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核酸串联扩增技术用于生物标志物的高效检测和胞内成像

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核酸串联扩增技术用于生物标志物的高效检测和胞内成像

作者：周杨杰武汉大学

学位级别：硕士

核酸串联扩增分析是指以以核酸分子作为元件构建功能模块的一类新兴的传感分析技术,一般由靶标捕获识别和信号串联扩增输出的两个功能模块组成。并且对于不同的靶标有不同的捕获识别和信号扩增输出方式。许多生物标志物包括短链核酸,有... 详细信息

核酸串联扩增分析是指以以核酸分子作为元件构建功能模块的一类新兴的传感分析技术,一般由靶标捕获识别和信号串联扩增输出的两个功能模块组成。并且对于不同的靶标有不同的捕获识别和信号扩增输出方式。许多生物标志物包括短链核酸,有机小分子,低分子量蛋白质等,在生命体和细胞中参与多种生化反应和细胞代谢的调节过程,其表达水平异常与多种疾病相关,因此可以作为核酸串联扩增分析领域的靶标分子。但是生物标志物在细胞和组织中的表达水平都比较低,因此对低浓度下的生物靶标进行快速、高灵敏度、高特异性、高稳定性的体外检测和胞内成像也是具有挑战性的。总的来说,开发新的核酸串联扩增技术,利用高阶核酸杂交线路的辅助来实现更高的信号增益,对于检测和成像某些低含量的生物标志物具有重要意义。本论文成功设计了两种新型的且具有1:N的信号增益的核酸串联扩增分析方法,分别用于对ATP和micro RNA-21的高灵敏性、高选择性的体外检测和胞内成像。研究工作主要从以下两个方面展开:(1)构建了一种基于无酶等温的级联杂交链式反应(Ca-HCR)的适配传感器,该适配体传感器通过获得FERT信号输出实现对ATP的放大检测。在该适配体传感器中,双链复合物Apt C/Apt Inh中的适配体序列能够特异性地识别ATP靶标释放出HCR反应的引发链,释放的引发链能激活上游的HCR-1反应中的发夹的连续杂交。而连续杂交的HCR-1产物的聚合ds DNA纳米线中会含有许多重复的能触发下游HCR-2反应的引发剂序列,所以可以激活下游的HCR-2反应来产生N倍放大的“signal-off”读出信号。该方法在实现体外监测ATP的同时,还能实现对细胞内ATP的扩增成像和监测其胞内ATP动态调控水平。并且对Ca-HCR适配体传感器中的反应动力学进行模型的推导来研究其反应机理。此外,该分析方法还能通过引入不同的适配体和相应的抑制剂序列作为模块化组件构建普适性检测其他生物小分子的适配体传感体系。(2)构建了一种基于Exo-III辅助靶标再生和DNAzyme催化信号循环的多功能DNAzyme放大器,能够实现对micro RNA-21的定量检测和胞内成像。在设计的这个检测平台中,设计的多功能发夹HP-Dz中张开的双臂区域能与mi R-21结合形成双链复合物,随后在Exo-III消化的作用下,连续地从杂交复合物中释放出mi R-21,然后释放的mi R-21能与另一个HP-Dz杂交以开始新的循环。同时,发夹HP-Dz序列中封闭的DNAzyme结构被激活,这能够启动双标的底物的裂解来达到信号循环输出。最终导致产生大量的荧光信号来达到双重信号放大的效果。为了实现mi RNA的裸眼检测,通过把多功能发夹HP-Dz中的Mg依赖的DNAzyme序列巧妙地换成G-quadruplex序列,其中G-quadruplex和Hemin组合在一起可形成HRP模拟酶来催化HO氧化ABTS输出比色信号,从而构建了免标记的多功能发夹HP-G4放大器体系。因此设计的多功能DNAzyme放大器是一种通用性的、简单且的超灵敏的信号放大方法,能够成功用于mi R-21的体外检测和胞内成像,对了解相关的病理过程起到了更好的帮助。

关键词：生物标志物核酸串联传感分析适配体传感器信号扩增催化核酸

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教育思想:历史与现实的对话

中学政治教学参考 2007年第6期 30-31页

作者：周杨杰湖北监利县大兴中学

凡上过讲台的师者，都通晓孔子“因材施教”的原则，它起源于孔子的系列思想，如“中人以上可以语上也，中人以下可以语下也!”“知者乐水、仁者乐山”等。孔子“教学相长”的思想也有据为“三人行，必有吾师焉，择其善者而从之，其不... 详细信息

凡上过讲台的师者，都通晓孔子“因材施教”的原则，它起源于孔子的系列思想，如“中人以上可以语上也，中人以下可以语下也!”“知者乐水、仁者乐山”等。孔子“教学相长”的思想也有据为“三人行，必有吾师焉，择其善者而从之，其不善者而改之”。当前，初中新课程确立了知识与技能、过程与方法、情感态度与价值观的课程目标，故新的教育方式的到来，势将春风化雨般润物细无声。

关键词：历史现实教育思想 “因材施教” “教学相长” 课程目标情感态度教育方式

CT诊断糖尿病合并肺结核患者的影像学特征分析

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糖尿病新世界 2018年第13期21卷 30-31页

作者：周杨杰李琳琳莒县人民医院医学影像科山东日照276800 日照市中心医院健康管理科山东日照276800

目的研究CT诊断糖尿病合并肺结核患者的影像学特征。方法选取2017年2月—2018年2月期间,在该院接受治疗的肺结核患者86例,其中43例患者为单纯肺结核患者,将其设为对照组,另外43例患者为糖尿病合并肺结核患者,将其设为研究组,对两组患者... 详细信息

目的研究CT诊断糖尿病合并肺结核患者的影像学特征。方法选取2017年2月—2018年2月期间,在该院接受治疗的肺结核患者86例,其中43例患者为单纯肺结核患者,将其设为对照组,另外43例患者为糖尿病合并肺结核患者,将其设为研究组,对两组患者均进行CT影像检查,对比2组患者的检查诊断结果。结果研究组患者的双肺受累占比93.02%、肺前部或下叶基底段占比为60.47%、上叶尖后段或下叶背段占比为90.70%、两叶或两叶以上占比为65.12%,两组患者的发病部位和病变累及范围对比,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者的单发空洞占比为16.28%、并多发空洞占比为18.60%、支气管播散灶占比为74.42%、斑片状大片融合大片状高密影占比为58.14%,两组患者的病变类型对比,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者的血糖水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论使用CT对糖尿病合并肺结核患者进行诊断,能够对患者病情进行准确诊断,值得推广应用。

关键词：糖尿病肺结核 CT 影像学特征

农村高中微课开发与实施的策略研究——以新津县华润高级中学为例

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科技资讯 2017年第2期15卷 145-145,147页

作者：胡同文周杨杰平静新津县华润高级中学崇州市实验幼儿园四川成都611438

农村高中在微课的开发与实施过程中,受到自身条件的限制,微课开发与使用的情况不尽理想。该文主要结合学校自身实际,从学校、备课组、教学资源及家长层面,探索适合农村学校自身特色的模式,采取相应的策略措施,加强微课的开发、实践与研究。

关键词：农村高中微课开发策略研究

利用网络技术构建中学生在校表现发展性评价系统

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中国现代教育装备 2015年第2期 22-25页

作者：杨超荣周杨杰肖燕四川省成都市新津县华润高级中学

一、课题研究背景1.改变教育评价观念的必要性（1）国家相关政策法规及新课程标准的要求《国务院关于基础教育改革与发展的决定》《基础教育课程改革纲要》《教育部关于积极推进中小学评价与考试改革的通知》《普通高中课程方案》等国... 详细信息

一、课题研究背景1.改变教育评价观念的必要性（1）国家相关政策法规及新课程标准的要求《国务院关于基础教育改革与发展的决定》《基础教育课程改革纲要》《教育部关于积极推进中小学评价与考试改革的通知》《普通高中课程方案》等国务院及教育部有关文件,对教育评价提出了明确要求,要建立与新课程相配套的评价理念和评价方式。

关键词：发展性评价普通高中课程学生评价网络技术课题研究背景考试改革评价观念课程标准新课程评价工具

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强直性脊柱炎影像学诊断

吉林医学信息 2008年第Z2期25卷 2-3页

作者：周杨杰王磊蔡金贵山东省莒县人民医院

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种全身性慢性进行性炎症性疾病,主要侵犯中轴骨关节及脊柱旁韧带组织,最后发生脊柱强直。为了提高诊断水平,为临床提供更准确的诊断,笔者收集了近年来45例确诊AS的病例进行分析对比,现总结... 详细信息

强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)是一种全身性慢性进行性炎症性疾病,主要侵犯中轴骨关节及脊柱旁韧带组织,最后发生脊柱强直。为了提高诊断水平,为临床提供更准确的诊断,笔者收集了近年来45例确诊AS的病例进行分析对比,现总结如下。1临床资料本组45例,其中男42例,女3例;

关键词：强直性脊柱炎影像学诊断关节面脊柱强直进行性炎症韧带组织关节间隙类风湿因子测定影像学检

维普期刊数据库评论

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脑血管病康复护理体会

医学信息 2009年第5期22卷 743-744页

作者：刘华荣周杨杰王磊山东省莒县人民医院

目的为脑血管患者康复提供指导,促进心理和生理健康,提高其生活质量。方法回顾性分析170例脑血管患者的康复护理,从环境、生活、功能恢复、体能锻炼等多方面进行康复护理指导。结果通过多方面康复护理,大多数患者能自理生活,加快了康复... 详细信息

目的为脑血管患者康复提供指导,促进心理和生理健康,提高其生活质量。方法回顾性分析170例脑血管患者的康复护理,从环境、生活、功能恢复、体能锻炼等多方面进行康复护理指导。结果通过多方面康复护理,大多数患者能自理生活,加快了康复过程。结论脑血管患者是一个大群体,做好其康复护理,能获得巨大的社会效益。

关键词：脑血管康复护理

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鼻咽癌的CT检查及临床诊断价值探究

大医生 2019年第1期4卷 168-169页

作者：周杨杰刘华荣莒县人民医院医学影像科山东日照276500

目的探讨CT检查对鼻咽癌的临床诊断价值。方法选取2016年11月至2017年11月在本院进行就诊的鼻咽癌患者40例作为观察对象,对40例患者实施CT检查诊断,观察CT诊断的结果。结果经手术病理组织诊断,40例患者均为鼻咽癌疾病,而CT检查检出鼻咽... 详细信息

目的探讨CT检查对鼻咽癌的临床诊断价值。方法选取2016年11月至2017年11月在本院进行就诊的鼻咽癌患者40例作为观察对象,对40例患者实施CT检查诊断,观察CT诊断的结果。结果经手术病理组织诊断,40例患者均为鼻咽癌疾病,而CT检查检出鼻咽癌疾病的患者有40例,诊断准确度达到100%,两组比较差异无统计意义(P> 0.05)。CT检查于海绵窦、茎突后间隙侵犯检出情况进行观察,与手术病理组织比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CT检查诊断在鼻咽癌疾病诊断当中具有重要价值,能够有效提高临床诊断准确度,值得临床推广及应用。

关键词：鼻咽癌 CT检查诊断价值

急性心力衰竭伴容量超负荷住院患者早期应用超滤治疗的有效性和安全性

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中华临床医师杂志（电子版） 2021年第7期15卷 526-531页

作者：刘振良廖宪友周杨杰李万能周德丽贵州省毕节市七星关区人民医院心内科贵州毕节551700

目的评价急性心力衰竭(以下简称“心衰”)伴容量超负荷患者入院后早期应用超滤治疗的有效性和安全性。方法连续入选2017年1月至2021年1月于贵州省毕节市七星关区人民医院心内科(重症监护病区)住院的急性心衰伴容量超负荷患者,采用随机... 详细信息

目的评价急性心力衰竭(以下简称“心衰”)伴容量超负荷患者入院后早期应用超滤治疗的有效性和安全性。方法连续入选2017年1月至2021年1月于贵州省毕节市七星关区人民医院心内科(重症监护病区)住院的急性心衰伴容量超负荷患者,采用随机数字表法分为药物治疗组和超滤治疗组,前者给予标准抗心衰药物治疗基础上强化利尿治疗,后者在标准抗心衰药物治疗基础上于入院24 h内使用心衰专用超滤设备进行超滤治疗。观察有效性指标,包括随机后24 h体质量、血浆N末端B型利钠肽前体(NT-proBNP)及中心静脉压(CVP)的下降情况,此外,记录住院时间和出院后随访90 d内心衰再住院率。安全性指标包括超滤治疗前后血压、心率、呼吸频率等生命体征变化及实验室指标的变化。结果共有198例住院急性心衰患者纳入研究,药物治疗组100例,超滤治疗组98例。药物治疗组24 h内静脉呋塞米剂量为(108±27)mg(范围80~200 mg);超滤治疗组24 h内超滤治疗次数为(2±1)次,超滤治疗持续时间为(19±2)h(范围14~24 h),累计超滤量为(2896±921)ml(范围660~5100 ml)。与药物治疗组比较,超滤治疗组随机后24 h体质量[(-2.8±1.9)kg vs(-1.9±1.1)kg]、血浆NT-proBNP水平[-8430(-16052,-5780)pg/ml vs-5780(-12070,-3630)pg/ml]及CVP[(-12±5)cmH2O vs(-9±4)cmH2O]下降更明显,差异均有统计学意义(P0.05),血常规指标变化也在临床判定的安全范围内。结论急性心衰伴容量超负荷患者住院后早期应用心衰专用超滤设备治疗能够有效减轻容量超负荷,而且安全性良好。

关键词：心力衰竭急性超滤早期有效性安全性