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人脑胶质瘤组织中c－myc基因的扩增和重排及异常表达

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第四军医大学学报 1995年第1期16卷 4-5页

作者：惠宏襄金明王成济张剑宁樊英如西京医院神经外科

目的：癌基因结构及表达异常与肿瘤的发生发展有着密切的关系，作者在于考察胶质瘤中ｃ－ｍｙｃ基因的状况．方法：采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交和ＲＮＡ打点杂交的方法以正常人脑组织为对照观察了７例人脑胶质瘤组织中ｃ－ｍｙｃ... 详细信息

目的：癌基因结构及表达异常与肿瘤的发生发展有着密切的关系，作者在于考察胶质瘤中ｃ－ｍｙｃ基因的状况．方法：采用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交和ＲＮＡ打点杂交的方法以正常人脑组织为对照观察了７例人脑胶质瘤组织中ｃ－ｍｙｃ基因在ＤＮＡ和ＲＮＡ水平的改变．结果：７例人脑胶质瘤标本中ｃ－ｍｙｃ基因有不同程度的扩增和重排，其ｃ－ｍｙｃｍＲＮＡ表达幅度是正常组织的１．６～４．０倍，结论：在胶质瘤中有ｃ－ｍｙｃ基因的异常．

关键词：脑肿瘤胶质瘤 c-myc 基因扩增基因异常

抗凋亡基因Bcl-2在人卵巢癌表达的免疫组化检测

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第四军医大学学报 1997年第2期18卷 142-145页

作者：严瑞兰王剑波惠宏襄辛晓燕郑维国第四军医大学西京医院妇产科第四军医大学病理学教研室

目的：了解Ｂｃｌ－２在卵巢癌中的表达情况，以探讨Ｂｃｌ－２在卵巢癌发生中的作用及其在临床诊断和预后方面的意义．方法：以ＳＡＢＣ免疫组化技术检测了５０例临床标本中Ｂｃｌ－２的表达状况．结果：１４／３０例卵巢癌呈阳性表达... 详细信息

目的：了解Ｂｃｌ－２在卵巢癌中的表达情况，以探讨Ｂｃｌ－２在卵巢癌发生中的作用及其在临床诊断和预后方面的意义．方法：以ＳＡＢＣ免疫组化技术检测了５０例临床标本中Ｂｃｌ－２的表达状况．结果：１４／３０例卵巢癌呈阳性表达（４６．７％），全部属上皮性卵巢癌；４／１０例交界性卵巢肿瘤及２／１０例良性卵巢肿瘤有Ｂｃｌ－２表达．Ｂｃｌ－２的阳性率与卵巢肿瘤的良恶性及其临床分期未见显著相关性．结论：Ｂｃｌ－２在上皮性卵巢癌中有高表达，Ｂｃｌ－２表达与卵巢肿瘤的良恶性和临床分期无关．

关键词：卵巢肿瘤抗凋亡基因免疫组化

c-erbB-2特异性核酶基因体外转录载体的构建与快速鉴定

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第四军医大学学报 1998年第1期19卷 25-27页

作者：毕锋惠宏襄张学庸金明王成济樊代明第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所

目的：构建ｃｅｒｂＢ２特异性的核酶（ｒｉｂｏｚｙｍｅ）基因及其靶基因的体外转录载体并探讨快速简便的筛选方法．方法：在原设计的核酶ＲＺ１基因的３′端加上新的限制性酶切位点ＥｃｏＲＶ，合成修饰后的ＲＺ１基因并将之定向... 详细信息

目的：构建ｃｅｒｂＢ２特异性的核酶（ｒｉｂｏｚｙｍｅ）基因及其靶基因的体外转录载体并探讨快速简便的筛选方法．方法：在原设计的核酶ＲＺ１基因的３′端加上新的限制性酶切位点ＥｃｏＲＶ，合成修饰后的ＲＺ１基因并将之定向克隆于载体ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－），经用ＥｃｏＲＶ正筛选和ＸｂａＩ负筛选快速鉴定出重组子并测序鉴定．结果：核酶ＲＺ１基因合成后与ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－）连接，经用正负筛选法很快鉴定出了重组子并命名为ｐＧ３ＺＲＺ１，ＤＮＡ测序证实合成的核酶基因序列正确并已被准确克隆入ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－）的ＢａｍＨＩ和ＳａｌＩ位点．１６ｋｂ的ＲＺ１的靶基因也被克隆于ｐＧＥＭ３Ｚｆ（－）．结论：合成带有与表达载体多克隆位点相匹配的粘末端核酶基因可容易地克隆于载体．正负筛选法能简便、快速、准确地鉴定出含有核酶基因的重组子．

关键词：体外转录载体肿瘤核酶 c-erbB-2基因构建

转化生长因子β_1基因转染对胃癌细胞SGC7901体外增殖及凋亡的作用

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第四军医大学学报 1998年第2期19卷 204-204页

作者：周新民张学庸胡家露惠宏襄李福洋第四军医大学西京医院全军消化疾病研究所西安710033 第四军医大学生物化学教研室西安710033

转化生长因子β_1(TGF-β_1)是一个较强的细胞生长负调节因子,它可通过自分泌及旁分泌来调节哺乳动物组织细胞的活动,是参与细胞周期调控的重要因子之一.丧失了对TGF-β_1的生长抑制作用,是一些肿瘤发生及发展的关键因素.一些研究表明,T... 详细信息

转化生长因子β_1(TGF-β_1)是一个较强的细胞生长负调节因子,它可通过自分泌及旁分泌来调节哺乳动物组织细胞的活动,是参与细胞周期调控的重要因子之一.丧失了对TGF-β_1的生长抑制作用,是一些肿瘤发生及发展的关键因素.一些研究表明,TGF-β_1对肺癌,大肠癌等体外增殖有明显的抑制作用.本研究的目的是通过基因转染的手段,将人TGF-β_1基因导入胃癌细胞系SGC7901,试图改变胃癌细胞中TGF-β_1的表达,以观察TGF-β_1对胃癌细胞体外增殖及凋亡的作用.

关键词：胃肿瘤转化生长因子β 基因转染细胞凋亡

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血管内皮生长因子在上皮性卵巢癌中的表达

第四军医大学学报 1999年第4期20卷 291-293页

作者：严瑞兰惠宏襄辛晓燕王剑波王健第四军医大学

目的：探讨上皮性卵巢癌中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达及意义．方法：以ＳＡＢＣ免疫组化方法检测了３７例上皮性卵巢癌中ＶＥＧＦ表达．结果：上皮性卵巢癌、交界性卵巢肿瘤及良性肿瘤中ＶＥＧＦ表达率分别为７２．９７％，７... 详细信息

目的：探讨上皮性卵巢癌中血管内皮生长因子（ＶＥＧＦ）的表达及意义．方法：以ＳＡＢＣ免疫组化方法检测了３７例上皮性卵巢癌中ＶＥＧＦ表达．结果：上皮性卵巢癌、交界性卵巢肿瘤及良性肿瘤中ＶＥＧＦ表达率分别为７２．９７％，７５．０％及３８．４６％，恶性肿瘤及交界性肿瘤中ＶＥＧＦ表达率较良性肿瘤明显增高（Ｐ＜０．０５），且前两者的ＶＥＧＦ强阳性表达率也较良性肿瘤明显增高（Ｐ＜０．０５）．上皮性卵巢癌中ＶＥＧＦ表达率与淋巴结转移密切相关（Ｐ＜０．０５）．恶性肿瘤不同病理分级及临床分期ＶＥＧＦ表达率无明显差异（Ｐ＞０．０５）．结论：ＶＥＧＦ在与上皮性卵巢癌有关的血管形成中可能起着重要作用．

关键词：卵巢癌上皮性卵巢癌 VEGF 免疫组织化学

可诱导型真核表达载体的构建及其表达效率的测定

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第四军医大学学报 1999年第4期20卷 280-283页

作者：张杰彭玮丹王多宁王刚惠宏襄王成济第四军医大学基础部

目的：利用ＭＴ－Ｉ启动子的Ｚｎ２＋诱导表达特性，构建含多克隆位点的可诱导型真核表达载体ｐＭＤＮＡ３－ｎｅｏ，并用荧光素酶报告基因（ｌｕｃ）检测其表达效率．方法：用分子克隆方法构建载体，并将ｌｕｃ基因克隆到其多克隆位点... 详细信息

目的：利用ＭＴ－Ｉ启动子的Ｚｎ２＋诱导表达特性，构建含多克隆位点的可诱导型真核表达载体ｐＭＤＮＡ３－ｎｅｏ，并用荧光素酶报告基因（ｌｕｃ）检测其表达效率．方法：用分子克隆方法构建载体，并将ｌｕｃ基因克隆到其多克隆位点内，转染胃癌细胞ＳＧＣ７９０１，Ｇ４１８筛选出稳定克隆，分别在不同浓度ＺｎＳＯ４及不同诱导时间下进行诱导表达和测定，并检测不同单细胞株的表达效率．结果：采用１６０μｍｏｌ／ＬＺｎＳＯ４诱导２４ｈ可达到最高表达量，比基准值高２～７倍（Ｐ＜０．０１）．结论：真核表达载体ｐＭＤＮＡ３－ｎｅｏ具有良好的诱导表达能力．

关键词：基因载体基因治疗表达效率构建

人碱性成纤维细胞生长因子基因真核表达质粒的构建

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第四军医大学学报 1999年第5期20卷 399-403页

作者：胡大海陈璧汤朝武苏映军惠宏襄阎小君贾赤宇徐明达第四军医大学

目的：构建人碱性成纤维细胞生长因子（ｈｂＦＧＦ）基因真核表达质粒，为深入研究ｈｂＦＧＦ在组织修复中的分子调节机制及临床应用提供物质基础．方法：含ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ的ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒于大肠杆菌ＪＭ１０９内扩增... 详细信息

目的：构建人碱性成纤维细胞生长因子（ｈｂＦＧＦ）基因真核表达质粒，为深入研究ｈｂＦＧＦ在组织修复中的分子调节机制及临床应用提供物质基础．方法：含ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ的ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒于大肠杆菌ＪＭ１０９内扩增；提取及纯化ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒；经ＤＮＡ序列分析所含ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ；限制性酶切ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ片段，连接酶连接到真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｎｅｏ内，克隆出真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｈｂＦＧＦ．结果：提取及纯化的ｐＵＣ１８－ｈｂＦＧＦ质粒含有大小正确的ｈｂＦＧＦｃＤＮＡ碱基片段，其碱基序列为编码目的基因的正确序列；凝胶电泳结果证明已将此片段正确地克隆到ｐｃＤＮＡ３－ｈｂＦＧＦ内．结论：成功地构建了ｈｂＦＧＦ基因的真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ｈｂＦＧＦ．

关键词： hbFGF 真核表达质粒构建