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三七皂苷通过抑制自噬减轻TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞损伤

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中国实验方剂学杂志 2022年第20期28卷 86-91页

作者：毛稳夏琳颖刘贤莉潘丽萍杜月光浙江中医药大学基础医学院杭州310053 浙江中医药大学生命科学学院杭州310053

目的:探讨三七皂苷(Panax notoginseng saponins,PNS)抗转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))诱导的肾小管上皮细胞损伤的作用及机制。方法:培养NRK-52E肾小管上皮细胞,分为空白组、TGF-β_(1)组、TGF-β_(1)+12.5 mg·L^(-1)PNS组、TGF-β_(1)+25 mg·L^(-1)PNS组、TGF-β_(1)+50 mg·L^(-1)PNS组,PNS干预48 h,收集细胞及上清,采用倒置显微镜观察细胞形态;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测上皮间质转化(EMT)相关蛋白、自噬相关蛋白表达;流式液相多重蛋白定量技术检测炎症因子含量;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:与空白组比较,TGF-β_(1)诱导后细胞呈梭形改变且呈明显的EMT表现,即E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达明显下调(P<0.05),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达明显上调(P<0.05),PNS处理后,大部分细胞形态趋向正常并逆转EMT的发生。同时,与空白组比较,TGF-β_(1)组肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平明显升高,IL-10水平下降,凋亡率增加(P<0.05),PNS作用后,TNF-α水平下降,IL-10水平升高,细胞凋亡率明显下降(P<0.05)。并且TGF-β_(1)能明显上调肾小管上皮细胞自噬相关蛋白Beclin1和自噬相关蛋白微管相关蛋白轻链3Ⅱ/Ⅰ(LC3Ⅱ/Ⅰ)的表达(P<0.05,P<0.01),而PNS抑制其表达。结论:PNS对TGF-β_(1)诱导的肾小管上皮细胞具有保护作用,其机制可能是通过抑制自噬来减轻炎症和凋亡,进而抵抗TGF-β_(1)诱导的损伤。

关键词：三七皂苷肾小管上皮细胞转化生长因子-β1 自噬

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交流电动机变极调速中的功率转矩及机械特性分析

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日用电器 2015年第6期 54-58页

作者：张立刘贤莉广州番禺职业技术学院机电工程学院广州511483 广州珠江灯光科技有限公司技术资源部广州511442

基于感应电动机的T型等效电路及电磁转矩的参数方程,本文中澄清了教科书中三角形/双星形(△/YY)变极调速过程中容易引起误解的两个问题:即变极后线电流与最大/启动电磁转矩的大小问题。通过理论分析与典型的异步电动机参数的数值计算结... 详细信息

基于感应电动机的T型等效电路及电磁转矩的参数方程,本文中澄清了教科书中三角形/双星形(△/YY)变极调速过程中容易引起误解的两个问题:即变极后线电流与最大/启动电磁转矩的大小问题。通过理论分析与典型的异步电动机参数的数值计算结果,我们发现,转差率是影响三相异步电动机输入电流、电磁转矩及功率因数等的重要因素。而且,还建议在介绍异步电动机的电磁转矩参数表达式时,要将磁极对数明确写在公式里,以免对有关变极问题的理论分析产生误解。

关键词：变极调速三相异步电动机 T型等效电路转差率励磁电抗

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平旋推进器模拟试验装置行星式凸轮机构设计

上海工业大学学报 1994年第2期15卷 136-141页

作者：殷鸿梁刘贤莉

本文应用复数矢量方程及包络原理求解凸轮的理论廓线和工作廓线，并根据数控加工检验的要求按等分向径角进行凸轮廓线的精化计算。文中还讨论了这种行星式凸轮机构的传动特性角，并进行了动力学分析计算。

关键词：行星式凸轮机构平旋推进器

原花青素对盲肠结扎穿孔诱导脓毒症小鼠急性肺损伤的保护作用

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中华实验外科杂志 2018年第11期35卷 2109-2111页

作者：刘贤莉陈浩邹雯佳王夏乐汉娥武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属普爱医院胸外科 430033

目的观察原花青素对盲肠结扎穿孔（CLP）诱导脓毒症小鼠的保护作用，探讨其作用机制。方法将36只成年雄性C57βL／6小鼠按随机数表法随机分为Sham组、CLP组及治疗组。采用盲肠结扎穿孔建立脓毒症小鼠模型，Sham组仅做开腹处理，治疗组... 详细信息

目的观察原花青素对盲肠结扎穿孔（CLP）诱导脓毒症小鼠的保护作用，探讨其作用机制。方法将36只成年雄性C57βL／6小鼠按随机数表法随机分为Sham组、CLP组及治疗组。采用盲肠结扎穿孔建立脓毒症小鼠模型，Sham组仅做开腹处理，治疗组则在建模后腹腔注射原花青素（100mg／kg）。观察各组小鼠生存状态并记录72h内死亡情况。另-批小鼠于建模后24h处死，收集外周血及肺组织。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测外周血及肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（1L）-6及IL-1β含量；苏木素-伊红（HE）染色检测肺组织病理变化；精密称量仪称取烘干前后肺组织质量并测定湿／干质量比值；Western blot法检测肺组织胞质及胞核中核因子-κB（NF-κB）p65的蛋白表达情况；ELISA法检测肺组织中NF-κB p65的DNA结合活性。结果Sham组小鼠72h生存率为100％，CLP组小鼠72h生存率仅为20％，而治疗组小鼠72h生存率为46．7％，差异有统计学意义（P=0．005）。建模24h后，与CLP组比较，治疗组小鼠外周血及肺组织中炎性因子TNF-α（214．000±16．310比426．300±22．980，F=111．300，P=0．000；593．300±39．040比936．500±55．360，F=123．600，P=0．000）、IL-6（1020．000±72．150比1741．000±83．710，F=148．400，P=0．000；1107．000±68．530比1830．000±99．190，F=140．500，P=0．000）及IL-1β（507．200±28．780比820．700±47．770，F=127．700，P=0．000；154．200±7．769比257．300±20．390，F=63．590，P=0．000）的含量均显著降低；肺组织中肺泡间隔增宽及大量炎细胞浸润等病理改变明显减轻；肺组织湿／干质量比值显著降低（3．966±0．255比5．116±0．261，F=16．500，P=0．000）；肺组织胞质蛋白中NF-κB p65的表达明显增加（0．547±0．069比0．302±0．032，F=24．950，P=0．001），而胞核中NF-κB p65的蛋白表达显著减少（0．622±0．111比1．374±0．123，F=25．640，P=0．001）：NF-κB p65的DNA结合活性也显著降低（1．948±0．155比2．884±0．188，F=41．330，P：0．000）。结论原花青素对CLP诱导脓毒症小鼠具有明显的保护作用，其机制可能与抑制NF-κB p65入核有关。

关键词：原花青素盲肠结扎穿孔急性肺损伤核因子-κB

微小RNA-30b-5p在前列腺癌组织的表达及其过表达对前列腺癌细胞增殖的影响

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中华实验外科杂志 2018年第9期35卷 1629-1632页

作者：刘贤莉乐汉娥陈浩毛艳艳江文凛武汉市第四医院华中科技大学同济医学院附属普爱医院泌尿外科 430033

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-30b-5p在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测4l例前列腺癌组织及癌旁组织中miRNA-30b-5p的表达差异；分析上述组织中miR-30b-5p的表... 详细信息

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-30b-5p在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞增殖的影响。方法通过实时定量反转录聚合酶链反应（RT-qPCR）法检测4l例前列腺癌组织及癌旁组织中miRNA-30b-5p的表达差异；分析上述组织中miR-30b-5p的表达与患者临床病理特征的关系。将人前列腺癌PC-3细胞分为空白对照组，阴性对照组及过表达组，分别进行转染，RT-qPCR法检测各组细胞中miR-30b-5p的表达，细胞计数试剂盒（CCK-8）实验和细胞平板集落实验检测细胞增殖能力，Westernblot检测细胞中细胞核增殖抗原（Ki-67）、13-连环蛋白（***）及细胞周期蛋白D1（CyclinD1）的蛋白表达。结果前列腺癌组织中miR-30b-5p的表达（0．469±0．032）显著低于癌旁组织（0．997±0．016，t=14．499，P=0．000）。miR-30b-5p低表达的患者在临床分期Ⅲ～Ⅳ期、病理分级G1～G4级及Gleason评分t〉8分者中所占比例明显高于临床分期I-Ⅱ期[65．2％（15／23）与33．3％（6／18）,X^2=4．108，P=0．043]、病理分级G1～G2级[72．7％（16／22）与26．3％（5／19）,X^2=6．145，P=0．013]、及Gleason评分≤7分[72．0％（18／25）与18．8％（3／16）,X^2=11．072，P=0．001]所占比例均明显增加，而不同年龄患者的miR-30b-5p低表达比例比较差异无统计学意义[54．5％（12／22）与47．4％（9／19），X^2=0．210，P=0．647]。转染后，过表达组miR-30b-5p的表达（4．088±0．229）显著高于阴性对照组（1．028±0．054，F=168．200，P=0．000）。48h及72h时，过表达组A450值（0．308±0．040，0．512±0．033）显著低于阴性对照组A450值（0．494±0．035，0．840±0．037，F=6．514，P=0．001）。过表达组细胞菌落数（14．400±2．227）显著低于阴性对照组（87．600±4．760，F=111．000，P=0．000）。过表达组Ki-67、β-eatenin及CyclinD1的蛋白表达（0．622±0．095、0．437±0．091、0．237±0．049）显著低于阴性对照组（1．681±0．062、1．067±0．188、0．665±0．083）（F=38．490、6．570、13．510，P：0．000、0．031、0．006）。结论miR-30b-5p在前列腺癌中低表达，过表达前列腺癌细胞中mill-30b-5p可减少癌细胞增殖，其机制与抑制Wnt／β-eatenin信号通路有关。

关键词：前列腺癌微小RNA-30b-5p 细胞增殖 Wnt/β-连环蛋白信号通路

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不同因素诱导高尿酸血症小鼠模型的比较研究

中国比较医学杂志 2024年第3期34卷 68-74页

作者：倪建宇白宁宁刘贤莉龚丽红寿旗扬浙江中医药大学药学院杭州310000 浙江中医药大学第二临床医学院杭州310000 浙江中医药大学基础医学院杭州310000 浙江中医药大学第三临床医学院杭州310000

目的探讨三联造模法(氧嗪酸钾、次黄嘌呤以及30%酵母膏饲料联用)能否在ICR背景小鼠上建立稳定可靠的高尿酸血症模型,并采用阳性药非布司他对该造模方法进行评价。方法采用氧嗪酸钾、次黄嘌呤和30%酵母膏饲料,分别单用、两药或三药联用建... 详细信息

目的探讨三联造模法(氧嗪酸钾、次黄嘌呤以及30%酵母膏饲料联用)能否在ICR背景小鼠上建立稳定可靠的高尿酸血症模型,并采用阳性药非布司他对该造模方法进行评价。方法采用氧嗪酸钾、次黄嘌呤和30%酵母膏饲料,分别单用、两药或三药联用建立ICR小鼠高尿酸血症模型,检测血清尿酸、肌酐含量、黄嘌呤氧化酶(XOD)、尿酸氧化酶(UOX)活性,尿酸转运蛋白(URAT)1、葡萄糖转运蛋白(Glut)9、阴离子转运蛋白(OAT)1、ATP结合盒亚家族G成员(ABCG)2 mRNA水平等指标评价高尿酸血症模型成功与否。结果氧嗪酸钾单用对ICR小鼠血清尿酸水平没有明显改变,与30%酵母膏饲料和次黄嘌呤分别联用组血尿酸有升高趋势但无显著差异,而三联给药组在7 d时显著提高(P<0.01);同时,三联给药组XOD酶活性提升(P<0.001),UOX酶活性降低(P<0.001);URAT1、Glut9表达水平升高(P<0.05,P<0.001),OAT1、ABCG2表达水平降低(P<0.001);14 d的动态监测发现三联给药诱导的ICR小鼠血尿酸水平在7 d时达到峰值。此外,三联给药诱导的ICR小鼠高尿酸血症模型对阳性药物非布司他反应敏感,血尿酸水平显著下降(P<0.001)。结论通过三联给药的方法可以在7 d时稳定诱导ICR小鼠的高尿酸血症模型。

关键词：高尿酸血症 ICR小鼠动物模型

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女性乳腺癌患者的人文关怀护理

中国临床护理 2013年第6期5卷 512-513页

作者：刘贤莉鲁海蜃芦敏慧华中科技大学同济医院附属普爱医院西院普通外科武汉430034

人文关怀护理的本质是以人为本，以患者为中心，强调以患者的利益和要求为中心，更注重给予服务对象人性化的关怀与照顾。乳腺癌是我国女性最常见的恶性肿瘤之一，我国乳腺癌的发病率每年增长3％～4％，远高于全球平均水平。

关键词：乳腺癌人文关怀护理

hsa-miRNA-216a-5p在骨髓间充质干细胞成骨分化过程中负性调控NPR3表达

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武汉大学学报（医学版） 2022年第2期43卷 215-219页

作者：徐昊许闫严马中希刘贤莉尹秀萍武汉市第四医院/华中科技大学同济医学院附属普爱医院骨科湖北武汉430033

目的:探讨hsa-miRNA-216a-5p(miR-216a)对人源性骨髓间充质干细胞(hMSC)成骨分化的影响并验证其对利尿钠肽受体3(NPR3)基因的靶向作用。方法:原代培养hMSC至第6代后诱导成骨分化;在分化第0、7和14天收集细胞,利用Real-time PCR验证miR-2... 详细信息

目的:探讨hsa-miRNA-216a-5p(miR-216a)对人源性骨髓间充质干细胞(hMSC)成骨分化的影响并验证其对利尿钠肽受体3(NPR3)基因的靶向作用。方法:原代培养hMSC至第6代后诱导成骨分化;在分化第0、7和14天收集细胞,利用Real-time PCR验证miR-216a的正常表达;慢病毒介导外源性miR-216a在hMSC中高表达,经成骨诱导剂作用后,检测成骨相关基因碱性磷酸酶(ALP)、Runt相关转录因子2(RUNX2)及成骨相关转录因子抗体(Osterix)表达;茜素红染色细胞鉴定基质矿化;经TargetScan预测NPR3基因为miR-216a的靶基因后,检测miR-216a对NPR3表达的影响;构建包含NPR3-3’UTR的荧光素酶表达质粒及其突变体,分别与miR-216a或阴性对照质粒共转染至HEK293细胞,通过测定荧光素酶表达推测miR-216与NPR3-3’UTR的结合关系。结果:在hMSC向成骨细胞分化第7天和第14天,miR-216a表达下降;高表达外源性miR-216a导致hMSC体外成骨能力下降,特异性成骨基因ALP、RUNX2和Osterix随之降低;成骨分化过程中,NPR3的表达趋势与miR-216a相反;miR-216a通过NPR3的3’UTR区降低荧光素酶表达活性;突变NPR3-3’UTR上miR-216a结合位点的抑制作用消失。结论:在骨髓间充质干细胞的体外成骨分化过程中,miR-216a负性调控NPR3的表达。

关键词：微小RNA-216a-5p 骨髓间充质干细胞利尿钠肽受体3 双荧光素酶报告基因

维生素K2对肝癌细胞株内的肝癌衍生生长因子表达的抑制作用

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中华实验外科杂志 2011年第9期28卷 1470-1472页

作者：何鑫游建刘贤莉金鑫李鸣肖定肖飞胡波华中科技大学同济医学院附属普爱医院普外科武汉430034

目的检测维生素K2对肝癌细胞株内的肝癌衍生生长因子（HDGF）表达的作用。方法半定量逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法检测0、10、30μm维生素l（2干预后肝癌细胞中HDGF的mRNA表达，Western blot法检测不同浓度维生素处理后的肝癌细胞... 详细信息

目的检测维生素K2对肝癌细胞株内的肝癌衍生生长因子（HDGF）表达的作用。方法半定量逆转录．聚合酶链反应（RT-PCR）法检测0、10、30μm维生素l（2干预后肝癌细胞中HDGF的mRNA表达，Western blot法检测不同浓度维生素处理后的肝癌细胞中HDGF蛋白表达。结果***结果示96h后10、30μm维生素K2干预组能呈剂量依赖性抑制肝癌细胞中HDGF的mRNA表达。Western blot法检测结果示96h后的10、30μm维生素K2干预组中HDGF的蛋白表达分别为无药对照组的（0．915±0．025）倍和（0．530±0．030）倍，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论维生素K2可下调肝癌细胞中的HDGF表达。

关键词：癌,肝细胞肝癌衍生生长因子维生素K2