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猪3型圆环病毒研究进展

新农民 2024年第18期 123-125页

作者：千国胜於庆雄娄昆鹏胡永明彭俊平欧伟业浙江美保龙生物技术有限公司

猪圆环病毒（Porcinecircovirus,PCV）是目前危害全球养猪业的重要病原之一。该病除了导致断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）等，还可以导致新生仔先天性脑震颤（CT）、母猪繁殖障碍、增生性肠炎、猪呼吸... 详细信息

猪圆环病毒（Porcinecircovirus,PCV）是目前危害全球养猪业的重要病原之一。该病除了导致断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）等，还可以导致新生仔先天性脑震颤（CT）、母猪繁殖障碍、增生性肠炎、猪呼吸道综合征等。目前为止，该病毒有发现总共有PCV-1、PCV-2、PCV-3和PCV-4四种基因型，其中PCV-2的致病性最强。近年来，随着PCV-3的检出率不断提高，给养猪业带来了新的问题。本文就PCV-3圆环病毒的病原学、流行病学、致病机理、临床症状、诊断方法及防治措施作了全面的综述，为更加全面地认识该病毒，防控该病毒在规模化猪场暴发做基础。

关键词：猪3型圆环病毒 PCV诊断防治

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四足仿生机器人姿态估计及稳定性分析

四足仿生机器人姿态估计及稳定性分析

作者：娄昆鹏中南大学

学位级别：硕士

四足仿生机器人被认为是最佳的足式机器人形式,四足步行机器人比两足步行仿人机器人承载能力强、稳定性好,同时又比六足、八足步行机器人结构简单、易于控制。本文针对四足仿生机器人协调规划层的需求,建立四足仿生机器人的几何结构模型... 详细信息

四足仿生机器人被认为是最佳的足式机器人形式,四足步行机器人比两足步行仿人机器人承载能力强、稳定性好,同时又比六足、八足步行机器人结构简单、易于控制。本文针对四足仿生机器人协调规划层的需求,建立四足仿生机器人的几何结构模型,为四足仿生机器人协调规划层提供姿态参数以及规划依据。本文通过分析四足仿生机器人各个机械部件的运动特征,建立四足仿生机器人的几何结构模型,即机器人各运动关节的笛卡尔空间坐标系,并将机器人起始时刻对应的地理坐标系定为全局坐标系;依据建立的几何结构模型,分析机器人在静态步行条件下和对角小跑下的步态行走稳定判断方法。首先建立机器人各运动关节对应的空间坐标系,建立各个空间坐标系之间的联体变换关系,获得机器人姿态参数,为机器人步行稳定性分析提供参数依据。其次,通过分析机器人在静态步行条件下的行走步态方式,划分机器人的静态步行稳定区域,通过计算机器人质心以及支撑足在全局坐标系中的位置关系,研究并提出机器人在静态步行条件下的步行稳定性判断规则。最后,分析机器人对角小跑步态下的运动特点,定义了机器人载体绕支撑对角线的姿态偏角;根据机器人的行走速度以及运动方向,提出机器人质心随时间的轨迹计算方法;根据质心的运动轨迹,研究机器人载体姿态偏角随时间变化的规律,并建立对角小跑步态下步行稳定性的判断规则;通过仿真验证了判断规则的有效性。

关键词：四足仿生机器人姿态估计静态步行稳定性对角小跑稳定性

冷喷涂Al复合涂层的组织结构与腐蚀行为的研究

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冷喷涂Al复合涂层的组织结构与腐蚀行为的研究

作者：娄昆鹏集美大学

学位级别：硕士

随着我国经济建设的高速发展,港口码头、跨海大桥等海上钢制结构物大量兴建,大量的金属材料被投入使用,钢制结构物与海洋环境中的腐蚀介质接触而受到严重腐蚀,导致其使用寿命明显下降。本文利用冷喷涂技术制备了五种不同的Al复合涂层,... 详细信息

随着我国经济建设的高速发展,港口码头、跨海大桥等海上钢制结构物大量兴建,大量的金属材料被投入使用,钢制结构物与海洋环境中的腐蚀介质接触而受到严重腐蚀,导致其使用寿命明显下降。本文利用冷喷涂技术制备了五种不同的Al复合涂层,对涂层的力学性能和组织结构进行了分析,利用电化学方法对涂层的腐蚀行为进行了研究,对涂层的腐蚀机理、机械性能及耐腐蚀性能进行了分析。本文研究分析了五种冷喷涂涂层的力学性能及组织结构发现:五种冷喷涂涂层表面、涂层界面均不存在明显的缺陷,致密性较好。Al-25%AlO涂层的厚度可达980μm以上,其他四种涂层的厚度可达290μm以上。五种涂层的硬度均在59.6HV以上,其中Al-25%Zn-25%AlO涂层的硬度达100HV以上。五种涂层的孔隙率均不超过2.44%,Al-50%Zn涂层孔隙率仅为1.64%。Al-50%Zn-25%AlO涂层在加入了AlO粉后孔隙率明显下降,仅为1.13%,为五种Al复合涂层中最小。Al-50%Zn,Al-50%Zn-25%AlO涂层较Al-25%Zn,Al-25%Zn-25%AlO涂层孔隙率明显减小,说明提高Zn粉的比例能降低涂层的孔隙率。本文研究分析了五种冷喷涂涂层的耐腐蚀性能,Al-25%Zn-25%AlO及Al-50%Zn-25%AlO涂层浸泡后期自腐蚀电位在-0.98V附近趋于稳定,相较其他几种Al复合涂层其耐腐蚀性能更加优异。浸泡336h后,Al-25%AlO,Al-25%Zn-25%AlO,Al-50%Zn-25%AlO涂层的自腐蚀电流密度分别为0.35μA/cm2,26.41μA/cm2,15.29μA/cm2。总体而言,五种涂层的电流密度在浸泡后期基本趋于稳定,耐腐蚀性能较好,防护能力逐渐增强。Al-25%AlO涂层的阻抗谱图的容抗弧呈现出先增加后减小的趋势,浸泡初期在高频区表现出一个容抗弧,低频区表现出一个直线扩散过程,336h后阻抗谱图在低频区呈现出一个较明显的低频扩散过程。Al-25%Zn与Al-50%Zn涂层在浸泡过程中仅出现一个简单容抗弧,随后容抗弧的半径呈增大趋势。浸泡初始阶段,Al-25%Zn-25%AlO的阻抗谱图在高频区呈现出一个高频容抗弧,在低频区表现出一个直线扩散过程,容抗弧的半径呈逐渐增大趋势,168h后阻抗谱图上呈现出明显的扩散现象。而Al-50%Zn-25%AlO涂层,在528h才出现明显的低频扩散现象。总体而言,五种涂层浸泡后期的耐腐蚀性逐渐增强,Al-25%AlO涂层的容抗弧半径最大,耐腐蚀效果较好。Al-25%AlO涂层在浸泡24h后出现了较为明显的钝化区,528h后极化率呈增大趋势,浸泡后期防护能力逐渐增强。Al-25%Zn与Al-50%Zn涂层的阳极区没有出现明显的钝化区,浸泡后期极化率呈增大趋势。Al-25%Zn-25%AlO涂层和Al-50%Zn-25%AlO涂层在整个浸泡过程中电位稳定在-0.95V1.0V,浸泡96h后出现钝化区,电位随着电流的增大而逐渐增大,极化率呈现逐渐出增大的趋势。两种涂层浸泡后期的耐腐蚀性逐渐增强,耐腐蚀效果较好。对比分析Al-25%Zn和Al-25%Zn-25%AlO,Al-50%Zn和Al-50%Zn-25%AlO两组涂层发现,AlO粉的加入对各涂层浸泡过程中极化曲线的影响并不明显。

关键词：冷喷涂复合涂层电化学腐蚀

鸭瘟病毒UL28基因的克隆、原核表达、细胞定位和转录时相研究

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鸭瘟病毒UL28基因的克隆、原核表达、细胞定位和转录时相研究

作者：娄昆鹏四川农业大学

学位级别：硕士

依据本试验室构建的鸭瘟病毒基因文库及其测定的序列片段信息,设计UL28基因引物,PCR扩增出鸭瘟病毒UL28基因(GenBank登录号EF643557),分析了UL28基因的分子特征和密码子选择使用情况,并开展了以下研究工作:依据DPV UL28设计寡核苷酸探针... 详细信息

依据本试验室构建的鸭瘟病毒基因文库及其测定的序列片段信息,设计UL28基因引物,PCR扩增出鸭瘟病毒UL28基因(GenBank登录号EF643557),分析了UL28基因的分子特征和密码子选择使用情况,并开展了以下研究工作:依据DPV UL28设计寡核苷酸探针,用斑点杂交进一步确认该UL28属于鸭瘟病毒基因组、原核表达和抗体制备、在病毒感染宿主鸭胚成纤维细胞中DPV UL28基因表达产物的亚细胞定位检测以及其转录时相分析。 1.鸭瘟病毒UL28基因序列的分子特性分析DPV UL28大小为2412bp,编码803aa,包含1个保守结构域,名名为疱疹病毒加工和包装蛋白(PRTP)。DPV UL28基因(ICP18.5)与Genbank上多种α疱疹病毒同源基因的氨基酸序列具有较高的同源性。系统进化树分析表明,DPV在分类地位上归属于α疱疹病毒亚科,而且有可能属于新的属别分支。密码子偏爱性分析结果表明,编码相同氨基酸的密码子使用频率有较大的差异,在密码子的选择使用上表现出较强的偏爱性。 *** UL28基因原核表达及其多克隆抗体制备扩增的UL28基因连接至pMD18-T载体,将克隆片段测序正确后定向插入pET-32a(+)载体,经BamH I和Sal I双酶切鉴定表明,成功构建重组表达质粒pET-32a/UL28,并转化入表达宿主菌BL21(DE3),用IPTG进行诱导表达,表达产物以包涵体形式存在,大小为110KD左右。对表达条件进行优化,确定最佳表达条件为IPTG 0.1mmol/L,25℃诱导5h。利用重组表达蛋白所带的6×His标签用镍柱亲和层析方法进行纯化,获得较高纯度的重组蛋白。过柱纯化蛋白对家兔进行免疫,制备兔高免血清,Western-Blotting检测显示,其能识别该重组表达蛋白;琼脂扩散试验效价达1:16～1:32。 *** UL28基因产物在宿主细胞中的表达与细胞定位通过细胞免疫荧光进行病毒感染DEF的细胞定位检测,结果表明特异性荧光可在感染后2h的胞核中检测到,随着感染时间的增加,越来越多的细胞核中出现特异性荧光,12h检测到最强荧光,主要见于细胞核。之后荧光强度逐渐减弱,病毒侵蚀伴随着细胞核的裂解,胞核荧光逐渐弥散减弱。48h后就难以检测到荧光。 4鸭瘟病毒体外感染宿主细胞UL28基因的转录时相分析通过荧光定量PCR对DPV UL28基因在宿主细胞的转录时相检测结果表明,随着接毒时间的增加,DPV UL28基因的转录产物呈现先急剧上升,然后持续下降的趋势。最早在0.5h就已经检测到UL28基因开始转录,随后转录产物量迅速放大,并于感染后12h达到高峰,24h后其相对含量下降到一定水平,32h后检测相对值接近零。这种转录谱具有疱疹病毒早期基因的典型特征。

关键词：鸭瘟病毒 UL28基因分子特性克隆表达细胞定位转录时相

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原位杂交在病原微生物检测中的应用

黑龙江畜牧兽医 2010年第3期 21-23页

作者：娄昆鹏程安春汪铭书四川农业大学动物医学院禽病防治研究中心四川雅安625014 动物疫病与人类健康四川省重点实验室四川雅安625014

原位杂交技术是分子遗传学与细胞遗传学相结合而产生的一门新兴技术,具有很高的敏感性和特异性,在当今细胞生物学、分子生物学研究中有着广泛的应用。文章对原位杂交的产生和发展、基本方法和特点及其在病原微生物检测方面的研究进展进... 详细信息

原位杂交技术是分子遗传学与细胞遗传学相结合而产生的一门新兴技术,具有很高的敏感性和特异性,在当今细胞生物学、分子生物学研究中有着广泛的应用。文章对原位杂交的产生和发展、基本方法和特点及其在病原微生物检测方面的研究进展进行了阐述。

关键词：原位杂交检测病原微生物

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1例弓形虫病的PCR鉴定与诊治

养殖与饲料 2019年第8期18卷 74-77页

作者：舒鑫标娄昆鹏浙江大飞龙动物保健品股份有限公司浙江金华321017 扬州大学兽医学院江苏扬州225009

浙江某猪场冬季出现母猪流产、早产和仔猪死亡比例上升等情况,损失严重。通过现场调查、病理解剖、实验室镜检和PCR鉴定,确诊为猪弓形虫致病,对患病猪进行了药物治疗,效果良好,同时对该病的防治提出建议。

关键词：弓形虫 PCR 诊断治疗

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细菌分泌系统研究进展

中国预防兽医学报 2019年第3期41卷 317-322,327页

作者：岑雪丁雪燕娄昆鹏朱国强扬州大学兽医学院江苏扬州225009 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009

细菌在长期的进化过程中不断和宿主发生互作,通过自身分泌的蛋白作用于特定的宿主细胞引起特异性或非特异性的免疫应答。细菌所分泌的蛋白在营养获得、适应环境、种内和种间信号通迅以及毒力方面起着至关重要的作用。在革兰阴性菌中,分... 详细信息

细菌在长期的进化过程中不断和宿主发生互作,通过自身分泌的蛋白作用于特定的宿主细胞引起特异性或非特异性的免疫应答。细菌所分泌的蛋白在营养获得、适应环境、种内和种间信号通迅以及毒力方面起着至关重要的作用。在革兰阴性菌中,分泌的蛋白必须穿过两个膜:细胞质膜或内膜(Inner membrance, IM) 和外膜(Outer membrane,OM)[1]。

关键词：分泌系统宿主细胞毒力作用牙龈卟啉单胞菌效应蛋白

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猪场致病因素之蓝耳病与非洲猪瘟的关系初探

浙江畜牧兽医 2021年第6期46卷 6-9页

作者：童树喜陈立平娄昆鹏董勇生金华市婺城区白龙桥镇人民政府浙江金华321025 浙江美保龙种猪育种有限公司婺城区农业农村局

蓝耳病与非洲猪瘟均侵害巨噬细胞系统和胸腺,二者同恶相济,蓝耳感染降低肺泡巨噬细胞吞噬功能,降低免疫系统机能,增加非洲猪瘟感染风险;蓝耳活跃场发生非洲猪瘟风险增加,而且一旦发生非洲猪瘟则清场概率和清场速度均增加;疑似非洲猪瘟... 详细信息

蓝耳病与非洲猪瘟均侵害巨噬细胞系统和胸腺,二者同恶相济,蓝耳感染降低肺泡巨噬细胞吞噬功能,降低免疫系统机能,增加非洲猪瘟感染风险;蓝耳活跃场发生非洲猪瘟风险增加,而且一旦发生非洲猪瘟则清场概率和清场速度均增加;疑似非洲猪瘟发病场,蓝耳抗原检出率同样高,也出现了诸多疑似非洲猪瘟的阳性场在免疫蓝耳弱毒苗后再次爆发的情况。但免疫蓝耳灭活苗场此类风险显著降低。非洲猪瘟时代,蓝耳病的免疫应关注风险因素,从实践来看,蓝耳病的免疫,灭活苗不失为一种可行的选择,对猪场疫病防控体系建设意义重大。

关键词：蓝耳病非洲猪瘟互作关系蓝耳疫苗

猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)免疫效果研究

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中国畜禽种业 2018年第12期14卷 161-162页

作者：胡永明欧伟业彭俊平娄昆鹏李江浙江美保龙生物技术有限公司 321000

为研究猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)在规模猪场的临床使用效果,将试验仔猪平均分成A、 B两组, A组:3周龄免疫猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)"圆立定", 1ml/头; B组:空白对照不免疫圆环疫苗;其他免疫程序与使用的饲料两组均一样。与空白对... 详细信息

为研究猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)在规模猪场的临床使用效果,将试验仔猪平均分成A、 B两组, A组:3周龄免疫猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)"圆立定", 1ml/头; B组:空白对照不免疫圆环疫苗;其他免疫程序与使用的饲料两组均一样。与空白对照组相比;免疫组在免疫后14d阳性率达到100%,抗体滴度达到1.43,在免疫了40d后抗体水平仍在持续升高。在生产数据上,在使用猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)后,在整个保育期猪群的日增重增加了92g;残次率降低了7.5%;成活率提高了9%;料肉比降低了0.32。结果表明,试验猪免疫猪圆环病毒2型灭活疫苗(YZ株)可预防圆环病毒对猪体的危害,提高猪群成活率及饲料转化率和平均日增重,改善猪群整体生产成绩。

关键词：猪圆环病毒2型灭活疫苗圆立定 YZ株免疫效果