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作者：吕凤香重庆医科大学

学位级别：硕士

第一部分DLX1过表达对人骨肉瘤细胞恶性生物学行为及成骨分化的影响目的探讨DLX1过表达对人骨肉瘤细胞MG63恶性生物学行为及成骨分化的影响。方法采用构建有DLX1基因的重组腺病毒(adenovirus,Ad)Ad DLX1和空载腺病毒Ad RFP,分别感染人... 详细信息

第一部分DLX1过表达对人骨肉瘤细胞恶性生物学行为及成骨分化的影响目的探讨DLX1过表达对人骨肉瘤细胞MG63恶性生物学行为及成骨分化的影响。方法采用构建有DLX1基因的重组腺病毒(adenovirus,Ad)Ad DLX1和空载腺病毒Ad RFP,分别感染人骨肉瘤细胞MG63,分为DLX1实验组(Ad DLX1感染组)和RFP对照组(Ad RFP感染组),观察细胞荧光表达情况并以RT-PCR和Western blot验证DLX1的表达情况;Transwell实验检测MG63细胞迁移和侵袭;DAPI染色和流式细胞术检测MG63细胞凋亡;CCK-8检测MG63细胞增殖;碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色和ALP读数分析MG63细胞早期成骨能力,Western blot检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的蛋白表达,茜素红染色检测细胞晚期成骨能力;RT-PCR初筛相关信号通路,Western blot验证初筛阳性信号分子的蛋白表达情况。结果*** DLX1和Ad RFP分别感染MG63细胞后,与RFP对照组相比,Ad DLX1能显著增加骨肉瘤细胞MG63中DLX1的表达。***63细胞中DLX1过表达后,与RFP对照组相比,细胞迁移能力和侵袭能力下降。***63细胞中DLX1过表达后,与RFP对照组相比,过表达DLX1对细胞增殖、凋亡无明显影响。***63细胞中DLX1过表达后,与RFP对照组相比,过表达DLX1对细胞成骨分化无明显影响。***63细胞中DLX1过表达后,与RFP对照组相比,DLX1过表达可上调β-catenin m RNA和蛋白的表达。结论***63细胞中DLX1过表达后,对MG63细胞的恶性生物学行为有不同程度的影响:可抑制MG63细胞的迁移和侵袭,对MG63细胞的增殖和凋亡无显著影响;对MG63细胞成骨分化无明显促进作用。***1在MG63细胞中过表达后,Wnt/β-catenin信号通路参与DLX1对MG63细胞生物学行为的调控。第二部分DLX1联合BMP9对人骨肉瘤细胞恶性生物学行为及成骨分化的影响目的探讨DLX1联合BMP9对人骨肉瘤细胞MG63恶性生物学行为及成骨分化的影响。方法采用构建有DLX1和BMP9基因的重组腺病毒Ad DLX1和Ad BMP9,单独或联合感染人骨肉瘤MG63细胞,分为RFP组(Ad RFP感染组)、BMP9组(Ad BMP9+Ad RFP感染组)、DLX1+BMP9组(Ad DLX1+Ad BMP9感染组)、DLX1组(Ad DLX1+Ad GFP感染组),观察细胞荧光表达情况并以RT-PCR和Western blot验证DLX1、BMP9m RNA和蛋白表达情况;Transwell实验检测MG63细胞迁移和侵袭;DAPI染色和流式细胞术检测MG63细胞凋亡;CCK-8检测MG63细胞增殖;ALP染色和ALP读数分析细胞早期成骨能力,Western blot检测骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的蛋白表达,茜素红染色检测细胞晚期成骨能力;采用RT-PCR初筛相关信号通路,Western blot验证初筛阳性信号分子的蛋白表达情况。结果*** DLX1单独感染MG63细胞后,细胞中DLX1的m RNA和蛋白表达上调;Ad BMP9单独感染MG63细胞后,细胞中BMP9的m RNA和蛋白表达上调;Ad DLX1和Ad BMP9联合感染MG63细胞后,细胞中DLX1、BMP9的m RNA和蛋白表达均上调。2.与RFP组相比,BMP9组、DLX1+BMP9组、DLX1组中MG63细胞迁移和侵袭能力均下降,且DLX1+BMP9组对迁移和侵袭能力的抑制较BMP9组和DLX1组有所增加。3.与RFP组相比,BMP9组、DLX1+BMP9组中MG63细胞增殖能力均下降,且两组MG63细胞受到的增殖抑制无明显差异;DLX1组细胞增殖较RFP组无明显差异。4.与RFP组相比,BMP9组、DLX1+BMP9组、DLX1组中MG63细胞凋亡无明显差异。5.与RFP组相比,BMP9组中MG63细胞ALP活性、OPN蛋白表达和钙盐沉积有所增加,但增加程度有限;DLX1+BMP9组中MG63细胞ALP活性增强、OPN蛋白表达上调、钙盐沉积明显增加;DLX1组中MG63细胞ALP活性、OPN蛋白表达和钙盐沉积无明显增加。结论***1单独作用于人骨肉瘤细胞MG63时,可抑制MG63细胞迁移和侵袭,对MG63细胞凋亡和增殖无明显影响;不能促进MG63细胞成骨分化。***9单独作用于人骨肉瘤细胞MG63时,可抑制MG63细胞迁移、侵袭和增殖,对MG63细胞凋亡无明显影响;对MG63细胞成骨分化的促进作用较弱。***1与BMP9联合作用

关键词： DLX1 骨肉瘤恶性生物学行为成骨分化 DLX1 BMP9 骨肉瘤恶性生物学行为成骨分化

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基于SPOC的混合式教学对高中生英语阅读的影响研究

基于SPOC的混合式教学对高中生英语阅读的影响研究

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作者：吕凤香湖南理工学院

学位级别：硕士

《普通高中英语课程标准(2020年修订版)》提出要将现代信息技术融入中学英语教学。然而,常规课堂多以教师为中心的线下课堂教学,教师缺乏信息技术,教学手段单一,内容更新慢。信息化时代,融合线下与线上教学的混合式教学(Blended Learni... 详细信息

《普通高中英语课程标准(2020年修订版)》提出要将现代信息技术融入中学英语教学。然而,常规课堂多以教师为中心的线下课堂教学,教师缺乏信息技术,教学手段单一,内容更新慢。信息化时代,融合线下与线上教学的混合式教学(Blended Learning)应运而生。基于SPOC(Small Private Online Course,小规模限制性在线课程)的混合式教学将师生课堂面授与在线教学相结合,依托在线课程服务于小规模的特殊学习群体,建立语言交际情境,为学生创造新的学习途径。当前,混合式教学研究多停留在模式与理论的探讨,针对高中生的SPOC混合式教学实证研究较少。本研究以联通主义理论、人本主义学习理论与克拉申输入假说理论为指导,探讨以下2个问题:1.基于SPOC的混合式教学对高中生的英语阅读态度有何影响?2.基于SPOC的混合式教学对高中生的英语阅读理解能力有何影响?本研究以岳阳市某中学高一年级两个班级,对照班和实验班各52名学生为研究对象,开展为期16周的实验。实验班采用基于SPOC的混合式教学方式,对照班采用常规课堂教学方式。通过定性和定量相结合的研究方法,采用SPSS 23.0软件对实验数据进行数据分析。研究发现:(1)基于SPOC的混合式教学有利于正向改变学生的英语阅读态度。有效地调动了学生的情感态度、认知态度与意动态度,增强学生的阅读兴趣,培养学习者积极的阅读态度。(2)基于SPOC的混合式教学,在比较分类与整合诠释能力的提升上,实验班与对照班存在显著性差异。而在演绎归纳能力上,两班差异相对较小。

关键词： SPOC 混合式教学阅读理解能力阅读态度

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自然干燥紫萼藓总RNA提取方法

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植物研究 2006年第6期26卷 715-717页

作者：沙伟闫苗苗吕凤香齐齐哈尔大学生命科学与工程学院齐齐哈尔161006

介绍一种适合富含酚类、萜类等次生物质的干燥紫萼藓的总RNA的提取方法—SDS/酸酚法。采用SDS做为去污剂,用水饱和酚、氯仿和异戊醇进行抽提以去除蛋白、酚类等次生物质,醋酸钾和无水乙醇去除多糖等物质,最后LiC l沉淀获得总RNA。该方... 详细信息

介绍一种适合富含酚类、萜类等次生物质的干燥紫萼藓的总RNA的提取方法—SDS/酸酚法。采用SDS做为去污剂,用水饱和酚、氯仿和异戊醇进行抽提以去除蛋白、酚类等次生物质,醋酸钾和无水乙醇去除多糖等物质,最后LiC l沉淀获得总RNA。该方法不但获得了完整性好和纯度高的RNA,而且操作简单,成本也较低,对其他富含酚类、萜类等次生物质的干燥植物组织的总RNA的提取具有借鉴意义。

关键词：紫萼藓 RNA提取 SDS

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儿童髋关节一过性滑膜炎发病时间特征及与气候因素的相关性

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临床儿科杂志 2016年第11期34卷 834-837页

作者：赵天鑫康权董姿杏吕凤香仇超罗庆重庆医科大学附属儿童医院儿科学重庆市重点实验室儿科研究所儿童肿瘤研究室儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地重庆400014

目的探讨儿童髋关节一过性滑膜炎(TSH)发病的时间特征,及其发病情况与气候因素之间的联系。方法选取2008年至2012年收治的1 401例TSH患儿的临床资料,收集同期的月平均气温、月平均气压、月平均湿度、月平均风速、月日照总时数和月总降... 详细信息

目的探讨儿童髋关节一过性滑膜炎(TSH)发病的时间特征,及其发病情况与气候因素之间的联系。方法选取2008年至2012年收治的1 401例TSH患儿的临床资料,收集同期的月平均气温、月平均气压、月平均湿度、月平均风速、月日照总时数和月总降水量等气象资料,采用卡方-拟合优度检验分析TSH发病的时间特征,运用相关分析和逐步线性回归方法探讨TSH发病与各气象因素的关系。结果 TSH发病以春夏季为主(P<0.001),3月份是发病高峰(P<0.001),10月份发病数最少(P<0.001)。TSH的月发病数与月平均湿度呈负相关(r=-0.466,P<0.001),与月平均风速、月日照总时数呈正相关(r=0.286、0.262,P均<0.05);逐步回归分析中只有月平均湿度对进入回归模型(β=-0.470,P<0.001)。结论 TSH的发病具有明显的时间周期性,在低湿度的气象条件下更容易发生。

关键词：髋关节一过性滑膜炎气候因素儿童

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靶向抑制Id1基因调控Wnt信号通路促进骨肉瘤MG63细胞凋亡

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肿瘤 2017年第9期37卷 909-916页

作者：董姿杏仇超康权吕凤香赵天鑫罗庆重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿童肿瘤研究室儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的:研究分化抑制因子1(inhibitor of differentiation 1,Id1)基因对人骨肉瘤细胞MG63凋亡的影响,并探讨可能的作用机制。方法 :通过重组腺病毒感染的方法将特异性针对Id1基因的Id1-si RNA转入骨肉瘤细胞MG63中,分别采用半定量RT-PCR... 详细信息

目的:研究分化抑制因子1(inhibitor of differentiation 1,Id1)基因对人骨肉瘤细胞MG63凋亡的影响,并探讨可能的作用机制。方法 :通过重组腺病毒感染的方法将特异性针对Id1基因的Id1-si RNA转入骨肉瘤细胞MG63中,分别采用半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测Id1 m RNA和蛋白的表达水平;AnnexinⅤ-FITC单染法及DAPI染色法检测对细胞凋亡的影响,FCM法检测对细胞周期分布的影响。蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白Bcl-2和survivin,以及Wnt信号通路关键蛋白β-链蛋白(β-catenin)、受体酪氨酸激酶样孤儿受体(2receptor tyrosine kinase-like orphan receptor 2,ROR2)和CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer-binding protein homologous protein,CHOP)蛋白的表达水平。结果:采用重组腺病毒Ad-Id1-siR NA感染MG63细胞后,Id1 mR NA及蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.05);AnnexinⅤ-FITC单染法和DAPI染色检测结果显示,沉默Id1基因表达后MG63细胞的凋亡率明显提高(P值均<0.05);半定量RT-PCR和蛋白质印迹法检测结果显示,抗凋亡因子Bcl-2和survivin mR NA及蛋白的表达水平均明显下调(P值均<0.05);蛋白质印迹法检测结果显示,Wnt信号通路关键蛋白β-catenin以及Wnt通路相关蛋白ROR2和CHOP的表达水平均明显下调(P值均<0.05)。结论 :靶向沉默Id1基因表达能促进骨肉瘤细胞的凋亡,其作用可能与抑制Wnt信号通路的活性有关。

关键词：骨肉瘤分化抑制蛋白质类 Wnt信号通路细胞凋亡

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藓类植物RNA提取方法研究

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广西植物 2008年第3期28卷 329-331,294页

作者：闫苗苗魏光成沙伟吕凤香滨州医学院山东烟台264003 齐齐哈尔大学生命科学与工程学院黑龙江齐齐哈尔161006

根据提取RNA质量等方面比较了4种RNA提取方法提取东亚砂藓正常生长和干燥处理后的组织的总RNA的效果。结果表明改良的SDS法能提取高质量的RNA。该方法还可用于紫萼藓等藓类植物RNA的提取。

关键词：藓类东亚砂藓 RNA 提取

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DLX1过表达对骨肉瘤细胞MG63迁移、侵袭、凋亡和增殖的影响

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中国细胞生物学学报 2017年第9期39卷 1165-1172页

作者：吕凤香康权仇超董姿杏罗庆重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆400014 重庆医科大学附属儿童医院肝胆外科重庆400014

前期经基因芯片筛选发现,同源盒基因1(distal-less homeobox 1,DLX1)低表达是导致骨肉瘤形成的关键基因。该研究在此基础上,拟通过过表达DLX1探讨其对骨肉瘤细胞MG63迁移和侵袭等生物学特征的影响,并初步揭示其作用途径。采用含DLX1基... 详细信息

前期经基因芯片筛选发现,同源盒基因1(distal-less homeobox 1,DLX1)低表达是导致骨肉瘤形成的关键基因。该研究在此基础上,拟通过过表达DLX1探讨其对骨肉瘤细胞MG63迁移和侵袭等生物学特征的影响,并初步揭示其作用途径。采用含DLX1基因的重组腺病毒Ad DLX1(adenovirus distal-less homeobox 1)和空载腺病毒Ad RFP(adenovirus red fl uorescence protein)分别感染人骨肉瘤细胞MG63,观察细胞荧光表达情况,并用RT-PCR和Western blot验证DLX1表达水平;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力;DAPI染色和流式细胞术检测细胞凋亡水平;CCK-8检测细胞增殖能力;RT-PCR和Western blot检测Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的表达。结果显示,与对照组(Ad RFP感染组)相比,Ad DLX1能显著增加MG63细胞中DLX1的表达,并导致细胞迁移和侵袭能力下降,但细胞增殖和凋亡情况无明显改变。DLX1过表达还可以上调Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin的表达。该研究表明,DLX1可通过Wnt/β-catenin信号通路抑制骨肉瘤细胞MG63的迁移和侵袭。

关键词： DLX1 MG63 迁移侵袭凋亡增殖 β-catenin

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Id1基因对人骨肉瘤细胞恶性逆转向成骨分化的影响

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第三军医大学学报 2016年第4期38卷 344-349页

作者：仇超康权迭小红罗光金吕凤香肖程罗庆重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所儿童肿瘤研究室儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市儿童发育重大疾病诊治与预防国际科技合作基地重庆400014

目的探讨分化抑制因子1(inhibitor of differentiation factor 1,Id1)对人骨肉瘤细胞MG63恶性逆转向成骨分化的影响。方法用重组腺病毒调控MG63细胞中Id1过表达后,RT-PCR及Western blot检测验证Id1的表达情况,CCK-8检测细胞增殖能力,划... 详细信息

目的探讨分化抑制因子1(inhibitor of differentiation factor 1,Id1)对人骨肉瘤细胞MG63恶性逆转向成骨分化的影响。方法用重组腺病毒调控MG63细胞中Id1过表达后,RT-PCR及Western blot检测验证Id1的表达情况,CCK-8检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell实验检测细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期,ALP读数法检测成骨分化早期指标ALP的活力。结果 Ad Id1重组腺病毒可以使MG63细胞中的Id1表达量增高,Adsi Id1重组腺病毒可以使MG63细胞中的Id1表达量降低(P<0.05);Id1过表达后,MG63细胞的增殖能力、迁移能力、侵袭能力等恶性生物学行为均增强,G1期细胞比例降低,Id1表达量下调后则逆转MG63细胞的恶性生物学行为,G1期细胞比例增高(P<0.05);Id1表达量下调后,正常成骨分化的早期指标碱性磷酸酶(ALP)表达量增高(P<0.05)。结论抑制Id1基因表达可以促使骨肉瘤的恶性生物学行为逆转并诱导骨肉瘤细胞发生成骨分化。

关键词：骨肉瘤分化抑制因子增殖迁移侵袭分化

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出口型大葱的栽培技术

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中国农业信息 2011年第4期 27-28页

作者：吕凤香刘玉玲盛利娟山东省济宁市嘉祥县农业局

为适应出口型大葱对外观形状和平直的要求,济宁市技术推广部门逐步引进、试验、示范、推广了一批出口型大葱品种,增产增收效果明显,因其抗逆性强,适应性广,商品性良好,产量高,效益好深受广大葱农的青睐,推广面积逐年增大,现将配套栽培... 详细信息

为适应出口型大葱对外观形状和平直的要求,济宁市技术推广部门逐步引进、试验、示范、推广了一批出口型大葱品种,增产增收效果明显,因其抗逆性强,适应性广,商品性良好,产量高,效益好深受广大葱农的青睐,推广面积逐年增大,现将配套栽培管理技术介绍如下。

关键词：大葱出口型葱苗可湿性粉剂农药剂型葱蓟马紫斑病

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DLX1联合BMP9促进人骨肉瘤细胞向成骨分化

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基础医学与临床 2017年第6期37卷 768-774页

作者：吕凤香康权仇超董姿杏罗庆重庆医科大学附属儿童医院儿科研究所儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿童发育重大疾病国家国际科技合作基地儿科学重庆市重点实验室重庆400014

目的探讨DLX1联合BMP9可否影响人骨肉瘤细胞MG63的成骨分化。方法用构建有DLX1和BMP9基因的重组腺病毒Ad DLX1和Ad BMP9,单独或联合感染MG63细胞,分为DLX1组(Ad DLX1+AdRFP感染组)、DLX1+BMP9组(Ad DLX1+Ad BMP9感染组)、BMP9组(Ad BMP9+AdRFP感染组)、RFP组(AdRFP感染组)。用RT-PCR和Western blot验证DLX1和BMP9的表达情况,Transwell实验检测细胞迁移、侵袭能力;碱性磷酸酶(ALP)染色和读数分析细胞早期成骨能力,茜素红染色检测细胞晚期成骨能力,Western blot检测骨桥蛋白(OPN)蛋白表达水平。结果 Ad DLX1和Ad BMP9感染MG63细胞后,DLX1和BMP9的表达水平上调(P<0.05);与RFP组相比,DLX1组、DLX1+BMP9组和BMP9组细胞迁移能力和侵袭能力下降(P<0.05),DLX1+BMP9组细胞迁移能力和侵袭能力下降更为明显(P<0.05);ALP活性、钙盐沉积和OPN蛋白表达在DLX1+BMP9组和BMP9组增加(P<0.05),且DLX1+BMP9组较BMP9组显著增强(P<0.05)。结论 DLX1与BMP9联合作用可抑制骨肉瘤细胞迁移和侵袭,同时可诱导骨肉瘤细胞向成骨分化。

关键词：骨肉瘤 DLX1 BMP9 恶性生物学行为成骨分化

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