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儿童松质骨成骨细胞体外培养

中华小儿外科杂志 2003年第4期24卷 335-337页

作者：于有张旗涛韩福友吉光荣哈尔滨医科大学附属第二医院小儿外科 150086 哈尔滨医科大学附属第二医院骨外科博士150086

目的　探讨儿童松质骨成骨细胞体外培养条件 ,为儿童骨组织工程研究选择种子细胞。方法　均取自先天性髋脱位患儿加盖手术时多余髂骨 ,术前证实患儿无代谢性骨病 ,未服激素类等药物。取材在手术时进行 ,男 1例 ,女 3例 ,年龄 3～ 7岁。... 详细信息

目的　探讨儿童松质骨成骨细胞体外培养条件 ,为儿童骨组织工程研究选择种子细胞。方法　均取自先天性髋脱位患儿加盖手术时多余髂骨 ,术前证实患儿无代谢性骨病 ,未服激素类等药物。取材在手术时进行 ,男 1例 ,女 3例 ,年龄 3～ 7岁。骨块保持无菌 ,置于无血清培养液中 ,4℃冰箱存放 ,2～ 4h内分离骨细胞。将髂骨松质骨剪碎成骨粒 ,经胰蛋白酶初步消化后 ,采用胶原酶Ⅱ分次消化法 ,获取原代成骨细胞 ,将原代成骨细胞置于含 1 5 %胎牛血清的DMEM F1 2培养基中培养 ,经传代、纯化后 ,绘制细胞生长曲线。成骨细胞的鉴定采用改良Gomori碱性磷酸酶 (ALP)钙钴法染色、ABC法Ⅰ、Ⅲ型胶原染色及放射免疫法测定骨钙素含量。培养期间应用倒置相差显微镜观察细胞形态。结果　经酶消化法得到的儿童成骨细胞 ,呈梭形 ,较饱满。原代细胞胞体较小 ,传代后可呈多角形、梭形或不规则形 ,胞浆内可出现黑色颗粒。ALP染色阳性率 45 %。初次酶消化后的松质骨块经培养后 ,还可以多次消化得到更加纯化的成骨细胞。结论　采用胰蛋白酶及胶原酶的多次消化法获取原代细胞 ,经培养、传代后 ,可得到较为稳定。

关键词：儿童松质骨成骨细胞体外培养胰蛋白酶胶原酶

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南充西河的原生动物

四川动物 1989年第4期8卷 9-11页

作者：戴梦贤吉光荣南充师范学院生物系

本文对南充西河受有机污染后,原生动物种类及数量变化作了初步调查。观察到水环境有机污染的状况,对原生动物区系组成有着重要影响,故应从环境学的角度来考虑划分原生动物的区系。

关键词：原生动物西河四川

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南充西河的底栖无脊椎动物

四川动物 1992年第3期11卷 29-30页

作者：吉光荣代梦贤四川师范学院生物系南充637002

南充西河源于川中丘陵区之西充县境,全长仅70余km,流域面积近1 000km^2,均属农耕区,植被覆盖差,集雨面积小,年径流量偏小且季节变率大。

关键词：底栖动物无脊椎动物

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椎管内硬脊膜外血肿的诊断与治疗

哈尔滨医科大学学报 2005年第6期39卷 548-549页

作者：刘庆鹏吉光荣姜永庆哈尔滨医科大学第二临床医学院脊柱外科黑龙江哈尔滨150086

椎管内硬膜外血肿（spinal epidural hematoma SEH）的特点是起病急，病情进展迅速，若处理不及时，极易造成脊髓功能的不可逆损伤。我院于1997年至2（104年共收治9例患者，现报道如下。[第一段]

关键词：血肿,硬膜外影像学脊髓功能

条件培养对骨髓间质干细胞体外成骨潜能的影响

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中国临床康复 2004年第32期8卷 7120-7121,i001页

作者：吉光荣姚猛王立春张旗涛哈尔滨医科大学附属第二医院脊柱外科黑龙江省哈尔滨市150086

目的:骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)有多种分化的潜能,但其分化并非是一个完全自发的过程,探讨使用条件培养基对MSCs体外成骨潜能的影响,为优化骨组织工程的种子细胞提供实验依据。方法:采用条件培养(A组)与完全培养(B组)... 详细信息

目的:骨髓间质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)有多种分化的潜能,但其分化并非是一个完全自发的过程,探讨使用条件培养基对MSCs体外成骨潜能的影响,为优化骨组织工程的种子细胞提供实验依据。方法:采用条件培养(A组)与完全培养(B组)基两种方法将兔骨髓间质干细胞进行体外培养后,对各组细胞进行形态学观察、组织学检测以及采用碱性磷酸酶(ALP)与骨钙素检测试剂盒进行定量分析,以判断两种培养基对骨髓间质干细胞体外成骨能力的影响。结果:在细胞传代培养中A组细胞增殖速度明显低于B组。A组细胞随培养时间的延长细胞呈多层生长,不发生接触抑制现象。而B组随时间的延长,细胞间逐渐出现接触抑制,细胞分裂停止,逐渐死亡。ALP含量A组为(8.17±0.61)U/L,B组为(5.07±0.49)U/L。骨钙素含量A组为(25.38±1.06)μg/L,B组为(14.37±1.71)μg/L,A,B两组比较差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:体外培养的MSCs具有一定的成骨能力,使用含有地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素C的条件培养基可以大大提高其成骨能力。

关键词：骨髓干细胞成生骨生物医学工程

周围神经移植联合神经营养因子修复脊髓传导束的实验研究

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中华骨科杂志 2005年第12期25卷 731-735页

作者：姚猛王岩松邓小明刘庆鹏吉光荣哈尔滨医科大学附属第二医院脊柱外科 150086 美国加州大学康复医学系脊髓损伤研究所

目的探讨周围神经移植联合神经营养因子修复脊髓传导束的可行性并观察其再生的情况。方法121只Wistar雄性大鼠被随机分成5组,A组(实验组,n=25):在T9水平横行切断脊髓并切除5mm,植入肋间神经和含酸性成纤维因子(acidicfibroblastgrowthfa... 详细信息

目的探讨周围神经移植联合神经营养因子修复脊髓传导束的可行性并观察其再生的情况。方法121只Wistar雄性大鼠被随机分成5组,A组(实验组,n=25):在T9水平横行切断脊髓并切除5mm,植入肋间神经和含酸性成纤维因子(acidicfibroblastgrowthfactor,aFGF)纤维蛋白凝胶;B组(水平对照组1,n=25):同法制备脊髓横断模型,断端间由含aFGF的纤维蛋白凝胶填充;C组(水平对照组2,n=25):同法制备脊髓横断模型,断端间植入肋间神经和不含aFGF的纤维蛋白凝胶;D组(水平对照组3,n=25):同法制备脊髓横断模型,断端间旷置;E组(空白对照组,n=21):仅行椎板切除术。通过BDA顺行神经示踪、FG逆行神经示踪、运动诱发电位(MEP)和大鼠BBB后肢运动功能评分,观察脊髓传导束再生的情况。结果A组在损伤区有BDA标记的神经纤维通过,在颈髓背角和腹侧角、脑干中缝核和红核、网状结构、前庭侧核以及在大脑运动皮层的第V层均发现FG标记阳性的神经细胞数。A组大鼠MEP的平均潜伏期和波幅以及BBB功能评分明显提高,与B、C和D组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论周围神经移植联合神经营养因子能部分修复脊髓传导束。

关键词：脊髓损伤周围神经移植自体神经生长因子类

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柑桔潜叶蛾生物学特性及消长规律研究

四川师范学院学报（自然科学版） 1995年第1期16卷 11-13页

作者：吉光荣四川师范学院生物系

作者于１９９１～１９９２年在南充市郊进行了柑桔潜叶蛾的形态特征、生活习性、生活年史及消长规律研究，为防治柑桔潜叶蛾提供了科学依据。

关键词：桔潜叶蛾形态特征消长规律

神经干细胞缺氧预处理后的内源性保护作用和促红细胞生成素的表达

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中华创伤杂志 2006年第9期22卷 707-709页

作者：孙崇毅姚猛刘庆鹏吉光荣王岩松哈尔滨医科大学附属第二医院脊柱外科 150086

神经干细胞（neural stem cells，NSCs）是具有自我更新能力和多种分化潜能的细胞。体外培养的NSCs移植治疗中枢神经系统包括脊髓损伤成为近年来研究的热点之一。但细胞受绝对数量和移植后局部微环境所限，使其存活率不高，限制了其修... 详细信息

神经干细胞（neural stem cells，NSCs）是具有自我更新能力和多种分化潜能的细胞。体外培养的NSCs移植治疗中枢神经系统包括脊髓损伤成为近年来研究的热点之一。但细胞受绝对数量和移植后局部微环境所限，使其存活率不高，限制了其修复作用，影响了移植效果。笔者通过体外实验，对大鼠NSCs进行缺氧预处理，观察处理后细胞对伤害性刺激的内源性保护作用，并对其机制进行初步的探讨，为进一步提高NSCs移植治疗效果提供理论依据和指导。

关键词：促红细胞生成素缺氧预处理神经干细胞保护作用内源性自我更新能力中枢神经系统移植治疗

转基因修饰的组织工程骨在兔腰椎横突间融合中的应用

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中华创伤杂志 2007年第6期23卷 459-461页

作者：吉光荣姚猛孙崇毅刘建宇王立春哈尔滨医科大学附属第二医院脊柱外科 150086

目的探讨以携带有人骨形态发生蛋白（BMP）-2基因片段的复制缺陷重组腺病毒（Ad—BMP-2）转基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSCs）作为种子细胞，以脱细胞脱钙骨基质材料为支架构建组织工程人工骨用于兔腰椎横突间融合的可行性。方法选... 详细信息

目的探讨以携带有人骨形态发生蛋白（BMP）-2基因片段的复制缺陷重组腺病毒（Ad—BMP-2）转基因修饰的骨髓间充质干细胞（BMSCs）作为种子细胞，以脱细胞脱钙骨基质材料为支架构建组织工程人工骨用于兔腰椎横突间融合的可行性。方法选择18只日本大耳白兔，在L5,6行单节段双侧横突间融合术，依植入融合材料分为3组：A组为转基因修饰的组织工程骨组；B组为自体髂骨组；C组为单纯支架组。每组12侧。术后12周取出融合节段脊柱，通过大体观察、组织学、影像学及生物力学等方法检测脊柱融合情况。结果三组横突间融合成功率分别为84％（10／12）、75％（9／12）和8％（1／12）；组织学、影像学及生物力学检测证实，A、B组成骨活跃，脊柱融合的硬度和强度显著高于C组。结论转基因修饰的组织工程骨用于脊柱融合可以达到很好的治疗效果。

关键词：脊柱融合术干细胞骨形态发生蛋白质类转基因组织工程骨