逆转录病毒介导双靶区反义RNA在转基因小鼠肝细胞中的表达及对HBV DNA复制的影响
Retrovirus-mediated expression of dual-target antisense RNA in liver cells of transgenic mice and its influence on replication of hepatitis B virus作者机构：北京大学第一医院感染科北京市100034
出 版 物：《世界华人消化杂志》 (World Chinese Journal of Digestology)
年 卷 期：2006年第14卷第25期
页 面：2551-2555页
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学]
基 金：国家自然科学基金资助项目 No.30271182~~
主 题：乙型肝炎病毒 反义RNA 转基因小鼠 HRV DNA
摘 要：目的:探讨逆转录病毒介导的乙型肝炎病毒(HBV)X,P单、双靶区的反义RNA在乙型肝炎转基因小鼠肝细胞中HBV复制的影响．方法:构建表达HBV X,P双靶区正、反义RNA的重组载体质粒,与脂质体混合,注入小鼠体内,第8周时取小鼠肝脏,提取肝组织总RNA,进行逆转录,将逆转录后的cDNA用PCR扩增,琼脂凝胶电泳和DNA测序定性,荧光聚合酶链反应定量:提取肝组织基因组DNA,利用荧光聚合酶链反应定量测定HBV DNA含量.结果:经过PCR扩增,琼脂凝胶电泳和DNA测序定性,荧光聚合酶链反应定量等方法检测到小鼠肝脏内反义RNA得到高效表达;8 wk后,对HBV DNA(×105 copies／g)的作用:与对照组相比(7．24±1．62),空质粒组(9．49±3．34)及正义RNA组(6．52±1．53)之间无明显差异,单(2．60±1．13,2．83±1．67)、双靶区反义RNA组(3．24±0．45)与对照组之间有明显差异(P0．05)．结论:将脂质体包裹逆转录病毒载体(质粒)介导的单、双靶区乙肝病毒反义RNA经iv导入转基因小鼠细胞的方法可行;反义RNA对乙型肝炎病毒转基因小鼠有显著抗HBV复制作用;对转基因小鼠肝脏中HBV DNA的复制有明显的抑制作用,但单、双靶区反义RNA组间无明显差异．
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