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基于UPLC-MS/MS的夏枯草不同时期的果穗差异代谢物分析

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中国中药杂志 2024年第10期49卷 2734-2744页

作者：陆玉爱刘恃君林丽美侯师艺戈玉莹谢菁琛严婧夏伯候湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

夏枯草因夏至而枯得名,不同采收时期对其品质的形成影响重大。然而,目前对夏枯草不同时期果穗化学成分的变化研究较少,所涉及的代谢产物尚不清楚。为了阐明夏枯草果穗的代谢物及代谢通路,该实验采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)... 详细信息

夏枯草因夏至而枯得名,不同采收时期对其品质的形成影响重大。然而,目前对夏枯草不同时期果穗化学成分的变化研究较少,所涉及的代谢产物尚不清楚。为了阐明夏枯草果穗的代谢物及代谢通路,该实验采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)结合广泛靶向代谢组学技术整体表征夏枯草不同时期的果穗化合物差异性,利用主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘判别分析法(OPLS-DA)等多元统计方法鉴定差异代谢物,并且对相关代谢通路进行分析。代谢组学的结果共鉴定出了602种代谢物,其中有机酸及其衍生物数量最多,黄酮类次之;根据VIP>1且P<0.05,发现羟基苯甲酸、没食子酸等为其主要差异代谢物;富集分析结果提示异黄酮类化合物的生物合成、氨基苯甲酸盐的降解、苯甲酸盐的降解、花青素的生物合成、代谢途径、不同环境中的微生物代谢、植物次级代谢物的生物合成、色氨酸的代谢、苯丙酸类物质的生物合成等代谢通路为主要通路。这些结果旨在阐明夏枯草差异代谢物的动态变化情况,为深入研究夏枯草果穗采收机制提供理论依据。

关键词：夏枯草不同时期 UPLC-MS/MS 代谢组学代谢通路

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基于电感耦合等离子体质谱分析金银花和山银花多元素差异的质量控制模式研究

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中国中药杂志 2024年第12期49卷 3263-3269页

作者：刘恃君汤杨黔南陆玉爱侯师艺戈玉莹严婧李亚梅夏伯候湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

大量研究表明金银花和山银花在有机物上的确具有显著性差异,但仍然缺少有关两者间无机元素方面的研究。该研究通过电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP-MS)建立非靶向元素组方法,比较金银花和山银... 详细信息

大量研究表明金银花和山银花在有机物上的确具有显著性差异,但仍然缺少有关两者间无机元素方面的研究。该研究通过电感耦合等离子体质谱(inductively coupled plasma mass spectrometry, ICP-MS)建立非靶向元素组方法,比较金银花和山银花在无机元素上的整体差异,并筛选其差异标志物。同时通过靶向方法定量分析这些差异标志物。非靶向元素组结果表明,得到的数学模型能够较好地反映金银花和山银花在元素含量的差异。以变量重要性投影值(VIP)>2.0,P1.2或<0.80为筛选原则,确认了锰(^(55)Mn)、铋(^(209)Bi)、镉(^(111)Cd)、铷(^(85)Rb)等4种无机元素为两者的差异标志物。靶向定量结果表明,金银花中^(209)Bi的含量显著高于山银花,而山银花中^(55)Mn、^(111)Cd和^(85)Rb显著高于金银花。该研究所建立的基于ICP-MS的非靶向和靶向元素组方法可显著反映金银花和山银花的无机元素的整体差异;从元素的角度探讨两者间差异,可部分反映两者药性上的差异,也为进一步研究金银花与山银花中无机元素质量控制模式的建立和其药理功效奠定了基础。

关键词：电感耦合等离子体质谱金银花山银花靶向非靶向

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补血益母丸对气血双虚小鼠的毛发代谢组学研究

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湖南中医药大学学报 2024年第6期44卷 982-990页

作者：刘恃君陆玉爱侯师艺戈玉莹夏伯候谢明霞李亚梅湖南中医药大学药学院/湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

目的探讨补血益母丸对气血双虚小鼠的毛发代谢组学研究。方法采用腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)及眼眶放血,建立气血双虚小鼠模型后,将动物分为模型组、补血益母丸低剂量组和补血益母丸高剂量组,另设正常组,并连续10 d对小鼠... 详细信息

目的探讨补血益母丸对气血双虚小鼠的毛发代谢组学研究。方法采用腹腔注射环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)及眼眶放血,建立气血双虚小鼠模型后,将动物分为模型组、补血益母丸低剂量组和补血益母丸高剂量组,另设正常组,并连续10 d对小鼠进行灌胃补血益母丸1.82、7.28 g·kg^(-1)干预。通过气相色谱飞行时间质谱(gas chromatography time-of-flight mass spectrometry,GC-TOF-MS)技术对各实验组小鼠的毛发进行分析,采用主成分分析(principal component analysis,PCA)和正交偏最小二乘法判别分析(orthogonal partial least-squares discriminant analysis,OPLS-DA)寻找并发现补血益母丸作用于气血双虚模型小鼠的差异代谢物。结果毛发中有5个差异性代谢物与CTX致免疫低下型气血双虚证相关,主要涉及酪氨酸代谢(tyrosine metabolism)和初级胆汁酸生物合成(primary bile acid biosynthesis);经补血益母丸治疗后代谢轮廓趋近正常组,有11个代谢物涉及3条代谢通路,推测补血益母丸对气血双虚证的治疗作用可能通过调控氨基酸代谢有关。结论本研究从毛发代谢组学角度为中医气血双虚病症及补血益母丸的干预提供了氨基酸代谢、胆汁酸代谢机制层面的解释,部分揭示了补血益母丸益气补血作用机制,为其临床运用提供了一定理论依据。

关键词：代谢组学补血益母丸气血双虚气质联用毛发代谢

山香圆叶挥发油化学成分及抗氧化和抗炎活性研究

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天然产物研究与开发 2022年第5期34卷 723-738页

作者：刘昭李利汤杨黔南林丽美夏伯候湖南中医药大学长沙410208 湖南省中医药研究院长沙410013

山香圆叶具有较好的临床疗效,但其挥发油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文应用超临界萃取法提取其挥发油,采用GC-MS对其小极性物质进行全面分析(甲酯化和非甲酯化),并对其中等极性物质进行LC-MS分析,采用了DPPH法和ABTS法测定了... 详细信息

山香圆叶具有较好的临床疗效,但其挥发油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文应用超临界萃取法提取其挥发油,采用GC-MS对其小极性物质进行全面分析(甲酯化和非甲酯化),并对其中等极性物质进行LC-MS分析,采用了DPPH法和ABTS法测定了其抗氧化活性,采用LPS诱导RAW 264.7细胞模型探索山香圆叶挥发油的抗炎活性。GC-MS非甲酯化和甲酯化分别鉴定了38和42个化合物,主要为亚油酸、γ-谷甾醇、角鲨烯、2,2′-亚甲基双-(4-甲基-6-叔丁基苯酚)、反-9-十八碳烯酸、棕榈酸等物质。LC-MS的正负离子模式下,共鉴定出256个化合物,主要为萜类、苯丙素类、酚类、黄酮类、生物碱类、香豆素及其衍生物类、脂肪酰类、倍半萜类、脂肪酸类等化合物。活性研究表明,山香圆叶挥发油具有较好的抗DPPH和ABTS自由基能力,同时能显著抑制LPS诱导RAW 264.7细胞NO和IL-6的释放量,且成剂量依赖性。以上结果表明,山香圆叶挥发油具有较复杂的化学成分,并具有较好的抗氧化和抗炎作用,可作为开发功能性食品和药品的天然来源。

关键词：山香圆叶挥发油化学成分抗氧化抗炎

基于顶空气相色谱-离子迁移谱法评价金银花和山银花风味性物质的差异

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中国中药杂志 2022年第14期47卷 3798-3805页

作者：汤杨黔南李利林丽美李亚梅夏伯候湖南中医药大学湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208

金银花与山银花作为药食同源的传统中药材,在药品、食品、保健品等行业广泛应用,然而,其风味性物质的差异分析尚缺整体研究。该研究基于顶空气相色谱-离子迁移谱法(headspace gas chromatography-ion mobility spectroscopy, HS-GC-IMS... 详细信息

金银花与山银花作为药食同源的传统中药材,在药品、食品、保健品等行业广泛应用,然而,其风味性物质的差异分析尚缺整体研究。该研究基于顶空气相色谱-离子迁移谱法(headspace gas chromatography-ion mobility spectroscopy, HS-GC-IMS)分析金银花与山银花的风味性物质差异,并通过多元统计分析筛选差异标志物。结果表明,金银花与山银花中共鉴定47个风味性物质之间存在显著差异,其差异的主要标志物为乙酸乙酯(ethyl acetate)、丙醇(propyl alcohol)、 1-辛醇(1-octanol)、1-己醇(1-hexanol)、己醛(hexanal)和顺式-3-己烯-1-醇[(Z)-3-hexen-1-ol],通路分析表明这些标志物参与了主要次生代谢的合成、硫代谢通路及其他风味性物质的形成。该研究为金银花与山银花的风味性物质评价及药食两用产品的开发提供了重要的参考。

关键词：金银花山银花 HS-GC-IMS 风味物质多元统计分析

基于UV-Vis指纹图谱结合化学计量学探讨不同采收期金银花的质量差异

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中国实验方剂学杂志 2022年第7期28卷 134-141页

作者：谢明霞李洁花夏伯候张熙彭清华王枭冶湖南中医药大学临床医学院长沙410208 湖南省脑科医院(湖南省第二人民医院) 长沙410007

目的:采用紫外-可见(UV-Vis)指纹图谱结合化学计量学方法,探讨不同采收期金银花药材的质量差异性。方法:采集幼蕾期、青蕾期、白蕾期、银花期和金花期5个不同时期,共25个金银花样品,通过单因素优选确定最佳提取方法并在此条件下建立不... 详细信息

目的:采用紫外-可见(UV-Vis)指纹图谱结合化学计量学方法,探讨不同采收期金银花药材的质量差异性。方法:采集幼蕾期、青蕾期、白蕾期、银花期和金花期5个不同时期,共25个金银花样品,通过单因素优选确定最佳提取方法并在此条件下建立不同采收期金银花的UV-Vis指纹图谱。结果发现不同采收期的金银花样品的紫外指纹图谱在209、216、226、250、280、303、318、350 nm波长附近的吸光度均有显著差异。进一步将数据预处理、归一化等处理后,通过SIMCA-P+进行主成分分析(PCA)、偏最小二乘判别分析(PLS-DA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)等多元统计分析方法,建立金银花5个不同采收期的质量差异性模型。结果:PCA和PLS-DA结果均显示5个不同采收期的金银花样品各自聚在相近位置,且具有显著的采收时间依赖性趋势,说明金银花不同采收期间所含化学成分的含量差异较大,与采收期相关性较高。OPLS-DA两两比较分析表明引起幼蕾期到青蕾期变化的成分可能为三萜类或挥发油类,含量均减少;青蕾期到白蕾期变化的成分可能为三萜(或环烯醚萜)类、挥发油、酚酸类或黄酮类,含量降低,该结果与绿原酸HPLC测定结果一致;白蕾期至银花期变化的成分可能为含量增加的环烯醚萜类和含量减少的三萜(或挥发油)类,银花期至金花期变化的成分主要有含量增加的三萜(或挥发油)类。结论:该研究方法具有简单,可操控性强等特点,可为中药质量控制方法的研究提供参考。

关键词：紫外-可见指纹图谱化学计量学金银花不同采收期

科研平台"三早"模式培养医药类本科生科研能力的探索与实践

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科教导刊（电子版） 2023年第24期 284-286页

作者：李亚梅林艳林丽美夏伯候湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙 410208

科研平台是科学研究的重要基地,为科技创新工作提供有利条件.科研平台在人才培养方面也发挥着极其重要的作用.文章通过提出科研平台采用"三早"模式即"早选拔、早培训、早实践"培养本科生科研能力,并制定相应的实施和考核方案来探索"三早... 详细信息

科研平台是科学研究的重要基地,为科技创新工作提供有利条件.科研平台在人才培养方面也发挥着极其重要的作用.文章通过提出科研平台采用"三早"模式即"早选拔、早培训、早实践"培养本科生科研能力,并制定相应的实施和考核方案来探索"三早"模式在培养医药类本科生科研能力过程中的作用.

关键词：科研平台 "三早"模式本科生科研能力

来源：博看期刊评论

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中红外光谱结合模式识别快速鉴别生/制首乌

光谱学与光谱分析 2021年第12期41卷 3708-3711页

作者：林艳夏伯候李春林丽美李亚梅湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室湖南长沙410208 中国中医科学院中药研究所北京100700

何首乌有生首乌和制首乌之分,生首乌能解毒,润肠通便;制首乌能补肝肾,益精血,乌须发,强筋骨,化浊降脂。生/制首乌都含有二苯乙烯苷类、蒽醌类、磷脂类等化学成分,但其含量存在一定差异。生首乌炮制后其毒性减弱。生/制首乌的功效、主治... 详细信息

何首乌有生首乌和制首乌之分,生首乌能解毒,润肠通便;制首乌能补肝肾,益精血,乌须发,强筋骨,化浊降脂。生/制首乌都含有二苯乙烯苷类、蒽醌类、磷脂类等化学成分,但其含量存在一定差异。生首乌炮制后其毒性减弱。生/制首乌的功效、主治和毒性都存在一定的差异,在外观性状上差异较易识别,但其磨成粉末后两者不易区分。因此,寻找一种快速简单的判别方法来区分生/制首乌十分必要。中红外光谱法具有检测速度快,对样品无损等优势,已在中药质量控制和鉴别中得到广泛的应用。该研究建立生/制首乌中红外光谱的指纹图谱,并采用正交偏最小二乘-判别分析对其进行鉴别。在4000~700 cm^(-1)范围内采集38批不同来源生/制首乌中红外光谱数据,分析其主要的特征峰,并用simca13.0软件对数据进行正交偏最小二乘-判别分析。建立38批不同来源生/制首乌中红外指纹图谱,并分析出主要化学成分包括蛋白质类、核酸类、脂肪酸类、蒽醌类、二苯乙烯苷类、磷脂类。对红外光谱峰形和峰强度进行分析,生首乌和制首乌的峰形差异比较少,但峰强度具有一定的差异。为了建立生/制首乌红外光谱差异模型,采用正交偏最小二乘-判别分析法,其结果能很好地将生/制首乌分成两类,左边为制首乌,右边为生首乌。根据变量在项目中的重要性(VIP值)筛选差异化学成分,并利用SPSS17.0统计软件进行t检验,以VIP>1及p<0.05确定差异性化学成分。生/制首乌的差异性化学成分为二苯乙烯苷类、蒽醌类、磷脂类,表明何首乌炮制后二苯乙烯苷类、蒽醌类、磷脂类的含量都发生变化。中红外光谱结合模式识别筛选出差异性化学成分和文献报道基本一致,表明此法可用于生/制首乌鉴别。本研究成功采用中红外光谱对生/制首乌进行快速检测和整体质量评价,结合模式识别能将其鉴别,可为中药质量控制和快速鉴别提供依据。

关键词：中红外光谱生首乌制首乌模式识别二苯乙烯苷

山银花油GC-MS及LC-MS的全成分表征及体外抗炎和抗氧化活性研究

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天然产物研究与开发 2023年第11期35卷 1842-1856页

作者：刘恃君陆玉爱李利汤杨黔南林丽美谢明霞夏伯候湖南中医药大学药学院湘产大宗药材品质评价湖南省重点实验室长沙410208

山银花是一种有价值的药用资源,但其油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文通过气相色谱-质谱仪联用法(GC-MS)及超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UHPLC-QE-MS)对超临界CO_(2)萃取法得到的山银花油进行系统的化学成分表征,并探讨其体... 详细信息

山银花是一种有价值的药用资源,但其油的化学成分和生物活性尚未深入研究。本文通过气相色谱-质谱仪联用法(GC-MS)及超高效液相色谱-高分辨质谱联用(UHPLC-QE-MS)对超临界CO_(2)萃取法得到的山银花油进行系统的化学成分表征,并探讨其体外抗氧化及细胞抗炎能力等生物活性。GC-MS共鉴别出66种化合物,主要为脂肪酸类、甾醇类和烷烃类化合物。UHPLC-QE-MS在正负离子模式下分别鉴别出83和71种化合物,主要为萜类、黄酮类等化合物。抗氧化结果表明山银花油清除ABTS自由基能力呈良好的剂量依赖性,DPPH自由基的IC_(50)值为3.49 mg/mL。同时抗炎实验表明山银花油可显著抑制脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW 264.7)炎性因子IL-6(P<0.05)和NO(P<0.05)的释放,发挥抗炎作用。以上结果表明,山银花油化学成分复杂多样,是一种具有较优抗炎作用的天然活性来源,且在食品医药中有较好的开发和应用价值。

关键词：山银花挥发油 GC-MS LC-MS 生物活性