检索结果-南通市图书馆

HLA-A2肽四聚体的构建及其在乙、丙型肝炎中的初步应用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2004年第21期84卷 1818-1822页

作者：朴文花何豫席宏丽孙新婷张恒辉徐京航赵鸿许文燮李在琉王贵强延边大学医学院北京大学第一医院感染疾病科 100034

目的　分别构建乙型肝炎病毒 (HBV)和丙型肝炎病毒 (HCV)特异的HLA A2肽四聚体 ,为检测乙、丙型肝炎患者体内特异性的细胞毒T细胞 (CTL)提供直接、有效的方法 ,指导临床用药。方法　分别构建含有HLA A2 BSP(含有 15个可供识别生物素化... 详细信息

目的　分别构建乙型肝炎病毒 (HBV)和丙型肝炎病毒 (HCV)特异的HLA A2肽四聚体 ,为检测乙、丙型肝炎患者体内特异性的细胞毒T细胞 (CTL)提供直接、有效的方法 ,指导临床用药。方法　分别构建含有HLA A2 BSP(含有 15个可供识别生物素化的氨基酸位点 )和 β2微球蛋白(β 2m)基因的原核表达载体 ,并进行表达、复性、鉴定及纯化。再分别将HBV和HCV特异性短肽与HLA A2 BSP和 β 2m蛋白在体外进行耦合 ,该复合物经纯化浓缩后进行生物素化。生物素化的产物经纯化浓缩后形成单体 ,此单体再与藻红蛋白标记的链霉亲和素按一定比例耦合构建成四聚体 ,最后进行流式细胞仪检测。结果　获得了高效、稳定的pBV2 2 0 HLA A2 BSP和 pBV2 2 0 β 2m原核表达载体 ,表达量分别占菌体的 4 6 %和 2 6 %左右 ;纯度达 90 %以上。构建的四聚体可成功的检测急、慢性乙型和丙型肝炎患者中特异性的CTL ,急性HBV感染时CTL占 1 84 % ,慢性HBV感染时CTL占0 0 2 %～ 0 6 8% ,慢性HCV感染的CTL占 0 0 2～ 0 72 %。结论　高效、稳定的pBV2 2 0 HLA A2 BSP和 pBV2 2 0 β 2m原核表达载体大量的表达可用于构建各种肽特异性的四聚体复合物 ;在体外构建的MHC Ⅰ类分子四聚体 ,为特异性细胞毒T细胞的检测提供有效的工具。

关键词： HLA-A2 四聚体 CTL 丙型肝炎特异性体外 HCV 原核表达载体纯化复性

不同剂型苦参素体外抗2.2.15细胞乙型肝炎病毒的作用及其作用机理的研究

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

中国中西医结合杂志 2002年第S1期22卷 168-170页

作者：陆海英王勤环曾争于敏席宏丽张乃临公维波张国庆刘丹北京大学第一医院感染疾病科北京100034 中山医科大学达安基因诊断中心

目的:研究不同剂型苦参素(肌肉注射用、静脉滴注用及口服用苦参素)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用及其作用机理。方法:以 HBsAg、HBeAg 及细胞存活率为观察指标,综合评价不同剂型苦参素体外抗2.2.15细胞 HBV 效果,进一步用荧光定量 PCR... 详细信息

目的:研究不同剂型苦参素(肌肉注射用、静脉滴注用及口服用苦参素)体外抗乙型肝炎病毒(HBV)的作用及其作用机理。方法:以 HBsAg、HBeAg 及细胞存活率为观察指标,综合评价不同剂型苦参素体外抗2.2.15细胞 HBV 效果,进一步用荧光定量 PCR 方法测细胞内 HBV DNA、HBV RNA 及细胞上清HBV DNA 的拷贝数。结果:肌肉注射用苦参素的治疗指数(TI)>2,对 HBsAg 和 HBeAg 的 ID_(50)分别为2.5mg/ml 及3.2 mg/ml,CD_(50)为16.6 mg/ml,对细胞内、外 HBV DNA 及细胞内 HBV RNA 均有明显的剂量依赖型抑制作用(P<0.01)。结论:肌肉注射用苦参素有明显抗 HBV 作用,对 HBV 抑制位点可能在 HBVDNA 水平。

关键词： 2.2.15细胞定量 PCR 苦参素

北京地区汉族健康人HLA-A,B,C位点抗原频率及基因频率的分布

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

北京大学学报(医学版) 1986年第2期 99-102页

作者：斯崇文王勤环席宏丽北京医科大学第一医院传染病教研室

本文应用Bodmer萤光染色微量淋巴细胞毒法测定北京地区汉族健康人HLA-A,B,C位点抗原及基因频率。发现在北京地区汉族人中,HLA-B21并不罕见,主要为Bw 50亚型。并且首次检出国内尚未报告的B21新亚型,它的反应格局是只和HLA-B21和B6抗血清... 详细信息

本文应用Bodmer萤光染色微量淋巴细胞毒法测定北京地区汉族健康人HLA-A,B,C位点抗原及基因频率。发现在北京地区汉族人中,HLA-B21并不罕见,主要为Bw 50亚型。并且首次检出国内尚未报告的B21新亚型,它的反应格局是只和HLA-B21和B6抗血清反应,而不和B49及Bw50亚型血清反应。

关键词：抗原频率健康人 HLA-A,B,C 基因频率汉族民族北京

树突状细胞体外刺激对HBV特异性细胞毒T细胞影响的研究

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

中华医学杂志 2005年第17期85卷 1171-1176页

作者：张恒辉何豫赵鸿朴文花刘茂昌席宏丽于敏王贵强北京大学第一医院感染疾病科 100034

目的探讨通过聚肌胞体外作用树突状细胞后改善慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能,并在体外活化自身T细胞获得高频数HBV特异性细胞毒性T细胞(CTL)的方法。方法分离慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞,在粒巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)和白... 详细信息

目的探讨通过聚肌胞体外作用树突状细胞后改善慢性乙型肝炎患者树突状细胞功能,并在体外活化自身T细胞获得高频数HBV特异性细胞毒性T细胞(CTL)的方法。方法分离慢性乙型肝炎病人外周血单个核细胞,在粒巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)和白细胞介素4(IL4)的诱导下培养树突状细胞。培养的第7天加入聚肌胞刺激获得成熟树突状细胞,经HBVcore1827肽负载后与自身T淋巴细胞共培养,通过酶联斑点计数法(Elispot)及MHC肽四聚体法(Tetramer)比较病人T细胞未经自身树突状细胞刺激组、经HBVcore1827肽负载的自身树突状细胞刺激组、经聚肌胞促成熟的HBVcore1827肽负载的自身树突状细胞刺激组中HBV特异性的CTL的功能和频数。结果慢性乙型肝炎病人外周血单核细胞体外经GM CSF和IL4诱导可转化为树突状细胞,树突状细胞转化过程中聚肌胞的刺激可显著上调树突状细胞表面分子CD80、CD83的表达(P<0.01),促进树突状细胞的成熟。Elispot法检测分泌IFNγ的CTL的频数病人T细胞未经自身树突状细胞刺激组分泌频数为(9～28)/1×105T细胞,均值16;经HBVcore1827肽负载的自身树突状细胞刺激组频数为(30～67)/1×105T细胞,均值为46;经聚肌胞促成熟的HBVcore1827肽负载的自身树突状细胞刺激组频数为(59～130)/1×105T细胞,均值为98。三组数据?

关键词：特异性细胞毒T细胞影响的研究白细胞介素-4(IL-4) 自身树突状细胞体外刺激慢性乙型肝炎患者巨噬细胞集落刺激因子慢性乙型肝炎病 HBV特异性人外周血单个核细胞 Elispot法 Tetramer 外周血T淋巴细胞细胞毒性T细胞

IL-12(细胞毒淋巴细胞成熟因子)对人淋巴细胞增殖的调节作用

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

国际免疫学杂志 1992年第2期 107-107页

作者：席宏丽

IL-12是一种异二聚体细胞因子,它在诱导细胞毒效应细胞上与IL-2有协同作用。最初称之为细胞毒淋巴细胞成熟因子（CLMF）,它能刺激PHA 活化的淋巴细胞增殖。此文进一步证实了IL-12在调节静止的和活化的PBMC 的增生作用,用有丝分裂原（mit... 详细信息

IL-12是一种异二聚体细胞因子,它在诱导细胞毒效应细胞上与IL-2有协同作用。最初称之为细胞毒淋巴细胞成熟因子（CLMF）,它能刺激PHA 活化的淋巴细胞增殖。此文进一步证实了IL-12在调节静止的和活化的PBMC 的增生作用,用有丝分裂原（mitogen）或IL-2活化PBMC 作试验证明了IL-12是活化的T 细胞和NK 细胞的生长因子,它可使活化的CD;或CD;T 细胞增殖,且不依赖于IL-2。

关键词： IL-12 细胞增殖细胞毒毒素调节作用增殖反应成熟

在线全文

同方期刊数据库

学校读者我要写书评

暂无评论

甘草酸苷与乙型肝炎病毒复制关系的体外研究

甘草酸苷与乙型肝炎病毒复制关系的体外研究

苦参素对HBsAg转基因小鼠血清TH1/TH2型细胞因子水平的影响

中华医学会第十二次全国病毒性肝炎及肝病学术会议

作者：蔺小红席宏丽徐小元傅希肾北京大学第一医院

目的研究甘草酸苷在体外实验条件下与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系。方法以2．2．15细胞株为试验对象,定量检测2．2．15细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg。结果甘草酸苷能抑制 2．2．15细胞分泌HBsAg。结论甘草酸苷不引起HBV复制活跃,可...

目的研究甘草酸苷在体外实验条件下与乙型肝炎病毒(HBV)复制的关系。方法以2．2．15细胞株为试验对象,定量检测2．2．15细胞培养上清液中的HBsAg和HBeAg。结果甘草酸苷能抑制 2．2．15细胞分泌HBsAg。结论甘草酸苷不引起HBV复制活跃,可安全用于慢性病毒性乙型肝炎患者的保肝降酶治疗。

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

苦参素对HBsAg转基因小鼠血清TH1/TH2型细胞因子水平的影响

慢性乙型肝炎病毒感染产妇的胎儿脐带血树突状细胞的表型及功能

中华医学会第七次全国感染病学术会议

作者：董宇红席宏丽王勤环北京大学第一医院感染疾病科

目的:探讨苦参素对HBsAg转基因小鼠外周血T1/T2型细胞因子水平的影响.方法:HBsAg转基因小鼠42只,随机分成苦参素组和对照组,分别每天腹腔注射苦参素注射液200mg/kg和生理盐水0.2ml,共30天.用药结束后,检测外周血清细胞因子.结果:苦参素...

目的:探讨苦参素对HBsAg转基因小鼠外周血T1/T2型细胞因子水平的影响.方法:HBsAg转基因小鼠42只,随机分成苦参素组和对照组,分别每天腹腔注射苦参素注射液200mg/kg和生理盐水0.2ml,共30天.用药结束后,检测外周血清细胞因子.结果:苦参素组与对照组相比,血清IFN-γ、IL-2的水平均有升高,而IL-4、IL-10的水平则有降低,并至少有显著统计学意义(P分别为

关键词：

来源： cnki会议评论

在线全文

cnki会议

学校读者我要写书评

暂无评论

中华肝脏病杂志 2005年第6期13卷 417-420页

作者：张恒辉杨慧霞席宏丽何豫朴文花赵鸿于敏王贵强北京大学第一医院感染疾病科 100034 北京大学第一医院妇产科 100034

目的探讨孕妇慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染对其胎儿脐血的树突状细胞(DC)的表型和功能的影响,并与健康胎儿、健康成人及成人慢性HBV感染者进行对比研究。方法体外分离慢性HBV 感染产妇及健康产妇胎儿脐带血、健康成人及慢性乙型肝炎患者... 详细信息

目的探讨孕妇慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染对其胎儿脐血的树突状细胞(DC)的表型和功能的影响,并与健康胎儿、健康成人及成人慢性HBV感染者进行对比研究。方法体外分离慢性HBV 感染产妇及健康产妇胎儿脐带血、健康成人及慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞进行树突状细胞转化,行流式细胞术对其表型进行分析,通过交叉混合淋巴细胞培养和DC培养上清液白细胞介素(IL)-12检测来分析DC的功能。结果慢性HBV感染产妇脐血来源DC的CD 80、CD 83的表达显著低于健康胎儿组、健康成人组、成人慢性HBV感染组,CD14的表达则显著高于此三组,P值均健康成人DC-健康成人异体T淋巴细胞>健康脐血DC-异体健康脐血T淋巴细胞>健康脐血DC-健康成人T淋巴细胞>孕母HBV感染脐血DC-健康脐血T淋巴细胞>孕母HBV感染脐血DC-健康异体成人T淋巴细胞。结论慢性HBV感染产妇胎儿脐血DC的成熟和功能显著低于健康胎儿脐血DC、健康成人甚至慢性乙型肝炎患者外周血DC。

关键词：慢性乙型肝炎病毒感染树突状细胞胎儿脐带血表型慢性乙型肝炎患者乙型肝炎病毒(HBV) 慢性HBV感染者外周血单个核细胞人T淋巴细胞健康成人胎儿脐血混合淋巴细胞细胞增殖能力健康产妇流式细胞术白细胞介素

逆转录病毒介导双靶区反义RNA在转基因小鼠肝细胞中的表达及对HBV DNA复制的影响

在线全文

学校读者我要写书评

暂无评论

世界华人消化杂志 2006年第25期14卷 2551-2555页

作者：张政席宏丽公维波李文刚于敏曾争徐小元北京大学第一医院感染科北京市100034

目的:探讨逆转录病毒介导的乙型肝炎病毒(HBV)X,P单、双靶区的反义RNA在乙型肝炎转基因小鼠肝细胞中HBV复制的影响．方法:构建表达HBV X,P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,注入小鼠体内,第8周时取小鼠肝脏,提取肝组织总R... 详细信息

目的:探讨逆转录病毒介导的乙型肝炎病毒(HBV)X,P单、双靶区的反义RNA在乙型肝炎转基因小鼠肝细胞中HBV复制的影响．方法:构建表达HBV X,P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,注入小鼠体内,第8周时取小鼠肝脏,提取肝组织总RNA,进行逆转录,将逆转录后的cDNA用PCR扩增,琼脂凝胶电泳和DNA测序定性,荧光聚合酶链反应定量:提取肝组织基因组DNA,利用荧光聚合酶链反应定量测定HBV DNA含量.结果:经过PCR扩增,琼脂凝胶电泳和DNA测序定性,荧光聚合酶链反应定量等方法检测到小鼠肝脏内反义RNA得到高效表达;8 wk后,对HBV DNA(×105 copies／g)的作用:与对照组相比(7．24±1．62),空质粒组(9．49±3．34)及正义RNA组(6．52±1．53)之间无明显差异,单(2．60±1．13,2．83±1．67)、双靶区反义RNA组(3．24±0．45)与对照组之间有明显差异(P0．05)．结论:将脂质体包裹逆转录病毒载体(质粒)介导的单、双靶区乙肝病毒反义RNA经iv导入转基因小鼠细胞的方法可行;反义RNA对乙型肝炎病毒转基因小鼠有显著抗HBV复制作用;对转基因小鼠肝脏中HBV DNA的复制有明显的抑制作用,但单、双靶区反义RNA组间无明显差异．

关键词：乙型肝炎病毒反义RNA 转基因小鼠 HRV DNA