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Shh、Gli1基因在多发性骨髓瘤中表达及临床意义

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Shh、Gli1基因在多发性骨髓瘤中表达及临床意义

作者：徐又海皖南医学院

学位级别：硕士

目的:探讨Hedgehog(Hh)信号转导通路Shh及Gli1基因在多发性骨髓瘤(MM)发病机制中的可能作用及临床意义。Hh信号通路异常被认为在肿瘤发生、发展、浸润与转移以及药物治疗耐药等方面具有重要的作用。脊椎动物中有3种Hh基因,分别为Sonic H... 详细信息

目的:探讨Hedgehog(Hh)信号转导通路Shh及Gli1基因在多发性骨髓瘤(MM)发病机制中的可能作用及临床意义。Hh信号通路异常被认为在肿瘤发生、发展、浸润与转移以及药物治疗耐药等方面具有重要的作用。脊椎动物中有3种Hh基因,分别为Sonic Hedgehog(Shh)、Desert Hedgehog(Dhh)、India Hedgehog(Ihh),分别编码Shh、Dhh、Ihh蛋白,其中Shh高度保守,是目前Hh基因中研究最为广泛的基因。Shh主要存在于胚胎期的神经系统、骨、皮肤、外生殖器、四肢、造血细胞及血管内皮细胞等组织,不仅参与神经系统中线形成与维持、骨形态的发育、诱导造血细胞和血管内皮细胞的形成,而且还参与调节不对称的身体左右的发育形成,并调节许多器官,包括眼睛、外生殖器、毛发、胰腺、骨、肺、下丘脑、牙齿、脊髓等的形态发生。Gli为Hh信号通路核转录因子,定位在细胞核及胞浆中,能将转导信号传送至细胞核内。在人类存在的3种Gli核转录基因Gli1、Gli2、Gli3,研究表明3种Gli蛋白在羧基末端均发现有激活转录的区域,在Gli2和Gli3的氨基端还发现抑制转录区域,所以Gli1主要起到激活转录的作用,而Gli2、Gli3既有激活转录又有抑制转录的功能。Gli1是Hh信号转导通路转录激动子,其表达水平增强会导致Hh信号转导通路活化,可直接反映Hh信号转导通路的活性状态,因而Gli1被认为是Hh信号转导通路的可靠标志。本课题采用RT-PCR和Western Blot两种方法检测Shh及Gli1在MM患者及正常对照组中的表达情况并探讨Shh及Gli1在MM发病机制中的可能作用,为MM的诊疗提供新的思路及方法并寻找相关的理论依据。方法:1.选择2012.12-2014.05来皖南医学院弋矶山医院血液内科就诊的30例初诊MM患者各2ml骨髓液标本用做试验组(其中Ig G型20例、Ig A型8例、轻链型2例;D-S分期:Ⅰ期2例、Ⅱ期3例、Ⅲ期25例;A组23例、B组7例;ISS分期:Ⅰ期1例、Ⅱ期5例、Ⅲ期24例);选择2012.07-2014.05我院20例初诊的非恶性血液病患者(排除肿瘤、感染、免疫系统疾病等影响试验结果疾病)骨髓液作为正常对照组。2.抽取骨髓液2ml,EDTA-2K抗凝,利用淋巴细胞分离液分离出单个核细胞,制成单个核细胞悬液,保存于-80℃冰箱待用。3.提取单个核细胞中的总RNA,用分光光度计A260/A280的比值来分析RNA样品纯度,确保比值在1.8-2.0之间,并逆转录成c DNA。4.选择GAPDH为内参照基因,Shh及Gli1核酸引物由DNASTAR软件设计,由上海生工生物公司合成,用于Shh和Gli1 m RNA的PCR扩增。5.利用1.5%琼脂糖凝胶电泳和Bio-Image Analysis System分析Shh和Gli1 m RNA的表达和差异。6.采用Western blot检测Shh和Gli1蛋白表达情况。结果:Shh m RNA与Gli1 m RNA在初诊MM患者中高表达,与对照组相比较差异有显著性;Shh m RNA与Gli1 m RNA表达量在D-S分期及ISS分期中显示:Ⅲ期明显高于Ⅰ期或Ⅱ期,但A组和B组中无明显差异;且Shh、Gil1与多项临床指标有关。结论:Shh及Gli1在MM中高表达,与对照组相比差异有显著性,且与多项临床指标及分期有关,经分析可能与MM的发生、发展有一定的关系,是MM靶向治疗的新关注点。

关键词： Shh Gli1 多发性骨髓瘤 RT-PCR Western Blot

伊马替尼治疗尼洛替尼不耐受的慢性髓系白血病

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中国实验血液学杂志 2018年第2期26卷 407-411页

作者：齐晶徐又海何合胜皖南医学院弋矶山医院血液内科安徽芜湖241000

目的:探讨慢性髓系白血病(慢性期)个体化治疗方案的选择。方法:对1例尼洛替尼不耐受的慢性髓系白血病(慢性期)患者的临床资料及治疗过程进行分析。结果:患者在完善相关检查确诊为慢性髓系白血病(慢性期)后给予尼洛替尼治疗。治疗3个月... 详细信息

目的:探讨慢性髓系白血病(慢性期)个体化治疗方案的选择。方法:对1例尼洛替尼不耐受的慢性髓系白血病(慢性期)患者的临床资料及治疗过程进行分析。结果:患者在完善相关检查确诊为慢性髓系白血病(慢性期)后给予尼洛替尼治疗。治疗3个月时评估病情,患者虽然获得了主要分子学缓解(MMR)和完全细胞遗传学缓解(CCy R),但在治疗的过程中发生3-4级的肝毒性,经过药物的减量及对症治疗,患者在3次停药后换用伊马替尼治疗,7个月时评估病情达MMR及CCy R。目前患者无任何不良反应,耐受良好。结论:伊马替尼可作为慢性髓系白血病(慢性期)患者对第二代TKI治疗不耐受时的一种治疗方法,其不良事件发生率低且疗效确切。

关键词：慢性粒细胞白血病尼洛替尼伊马替尼肝毒性

Shh、Gli1基因在多发性骨髓瘤中的表达及临床意义

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中国临床药理学与治疗学 2015年第3期50卷 309-313页

作者：徐又海汪兴洪皖南医学院弋矶山医院血液内科

目的:探讨Hedgehog-Gli信号通路Shh及Gli1基因在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及意义。方法:采用RT-PCR方法检测30例MM患者及20例非恶性血液病患者中Shh及Gli1mRNA的表达,并分析二者与相关临床指标的关系。结果:Shh mRNA与Gli1 mRNA在初诊M... 详细信息

目的:探讨Hedgehog-Gli信号通路Shh及Gli1基因在多发性骨髓瘤(MM)中的表达及意义。方法:采用RT-PCR方法检测30例MM患者及20例非恶性血液病患者中Shh及Gli1mRNA的表达,并分析二者与相关临床指标的关系。结果:Shh mRNA与Gli1 mRNA在初诊MM患者中高表达,与对照组比较差异具有统计学意义(P0.05)中差异无统计学意义。Shh与乳酸脱氢酶(LDH)和β2微球蛋白(β2MG)呈正相关,与白蛋白和血红蛋白(Hb)呈负相关;Gil1与LDH、钙离子、CRP和β2MG呈正相关,与白蛋白和Hb呈负相关;且Shh和Gil1间存在正相关。结论:Shh及Gli1与MM的发生、发展有一定的关系,可能是MM靶向治疗的新的关注点。

关键词： Hedgehog-Gli信号通路多发性骨髓瘤 Shh Gli1

皮肤结外NK/T细胞淋巴瘤5例临床特点分析

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临床皮肤科杂志 2018年第12期47卷 770-774页

作者：刘善浩徐又海杨玉琼何合胜皖南医学院附属弋矶山医院血液内科安徽芜湖241001

目的:探讨皮肤结外NK/T细胞淋巴瘤(cutaneous extranodal NK/T cell lymphoma, CNKTL)的临床特点,提高对CNKTL诊治和预后的认识。方法:回顾性分析5例CNKTL患者的临床资料,并分析其临床特点。结果:5例患者均以皮肤病变就诊,起病时多累及... 详细信息

目的:探讨皮肤结外NK/T细胞淋巴瘤(cutaneous extranodal NK/T cell lymphoma, CNKTL)的临床特点,提高对CNKTL诊治和预后的认识。方法:回顾性分析5例CNKTL患者的临床资料,并分析其临床特点。结果:5例患者均以皮肤病变就诊,起病时多累及四肢,下肢多见;其中3例以多发性丘疹和皮下结节为主要表现,2例以单一部位肿块和溃疡为主要表现。经组织病理诊断为CNKTL,免疫病理:神经细胞黏附分子(CD56)阳性、穿孔素(perforin)阳性、T细胞胞质内抗原(TIA)-1阳性、颗粒酶(Gran)B多数阳性。Ann Arbor分期:4例为Ⅳ期、1例为Ⅰ期;2例伴有高热,4例并发噬血细胞综合征(hemophagocytic syndrome, HPS)。5例患者均采用联合化疗,3例无效、2例达完全缓解(complete remission, CR),其中1例复发,1例行自体干细胞移植但死于Epstein Barr病毒(EBV)相关的HPS,最终5例患者全部死亡,病程3～27个月。结论:CNKTL以多部位侵犯为主,易并发HPS。

关键词：皮肤结外NK/T细胞淋巴瘤临床特点化疗

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原发性睾丸淋巴瘤九例并文献复习

白血病．淋巴瘤 2015年第12期24卷 750-752页

作者：齐晶张伟徐又海何合胜皖南医学院弋矶山医院血液内科安徽芜湖241001 皖南医学院弋矶山医院病理科

目的探讨原发性睾丸淋巴瘤的临床特点及最佳治疗方法。方法回顾性分析2002年10月至2013年10月收治的9例原发性睾丸淋巴瘤患者的临床及病理资料，并对其进行随访，探讨其临床特征及治疗效果。结果所有患者的首发症状均为无痛性睾丸肿大... 详细信息

目的探讨原发性睾丸淋巴瘤的临床特点及最佳治疗方法。方法回顾性分析2002年10月至2013年10月收治的9例原发性睾丸淋巴瘤患者的临床及病理资料，并对其进行随访，探讨其临床特征及治疗效果。结果所有患者的首发症状均为无痛性睾丸肿大，其中IE 期5例，ⅡE期4例。病理类型均为弥漫大B细胞淋巴瘤，所有患者均行病灶侧根治性睾丸切除术及高位精索结扎。术后7例行R±CHOP样方案化疗，其中2例辅以放疗。结论采取常规的R—CHOP样方案治疗原发性睾丸淋巴瘤疗效欠佳，包含高剂量甲氨蝶呤（HD—MTX）的化疗方案联合早期放疗可能有利于减少复发。

关键词：睾丸肿瘤淋巴瘤注射,脊髓放射疗法

在临床教学中注重专业学位型研究生科研思维的培养

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卫生职业教育 2018年第8期36卷 8-9页

作者：何合胜徐又海杨玉琼皖南医学院附属弋矶山医院安徽芜湖241000

临床医学专业学位型研究生的学历教育与住院医师规范化培训已并轨进行。目前专业学位型研究生教育中普遍存在忽视科研能力培养的问题。坚持在临床教学中培养专业学位型研究生的科研思维非常重要。通过临床实践中的具体事例探讨如何在临... 详细信息

临床医学专业学位型研究生的学历教育与住院医师规范化培训已并轨进行。目前专业学位型研究生教育中普遍存在忽视科研能力培养的问题。坚持在临床教学中培养专业学位型研究生的科研思维非常重要。通过临床实践中的具体事例探讨如何在临床教学中培养专业学位型研究生的科研思维,使其从临床实践中发现科学问题,用科研思维解决临床实践中存在的问题,促进临床与科研能力协同发展。

关键词：临床教学专业学位型研究生科研思维

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髓系肉瘤患者的临床特点分析

中国实验血液学杂志 2020年第5期28卷 1491-1495页

作者：何合胜苏贵平姚军萍刘善浩徐又海杨玉琼黄东平皖南医学院第一附属医院血液科安徽芜湖241000

目的:探讨髓系肉瘤(MS)患者的临床表现、诊断及治疗方法,以期提高对MS的认识。方法:对本院2012年6月-2020年1月就诊的15例髓系肉瘤患者的临床资料、实验室及病理学结果、治疗方案进行回顾性分析。结果:15例髓系肉瘤患者中,男性8例、女性... 详细信息

目的:探讨髓系肉瘤(MS)患者的临床表现、诊断及治疗方法,以期提高对MS的认识。方法:对本院2012年6月-2020年1月就诊的15例髓系肉瘤患者的临床资料、实验室及病理学结果、治疗方案进行回顾性分析。结果:15例髓系肉瘤患者中,男性8例、女性7例,中位年龄53(19-72)岁。孤立性MS患者4例,继发于其它血液肿瘤的MS患者11例;免疫组织化学结果显示,肿瘤细胞MPO(12/15)、CD68(3/6)、Lys(3/3)、CD34(6/14)、TdT(0/9)、CD43(13/13)、CD117(6/10)、CD15(7/10)、CD3(1/15)、CD20(0/15)均阳性。13例可随访的患者中,死亡7例,6例生存,中位生存时间16(1-88)个月。结论:髓系肉瘤患者少见于临床,往往多继发于急性髓系白血病(AML)、慢性髓系白血病(CML);孤立性MS容易被误诊为淋巴瘤。疗效评价应结合骨髓学及PET/CT等影像学进行综合评估,系统性化疗及造血干细胞移植是目前治疗该病的主要手段。

关键词：髓系肉瘤治疗髓系白血病临床病理