051

目的筛选并建立安菲博肽生物学活性测定方法。方法通过对比光学比浊法、电阻法、连续血小板计数法,确定以连续血小板计数法检测安菲博肽生物活性,并对检测方法进行验证。结果以光学比浊法、电阻法、连续血小板计数法检测安菲博肽生物活... 详细信息

目的筛选并建立安菲博肽生物学活性测定方法。方法通过对比光学比浊法、电阻法、连续血小板计数法,确定以连续血小板计数法检测安菲博肽生物活性,并对检测方法进行验证。结果以光学比浊法、电阻法、连续血小板计数法检测安菲博肽生物活性的RSD分别为10.3%、14.0%和3.6%;6份平行供试品的重复性RSD为11.0%;不同人员12份供试品的中间精密度RSD为9.8%;安菲博肽在0.3~0.5 U范围内,抑制率呈线性关系,相关系数>0.990,测定3批安菲博肽的活性,抑制率49.9%~53.6%,活性良好。结论所建立的连续血小板计数法检测安菲博肽生物活性,操作简便,专属性、准确度和精密度符合生物制品活性测定的要求,可用于安菲博肽活性的质量控制。

关键词：安菲博肽光学比浊法全血电阻法连续血小板计数法生物活性

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肉桂油抑制黄曲霉作用研究

肉桂油抑制黄曲霉作用研究

作者：戴向荣安徽农业大学

学位级别：硕士

因微生物生长而引起食品变质是事关国民生命安全和健康的大事。我国是一个人口大国,食品需求量巨大,食品的贮藏、防霉保鲜是食品工业所面临的重大课题。目前,我国食品贮藏中广泛使用的脱氧保鲜剂成本贵,时效短,即使使用毒性小、污染小... 详细信息

因微生物生长而引起食品变质是事关国民生命安全和健康的大事。我国是一个人口大国,食品需求量巨大,食品的贮藏、防霉保鲜是食品工业所面临的重大课题。目前,我国食品贮藏中广泛使用的脱氧保鲜剂成本贵,时效短,即使使用毒性小、污染小的高效而广谱的新一代化学防腐剂也仅起抑制而无脱毒作用,食品安全卫生任务艰巨,形势严峻。鉴于化学防腐剂使用条件所限、长期使用会产生生物抗药性和累积性毒害等缺点,目前人们已将目光转向从生物中寻找天然抗菌活性成分(如香精油)作为防腐剂并已成回归自然的时尚。天然防腐剂副作用小,时效长且快。但国内外对香精油研究仍限于局部抑菌的静态水平,而对抗菌防腐剂潜在相关抑菌机制的研究则尚少报道。本课题来自农业部“抗黄曲霉天然香精复合油及其制剂”项目(农计函[2004]514号),文中选用樟科香辛料类作物肉桂的提取物(即肉桂油)为材料,多角度观察其对引起食品变质危害很大的黄曲霉抑制效果,探讨并初步阐明该天然香精油抑制黄曲霉的过程及机理。 1.水蒸汽蒸馏、NaSO脱水提取香精油:采用水蒸汽蒸馏法将肉桂粉碎成10～60nm颗粒于280℃下从肉桂中提取肉桂油。提取过程中,初始至1h内出油渐快,2h时馏出80%挥发油;最后用NaSO脱水获精油,得率为总样重的1.8%。经GC-MS分析表明所提肉桂油主要成分为肉桂醛和肉桂酸。 2.与同类香精油比较,肉桂油抑菌效果快而显著:采用不同扩散方式研究肉桂油抑制黄曲霉作用,表明同等浓度下该香精油抑制效果优于几种常见香精油。液体接触方式的MIC为2.0μl/mL,气体扩散方式MIC为1.5μl/mL。 3.显微和亚显微观察黄曲霉细胞结构变化:采用光学显微镜、扫描电镜、透射电镜观察肉桂油对黄曲霉孢子和菌丝体影响,发现实验组黄曲霉细胞的孢子结构发生畸变,菌丝体结构出现不规则变化,细胞壁纹理结构紊乱,甚至消失,细胞质膜模糊,细胞质内形成一些不规则小体。 4.与对照组相比,探索肉桂油抗菌动态过程:经肉桂油处理的黄曲霉孢子生长过程绘制成培养15d内的生长曲线,发现对照组从孢子萌发、菌落大小、颜色等特征产生了明显的变化;实验组未进入对数生长期,即直接进入衰老萎缩。 5.采用气化扩散抗菌,研究该香精油对菌物细胞壁结构组成的影响:发现该油作用下黄曲霉细胞壁组成中蛋白质和糖醛酸的含量减少20%左右,而氨基糖的含量减少56%;无机磷的含量减少33%。HPLC分析表明,中性糖中半乳糖占中性糖比例相比对照组降低46%,而氨基糖中半乳糖胺比对照组降低了88%,均说明肉桂油能通过破坏黄曲霉细胞壁结构,改变了对周围物质的选择性吸收。 6.肉桂油对细胞膜的流动性、通透性等功能的影响:与对照组相比,发现该香精油作用下黄曲霉细胞膜Ca、K离子渗漏明显;细胞内外液的MDA含量均呈逐渐增加之势;膜总脂质、磷脂、胆固醇含量产生明显变化,总脂质含量下降44%,磷脂含量则增加了2.5倍,胆固醇含量降低20%。因此,肉桂油抑制黄曲霉生长的靶点应为细胞膜。 7.通过影响黄曲霉呼吸代谢途径中关键酶活性,抑制菌物代谢进程:与对照组相比,发现实验组黄曲霉细胞呼吸中糖酵解、三羧酸循环、磷酸戊糖途径均受抑制,其中以对三羧酸循环中苹果酸脱氢酶和琥珀酸脱氢酶活力分别较对照组下降了28.3%和28.9%,削弱了细胞生存中能量的补偿。综上所述,文中从细胞、亚细胞和酶水平的不同层次上初步探讨了肉桂油对黄曲霉的抑制作用,肉桂油抑制黄曲霉生长的机理不是单一因素作用,而是通过其进入细胞后,对细胞壁、细胞膜以及细胞代谢整体协同作用而起到抑制的效果,为肉桂油这种天然香精油应用于食品防腐初步提供了理论依据。文中创新点:初步构建了对肉桂油这种天然香精油的快速蒸馏脱水精制途径,对其抑制引起食品变质并强烈致毒的黄曲霉生长机理进行了多方位的研究。

关键词：肉桂油黄曲霉防腐剂机理

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发展农村生物质能的设想与建议

世界农业 2006年第7期 52-55页

作者：戴向荣蒋立科罗曼安徽农业大学生命科学学院暨南大学生物医学工程系

随着经济的发展和人类生活水平的提高，人类面临的问题越来越多。能源短缺和环境污染问题已经成为制约人类社会发展的主要瓶颈。根据国际能源机构的统计，如果按照现在的发展趋势，人类对能源的使用若不加以限制，那么人类使用的主要能... 详细信息

随着经济的发展和人类生活水平的提高，人类面临的问题越来越多。能源短缺和环境污染问题已经成为制约人类社会发展的主要瓶颈。根据国际能源机构的统计，如果按照现在的发展趋势，人类对能源的使用若不加以限制，那么人类使用的主要能源（原油、天然气和煤炭）的地球储量供人类开采的年限分别只有40年、50年和240年。同时，由使用传统化石资源引起的一系列环境问题，如二氧化碳的大量排放，

关键词：生物质能人类社会发展农村环境污染问题能源短缺国际能源机构生活水平发展趋势环境问题化石资源

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柠檬醛胁迫环境下黄曲霉线粒体的畸变

微生物学报 2006年第6期46卷 1011-1013页

作者：罗曼蒋立科戴向荣暨南大学生物医学工程研究所广州510632 安徽农业大学生命科学学院合肥230036

通过对黄曲霉细胞受柠檬醛损伤后线粒体形态畸变的透射电镜观察,发现柠檬醛所产生胁迫环境影响线粒体DNA复制系统,产生增生变异的巨型线粒体而与之应答。丙二醛法测定黄曲霉细胞内自由基,结果表明药物进入细胞后还通过诱发自由基使线粒... 详细信息

通过对黄曲霉细胞受柠檬醛损伤后线粒体形态畸变的透射电镜观察,发现柠檬醛所产生胁迫环境影响线粒体DNA复制系统,产生增生变异的巨型线粒体而与之应答。丙二醛法测定黄曲霉细胞内自由基,结果表明药物进入细胞后还通过诱发自由基使线粒体损伤,致使氧化还原系统及细胞能量代谢途径受到影响。

关键词：柠檬醛黄曲霉线粒体畸变

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肉桂醛抑制黄曲霉机理初探

食品科学 2008年第1期29卷 36-40页

作者：戴向荣蒋立科罗曼安徽农业大学生命科学学院安徽合肥230036 暨南大学生命科学技术学院生物医学工程系广东广州510632

肉桂油为新发现的天然抗菌防腐香精油,其有效成分为肉桂醛。本研究采用肉桂醛抑制黄曲霉生长过程,并通过测定不同抑制方式下孢子提取液光密度、丙二醛值的变化,初步揭示该醛抑菌防腐的生物化学机理,为其在食品上的抗菌防腐应用提供科学... 详细信息

肉桂油为新发现的天然抗菌防腐香精油,其有效成分为肉桂醛。本研究采用肉桂醛抑制黄曲霉生长过程,并通过测定不同抑制方式下孢子提取液光密度、丙二醛值的变化,初步揭示该醛抑菌防腐的生物化学机理,为其在食品上的抗菌防腐应用提供科学依据。结果发现肉桂醛的不同浓度、抑制方式毒化黄曲霉细胞孢子提取液的OD260nm、OD280nm值都增大,丙二醛(MDA)值也均上升,表明肉桂醛能通过损伤黄曲霉细胞质膜而进入细胞,使胞内大分子空间结构改变并且有序的新陈代谢被破坏,导致抑制黄曲霉的生长。

关键词：肉桂醛黄曲霉 OD 丙二醛