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粒细胞集落刺激因子及其受体通过JAK2/STAT3信号通路促进食管鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化

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肿瘤学杂志 2024年第2期30卷 91-98页

作者：侯文静崔渊博孙晓燕刘嘉吕朋举王进武曹巍郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南郑州450007 林州市肿瘤医院河南林州456550

[目的]探讨粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony-stimulating factor,G-CSF)及G-CSF受体(G-CSF receptor,G-CSFR)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)细胞增殖、迁移和上皮间质转化中的作用。[方法]48例ESCC组织来自2019年1—9月在林州市肿瘤医院行食管癌根治术的患者。采用qRT-PCR检测ESCC组织及细胞系(KYSE70、KYSE150、KYSE450和Het-1A)中G-CSFR m RNA的表达,流式细胞术检测ESCC细胞系中G-CSFR阳性细胞百分率。CCK-8法、划痕实验、Transwell实验和流式细胞术分别检测rhG-CSF对KYSE450和KYSE150细胞增殖、迁移和JAK2/STAT3信号通路相关分子的影响。Western Blot检测E-cadherin、Ncadherin和Vimentin蛋白的表达。[结果]G-CSFR mRNA在ESCC组织和细胞系中的表达水平均显著高于正常食管上皮组织和正常食管上皮细胞系(P均<0.05)。G-CSFR阳性细胞率在ESCC细胞系中显著高于正常食管上皮细胞系(P均<0.01)。G-CSFR mRNA的高表达与ESCC患者的TNM分期相关(χ^(2)=5.421,P=0.020)。KYSE150和KYSE450细胞经不同浓度rhG-CSF处理后,与对照组相比,增殖活性显著增加(P均<0.01),而在加入JAK2/STAT3抑制剂AG490后,增殖活性显著减弱(P均<0.01)。与对照组相比,G-CSF(20 ng/mL)组KYSE150和KYSE450细胞划痕愈合率和迁移细胞数明显增加(P均<0.01),p-JAK2和p-STAT3水平显著增加(P均<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达显著增加,E-cadherin蛋白表达显著下降(P均<0.05)。而在加入AG490阻断JAK2/STAT3通路后,KYSE150和KYSE450细胞N-cadherin和Vimentin蛋白表达显著下降,E-cadherin蛋白表达显著增加(P均<0.05)。[结论]G-CSFR在ESCC中高表达,G-CSF/G-CSFR通过激活JAK2/STAT3信号通路促进ESCC细胞的增殖、迁移和上皮间质转化。

关键词：食管鳞状细胞癌增殖迁移上皮间质转化粒细胞集落刺激因子粒细胞集落刺激因子受体

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蒺藜防白缓释滴丸的提取工艺优化

中药材 2016年第1期39卷 147-149页

作者：詹峰何勐丁效良吕朋举王晓飞周丽娟郑州大学附属郑州中心医院药学部河南郑州450007 郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南郑州450007

目的:优选蒺藜防白缓释滴丸的最佳提取工艺。方法:采用正交试验设计,以HPLC法测定的干膏中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷总量为评价指标,优选水提取工艺。采用单因素法,以欧前胡素提取率为考察指标,优选白芷的醇提取工艺。结果:优选... 详细信息

目的:优选蒺藜防白缓释滴丸的最佳提取工艺。方法:采用正交试验设计,以HPLC法测定的干膏中升麻素苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷总量为评价指标,优选水提取工艺。采用单因素法,以欧前胡素提取率为考察指标,优选白芷的醇提取工艺。结果:优选的最佳水提取工艺为:加8倍量水,煎煮3次,每次1 h;白芷的最佳醇提工艺为:95%乙醇回流提取3次,每次1 h。结论:优选的提取工艺简便、稳定,适合工业化生产。

关键词：蒺藜防白缓释滴丸提取工艺

靶向ESCCAL_1基因的siRNA纳米复合物的制备及体外对食管癌EC-9706细胞的抑制作用

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中国药理学通报 2017年第12期33卷 1749-1753页

作者：韩鹏黎孙蕾吕朋举龚芬芬夏天曹巍郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南郑州450007 加州大学纳米研究所

目的制备装载靶向ESCCAL_1基因的siRNA纳米复合物,并考察其体外对食管癌EC-9706细胞增殖的抑制作用及对ESCCAL_1表达的影响。方法采用溶胶-凝胶法制备MSNP,通过表面修饰阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)使其带有正电荷,能... 详细信息

目的制备装载靶向ESCCAL_1基因的siRNA纳米复合物,并考察其体外对食管癌EC-9706细胞增殖的抑制作用及对ESCCAL_1表达的影响。方法采用溶胶-凝胶法制备MSNP,通过表面修饰阳离子聚合物聚乙烯亚胺(polyethylenimine,PEI)使其带有正电荷,能够与带负电的ESCCAL_1siRNA相结合;纳米粒度仪、透射电镜测定纳米复合物的粒径和电位;凝胶电泳测定其对siRNA的包封率;MTT法检测纳米复合物体外对EC-9706细胞增殖的抑制作用;荧光显微镜观察纳米复合物中siRNA被EC-9706细胞摄取的情况;RT-PCR法检测其对EC-9706细胞中ESCCAL_1 LncRNA表达的影响。结果纳米粒度仪、透射电镜测得所合成的MSNP表面介孔直径约3~5 nm,分散性较好,尺寸较均一;能明显抑制EC-9706细胞的增殖(P<0.05),72h抑制率为(54.93±2.6)%;其装载的siRNA能被EC-9706细胞有效摄取;能有效沉默EC-9706细胞中ESCCAL_1,沉默效率为69.5%。结论采用该方法可制备包封率较高的肿瘤靶向纳米复合物,其介导的siRNA能有效抑制食管癌EC-9706细胞的体外增殖和沉默EC-9706细胞中ESCCAL_1表达。

关键词：食管鳞状细胞癌特异相关LncRNA转录物1 siRNA 肿瘤靶向性基因治疗食管癌 EC-9706细胞

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杜氏盐藻电击转化方法的系统优化

生物工程学报 2009年第4期25卷 520-525页

作者：吕朋举闫红霞李杰刘红涛卢雪景薛乐勋郑州大学生物工程系细胞生物学研究室郑州450052

本研究系统分析了盐藻生长状态、电击条件、电击缓冲液成分和质粒浓度等条件对电击转化效率的影响。实验结果表明:正常接种后培养7d对数生长中期的盐藻细胞,在25μF、0.8kV的电击条件下加入终浓度为10μg/mL的质粒可使盐藻电击转化效率... 详细信息

本研究系统分析了盐藻生长状态、电击条件、电击缓冲液成分和质粒浓度等条件对电击转化效率的影响。实验结果表明:正常接种后培养7d对数生长中期的盐藻细胞,在25μF、0.8kV的电击条件下加入终浓度为10μg/mL的质粒可使盐藻电击转化效率达到1.85‰;电击缓冲液中加入0.4mol/L的甘油可使转化效率显著提高至2.03‰(P<0.05)。在上述优化电击体系下,运用3种不同质粒分别转化盐藻细胞后获得的转化效率无显著差异。通过对电击转化中相关因素的优化,本研究建立了一种适用于杜氏盐藻的高效稳定的电击转化体系,为杜氏盐藻的转基因研究提供有效方法。

关键词：杜氏盐藻电击转化效率转基因研究

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水利业务系统个人信息安全保护手段

河南水利与南水北调 2018年第5期47卷 89-90页

作者：宋博李亚吕朋举河南省水利信息中心

河南省水利信息化建设得到了快速发展,雨水情测报、水土保持、综合办公、行政审批、电子邮件等重要部门都实现了信息化运行。随着移动互联和政务公开的不断发展,越来越多的安全隐患出现,不仅影响了业务系统的正常运行,也使个人信息特别... 详细信息

河南省水利信息化建设得到了快速发展,雨水情测报、水土保持、综合办公、行政审批、电子邮件等重要部门都实现了信息化运行。随着移动互联和政务公开的不断发展,越来越多的安全隐患出现,不仅影响了业务系统的正常运行,也使个人信息特别是敏感信息暴露无疑。做好水利业务系统敏感信息保护工作既是保障水利信息化业务安全运行的需要,也是网络安全法的基本要求。

关键词：水利个人信息等级保护安全

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安全扫描技术在水利信息的应用

河南水利与南水北调 2018年第4期47卷 75-75,88页

作者：吕朋举刘子涵赵倩倩河南省水利信息中心

信息化技术不断发展的今天,公文交换、办公系统、电子政务等在水利信息化得到广泛应用。在享受着信息社会带来快速便捷同时,也要面对信息化中所带来的安全问题,因此信息化安全检漏技术也成为了重要的研究话题。漏洞扫描,通过扫描就将信... 详细信息

信息化技术不断发展的今天,公文交换、办公系统、电子政务等在水利信息化得到广泛应用。在享受着信息社会带来快速便捷同时,也要面对信息化中所带来的安全问题,因此信息化安全检漏技术也成为了重要的研究话题。漏洞扫描,通过扫描就将信息化系统进行检测,发现其中可被利用的漏洞。在黑客攻击前提前进入防御。提高系统安全等级保护要求,也保证了信息化发展应用安全可靠运行。

关键词：水利漏洞扫描安全

间充质干细胞在成人隐匿性自身免疫性糖尿病患者中免疫抑制作用的研究

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中国糖尿病杂志 2021年第10期29卷 763-773页

作者：许玲玉张丰姣张辉马保东吕朋举孙蕾靳冉冉岳寒康志强郑州大学附属郑州中心医院内分泌科 450001 郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心 450001 河南省人民医院干细胞再生医学中心

目的探讨脐带间充质干细胞(MSCs)对LADA患者单核细胞衍生的树突状细胞(DCs)的免疫调节作用。方法选取5例LADA患者外周血DCs与MSCs进行共培养(MSCs+DCs组),之后刺激自体T细胞。流式细胞术检测DCs组成熟和活化水平、CD3^(+)T、Treg、Th17... 详细信息

目的探讨脐带间充质干细胞(MSCs)对LADA患者单核细胞衍生的树突状细胞(DCs)的免疫调节作用。方法选取5例LADA患者外周血DCs与MSCs进行共培养(MSCs+DCs组),之后刺激自体T细胞。流式细胞术检测DCs组成熟和活化水平、CD3^(+)T、Treg、Th17细胞比例,ELISA法检测细胞培养上清中TGF-β、前列腺素E2(PGE-2)、IL-10和IL-6水平,流式多因子检测法测定细胞培养上清T细胞因子水平,全转录组测序分析筛选新的治疗靶点。结果MSCs与DCs共培养后,调节性DCs(regDC)增加,同时TGF-β、PGE-2、IL-10和IL-6数量显著增加。两组与T细胞共培养结果显示,MSCs+DCs组IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-13和TGF-β表达水平升高(P<0.05),INF-γ、TNF-α和IL-17A表达水平降低(P<0.05);MSCs+DCs组T细胞增殖活化水平显著降低,MSCs+DCs组Th17细胞比例降低(P<0.05),Treg细胞比例增加(P<0.05)。结论在LADA中,MSCs能在体外诱导未成熟DCs(imDCs)分化生成CD11b^(high)1a^(low)CD11c^(low)regDCs,表现出免疫抑制作用,这些DCs有助于抑制T细胞介导对胰岛β细胞的破坏,促进MSC发挥抗炎作用。

关键词：成人隐匿性自身免疫性糖尿病脐带间充质干细胞树突状细胞免疫抑制

河南省水利业务系统容灾平台高可用研究与应用

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河南水利与南水北调 2017年第9期46卷 92-93页

作者：刘克武李亚吕朋举河南省水利信息中心

随着信息技术的飞速发展,社会需求的刺激,河南省水利业务系统呈几何增长,随之水利业务应用系统的稳定性和高可用性就显得日益重要,为有效地防止因本地网络的中断或业务系统的故障引起的数据丢失和服务不可用,研究和建设河南省水利业务... 详细信息

随着信息技术的飞速发展,社会需求的刺激,河南省水利业务系统呈几何增长,随之水利业务应用系统的稳定性和高可用性就显得日益重要,为有效地防止因本地网络的中断或业务系统的故障引起的数据丢失和服务不可用,研究和建设河南省水利业务系统容灾平台高可用,实现若生产端服务器故障或宕机,应用服务自动或手动切换到容灾端的服务器上,由其上对应的应用对外提供服务,关键业务系统达到"RPO≈0,RTO<5 m"的目标,保证河南省水利业务系统的连续性。

关键词：容灾高可用水利业务系统

纳米颗粒对人食管癌EC-9706、EC-109细胞增殖和凋亡的影响

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中国药理学通报 2016年第6期32卷 789-794页

作者：韩鹏黎孙蕾吕朋举龚芬芬马超陈国朱怡然夏天曹巍郑州大学附属郑州中心医院转化医学中心河南郑州450007 华中师范大学生命科学学院湖北武汉430000

目的研究氧化铜(CuO)、氧化锌(ZnO)、二氧化钛(TiO_2)纳米颗粒在体外对人食管鳞状癌细胞系EC-9706和EC-109增殖的影响及其部分作用机制。方法使用透射电镜(TEM)、动态光散射(DLS)鉴定纳米颗粒物的理化性质,然后将不同浓度的TiO_2、CuO、... 详细信息

目的研究氧化铜(CuO)、氧化锌(ZnO)、二氧化钛(TiO_2)纳米颗粒在体外对人食管鳞状癌细胞系EC-9706和EC-109增殖的影响及其部分作用机制。方法使用透射电镜(TEM)、动态光散射(DLS)鉴定纳米颗粒物的理化性质,然后将不同浓度的TiO_2、CuO、ZnO(5~80 mg·L^(-1))与体外培养的EC-9706和EC-109细胞孵育,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞生长抑制率,流式细胞术(FCM)法检测细胞周期及凋亡率,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,蛋白免疫印迹法检测细胞中Bcl-2和caspase-3蛋白表达情况。结果实验所用的纳米CuO、ZnO、TiO_2颗粒为球形,粒径分别为12、20.6、12 nm。在水中与细胞培养液中聚集成较大颗粒并带负电。随着纳米颗粒浓度的增加,纳米CuO和ZnO颗粒可剂量依赖性抑制食管鳞癌细胞的增殖,G_0/G_1期细胞的比率上调,G_2/M期的比率下降,并促进凋亡率增加,侵袭力下降;纳米颗粒处理48 h后,与对照组相比,活化caspase-3表达量明显升高,Bcl-2表达量明显下降(P<0.05)。纳米TiO_2颗粒对食管鳞癌细胞的增殖、凋亡和侵袭能力无明显的影响。结论与纳米TiO_2相比,一定浓度的CuO和ZnO纳米颗粒可有效抑制食管鳞癌细胞的生长,阻滞细胞周期于G_0/G_1期,并诱导其凋亡,这可能是其抑制食管癌细胞功能的作用机制之一。

关键词：食管癌氧化铜纳米颗粒氧化锌纳米颗粒二氧化钛纳米颗粒细胞增殖凋亡