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结核分枝杆菌MT3286蛋白的分离纯化与活性分析

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结核分枝杆菌MT3286蛋白的分离纯化与活性分析

作者：孙培姣福建农林大学

学位级别：硕士

结核病是严重影响人类和动物健康的慢性消耗性传染病,结核分枝杆菌和牛分枝杆菌是引起结核病的主要病原菌。艾滋病的广泛流行、国家和个人对卫生保护和知识上的匮乏,使结核病成为世界卫生组织最重要的问题之一。随着耐药结核杆菌的出现... 详细信息

结核病是严重影响人类和动物健康的慢性消耗性传染病,结核分枝杆菌和牛分枝杆菌是引起结核病的主要病原菌。艾滋病的广泛流行、国家和个人对卫生保护和知识上的匮乏,使结核病成为世界卫生组织最重要的问题之一。随着耐药结核杆菌的出现,结核杆菌对绝大多数治疗结核病的一线药物产生了不同程度的耐药性,结核病在全球范围内有回升趋势。在1990-2000期间,有41.5%的发展中国家和25%的发达国家结核病疫情明显上升1,2,3。PDZ结构域是介导蛋白质/蛋白质之间相互作用的常见结构域之一,参与细胞信号传导、细胞极性、细胞迁移与入侵及免疫细胞识别等重要的是生物学过程。因此,研究含有PDZ结构域的蛋白有助于更好地了解结核杆菌的在体内的耐药和扩散机制,为新的疫苗和药物研发提供靶标。本课题研究的MT3286蛋白来自结核分枝杆菌CDC1551菌株,与H37Rv、BCG等菌株在基因水平上有100%的同源性。目前关于该蛋白的结构和功能均没有报道,本文根据基因和载体的特点,首先构建pET28a-mt3286重组载体,然后在大肠杆菌BL21(DE3)中大量表达融合蛋白。经过不断优化表达和纯化条件,获得了高纯度的目的蛋白,蛋白大小与预测大小基本吻合。采用Ni-NTA亲和层析和Superdex200凝胶层析等方法纯化目的蛋白,然后测定蛋白对胶原蛋白、透明质酸、硫酸软骨素、BSA及DNA、淀粉、麦芽糖、山梨醇等的作用。结果显示,MT3286与透明质酸、硫酸软骨素和胶原蛋白在39℃作用超过3h后,会有絮状沉淀生成。SDS-PAGE检测发现,沉淀的成分为MT3286和MT3286与胶原蛋白的复合物。本试验成功表达了结核杆菌的一个蛋白,并且发现该蛋白与结核杆菌粘附素(结合杆菌的一种特殊成分,它参与结核杆菌与宿主细胞和细胞外基质的黏附作用)有相似的功能,为进一步的结构和生物学功能的研究提供了依据。

关键词：结核分枝杆菌 MT3286 PDZ结构域蛋白纯化活性分析

PKR基因表达高效阻断Marc-145细胞系建立及其对PRRSV增殖的影响

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中国兽医学报 2022年第8期42卷 1535-1540页

作者：肖跃强杨慧于雪王文秀孙培姣魏凤唐娜沈志强山东省滨州畜牧兽医研究院山东滨州256600 山东绿都生物科技有限公司山东滨州256600

研究猪繁殖与呼吸障碍综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)在Marc-145细胞蛋白激酶R(interferon-induced,double-stranded RNA-activated kinase,PKR)下调表达状态下的感染特性。以Macr-145细胞PKR基因序列设计3个shRNA,并设阳性对照,合成后插入pSilencer^(TM)2.1-U6载体构建重组质粒,与Macr-145细胞PKR+EGFP标签融合表达的重组质粒共转染HEK293细胞,以筛选能下调表达PKR的shRNA,并将该shRNA重组质粒转染Marc-145细胞,潮霉素B抗性筛选并克隆纯化获得PKR下调表达的细胞系,感染重组病毒PRRSV XZ06a-EGFP,通过检测病毒结构蛋白M与EGFP表达、观察细胞病变等,研究此状态下感染特性。结果显示筛选获得致使PKR下调表达的shRNA,以及稳定表达shRNA、PKR表达降低90%以上的Marc-145细胞系,重组病毒感染后48h,M蛋白与EGFP表达均受到抑制,且与对照相比,感染后72~96 h,未观察到典型的细胞病变效应,说明在PKR表达受到抑制时,病毒增殖受到明显抑制。本研究通过建立PKR下调表达细胞系与PRRSV感染试验,初步阐明PKR在PRRSV增殖时所发挥的作用,为进一步开展PRRSV与细胞抗病毒固有免疫互作机制研究莫定了基础。

关键词： Marc-145细胞 PKR下调表达shRNA PRRSV

基于MaxEnt结合粒子群优化的陇南市山洪灾害空间分布预测研究

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武汉大学学报（信息科学版） 2024年第8期49卷 1444-1455页

作者：王浩牛全福刘博雷姣姣王刚张瑞珍兰州理工大学土木工程学院甘肃兰州730050 甘肃省应急测绘工程研究中心甘肃兰州730050 甘肃大禹九洲空间信息科技有限责任公司院士专家工作站甘肃兰州730050

山洪是山区河道水位突然上涨所引发的自然灾害,具有瞬时性、破坏性大等特点。近年来,甘肃省陇南市山洪灾害频发,严重威胁到当地人民的生命财产安全,对该区域进行山洪灾害风险评价刻不容缓。运用MaxEnt结合粒子群优化算法,基于调查的834... 详细信息

山洪是山区河道水位突然上涨所引发的自然灾害,具有瞬时性、破坏性大等特点。近年来,甘肃省陇南市山洪灾害频发,严重威胁到当地人民的生命财产安全,对该区域进行山洪灾害风险评价刻不容缓。运用MaxEnt结合粒子群优化算法,基于调查的834个山洪灾害点和与灾害相关的32个致灾因子,在探讨主要致灾因子的基础上进行研究区山洪灾害易发性评价,并结合当前(2021—2040年)和未来(2041—2060年、2061—2080年、2081—2100年)4期气候数据的不同情景模式,预测了该区研究期间山洪灾害潜在易发区空间分布格局。结果表明,各期研究结果的受试者工作特征曲线的曲线下面积均大于0.85,表明所提方法的研究结果精度较高;研究区的主要致灾因子为最干月降水量、昼夜温差月均值、降水量变异系数、最暖月最高温、土地利用、距河流的距离、土壤质地、剖面曲率、海拔、地形起伏度;研究区不同时期山洪灾害中高易发区集中分布于武都区、文县和宕昌县部分地区,与当前时期相比,未来3个时期的模拟结果均体现为减少趋势。

关键词：粒子群优化算法 MaxEnt 陇南市山洪灾害易发区致灾因子

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《湖南农民运动考察报告》中意识形态话语权的构建及当代启示

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学校党建与思想教育 2024年第4期 94-96页

作者：孙培鑫河南科技大学外国语学院党委河南洛阳471000

毛泽东的《湖南农民运动考察报告》(以下简称《报告》)以马克思主义意识形态话语权思想为理论遵循,立足中国革命需要,通过“谁来说”明确话语主体、“说给谁”掌握话语主动、“说什么”增强话语引领,构建了无产阶级意识形态话语权,驳斥... 详细信息

毛泽东的《湖南农民运动考察报告》(以下简称《报告》)以马克思主义意识形态话语权思想为理论遵循,立足中国革命需要,通过“谁来说”明确话语主体、“说给谁”掌握话语主动、“说什么”增强话语引领,构建了无产阶级意识形态话语权,驳斥了党内外人士对农民革命运动的指责,确定了中国共产党领导农民运动的正确理论和政策。当前,我国在意识形态领域面临新格局、新特点,梳理《报告》中意识形态话语权建构的基本理路,对于掌握意识形态话语权、巩固马克思主义在意识形态领域的指导地位具有重要意义。

关键词：毛泽东《湖南农民运动考察报告》马克思主义意识形态话语权

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翼尖装置减阻机理及参数优化研究

翼尖装置减阻机理及参数优化研究

作者：孙培炎中国民用航空飞行学院

学位级别：硕士

中国为何构建“新型举国体制”？——与欧盟的比较

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科学学研究 2024年

作者：潘墨涛朱胜姣武汉大学政治与公共管理学院

中国政府近年来本着“新型举国体制”的理念进行科技创新的制度设计。通过比较分析视角展开将中国的“新型举国体制”与欧盟“开放性战略自主”这一科技创新体制进行比较分析，依此可以对中国选择“新型举国体制”的必然性与合理性加以... 详细信息

中国政府近年来本着“新型举国体制”的理念进行科技创新的制度设计。通过比较分析视角展开将中国的“新型举国体制”与欧盟“开放性战略自主”这一科技创新体制进行比较分析，依此可以对中国选择“新型举国体制”的必然性与合理性加以阐释。由此，可以客观的认识“新型举国体制”制度设计的深层逻辑。推进新兴科技的产业化是企业科创的核心动机，也是政府规制的重点领域。中国政府官方对“新型举国体制”的定义是“有组织地集中全国力量和资源于国家重点事业的新体制”，其解决问题的实用属性远高于科技“赶超”的政治属性。与之相比，“开放性战略自主”是欧盟当前的发展战略，是中美竞合时代主动应对的产物，具体的科技创新政策则服从于此战略体制，强调依靠内部各国的开放性以保持在中美竞合中的自主独立。从制度设计的角度具体比较中国的“新型举国体制”与欧盟的“开放性战略自主”，并且分别从“新型举国体制”与“开放性战略自主”的基本背景、组织形态、人才与资金配置等几个方面展开。对于基本背景而言，改革开放以来，中国经济社会发展加速，与美国、欧盟等国家地区在国家经济实力对比方面呈现出显著变化，是科技创新事业的基本背景。相较于科技创新方面外部竞争烈化的中国，欧盟始终面对着内部整合与外部竞争两大压力；组织形态方面，对于中国而言，内部国家整合能力的强化与外部政治压力是中国组织科技创新事业的依据，“新型举国体制”政治性相对浓厚，在组织结构方面要求政府部门设计科技创新政策。而对于欧盟来说，灵活性的经济发展战略与多秩序的内部政治结构是欧盟组织科技创新事业的依据，在组织结构方面，强调基于协商的政府与“产学研”组织间关系；人才资金方面，人才方面，中国从事科技创新的人才在增幅与增量方面相对欧盟具有优势，而政府财政科技支出方面，中国与欧盟的差距逐步拉进。最终简单评价目前的效果，并指出存在的问题，具有重要研究意义。

关键词：科技创新 “新型举国体制” “开放性战略自主”

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元宇宙视角下国产电影的话语想象与空间生产

电影文学 2024年第7期 99-102页

作者：孙培华三江学院文学与新闻传播学院江苏南京210012

电影作为现实生活的一部分,它既给观众提供了一个现实世界的映射,也提供了高于现实生活的各种人类生活场景,这是一种想象,也是一种追求。而元宇宙技术将虚拟世界,以及人在其中的具身性体验等意识带到大众面前,这无疑会对电影创作产生了... 详细信息

电影作为现实生活的一部分,它既给观众提供了一个现实世界的映射,也提供了高于现实生活的各种人类生活场景,这是一种想象,也是一种追求。而元宇宙技术将虚拟世界,以及人在其中的具身性体验等意识带到大众面前,这无疑会对电影创作产生了深刻影响。目前,国产电影正积极拥抱元宇宙,开拓新的发展方向。文章从元宇宙与国产电影的话语流变,元宇宙与国产电影的空间生产两方面,以元宇宙视角关注国产电影。

关键词：国产电影元宇宙话语想象空间生产

S-N型功能分子用作多功能添加剂的缓蚀及摩擦学行为研究

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摩擦学学报（中英文） 2024年第4期44卷 573-584页

作者：俎鹏姣董均阳李毅谢海姣张松伟李军胡丽天中国科学院兰州化学物理研究所固体润滑国家重点实验室甘肃兰州730000 河北工业大学理学院天津300401 青岛市资源化学与新材料研究中心山东青岛266071 杭州研趣信息技术有限公司浙江杭州310003

利用电化学、摩擦学试验和量子化学模拟等手段,研究了巯基甲基噻二唑(MMT)和二壬基萘磺酸(DNS)这2种功能分子作为缓蚀剂的缓蚀性能和作为极压抗磨添加剂的摩擦学性能及其作用机理.电化学试验表明,DNS分子的缓蚀能力较差,缓蚀效率为58.6%... 详细信息

利用电化学、摩擦学试验和量子化学模拟等手段,研究了巯基甲基噻二唑(MMT)和二壬基萘磺酸(DNS)这2种功能分子作为缓蚀剂的缓蚀性能和作为极压抗磨添加剂的摩擦学性能及其作用机理.电化学试验表明,DNS分子的缓蚀能力较差,缓蚀效率为58.6%;MMT分子表现出优异的缓蚀能力,缓蚀效率达93.3%.摩擦学试验表明,DNS作为添加剂时,油样的摩擦系数与PEG基础油的摩擦系数相当,磨损量增大;MMT作为添加剂时,油样的摩擦系数和磨损量较PEG基础油明显降低,极压性能较基础油明显提高.量子化学模拟结果表明,DNS分子与钢表面具有更高的反应活性,因此作为极压抗磨和缓蚀添加剂,加剧了金属的腐蚀和磨损.表面分析结果表明,DNS分子润滑下的磨斑表面主要起到减摩作用的是铁的氧化物和FeSO_(4)等.MMT分子润滑下的磨斑表面的摩擦产物为Fe_(2)(SO_(4))3、FeS_(2)、铁的氧化物以及含氮有机物.

关键词：巯基甲基噻二唑抗腐蚀性能减摩抗磨性能极压性能

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空间堆线性变参数模型预测控制方法研究

西安交通大学学报 2024年

作者：马骞孙培伟魏新宇西安交通大学能源与动力工程学院

空间核反应堆具有强非线性和大时滞的特性，针对传统PID控制方法在面临复杂负荷需求变化时无法满足空间核反应堆的控制性能需求的问题，提出了基于线性变参数模型的空间堆模型预测控制方法。针对强非线性特性，采用线性变参数模型作为... 详细信息

空间核反应堆具有强非线性和大时滞的特性，针对传统PID控制方法在面临复杂负荷需求变化时无法满足空间核反应堆的控制性能需求的问题，提出了基于线性变参数模型的空间堆模型预测控制方法。针对强非线性特性，采用线性变参数模型作为预测模型，对全功率范围内的空间堆运行特性进行预测；针对大时滞的特性，采用串级控制理论结合模型预测方法优化执行机构动作，提升被控量的响应速度。分别设计了电功率和冷却剂温度的控制系统，在典型工况下进行控制性能仿真验证，结果表明：所设计的预测控制系统相对于串级PID控制系统，电功率调节时间减少了68.7%，冷却剂温度调节时间减少了81.7%，超调量降低至0.1%，核功率的超调量分别减少22.3%和13.0%，保证了反应堆的安全；控制系统的适用性强，在不同功率水平均具有良好的控制性能；同时，大幅度减少了执行机构的动作，驱动电机峰值电压下降了84.1%，延长使用寿命，提升了系统经济性。因此，本研究提出了结合串级控制理论基于线性变参数模型的预测控制方法能够用于优化空间堆的控制系统。

关键词：空间核反应堆模型预测控制线性变参数模型串级控制