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基于微流控芯片的尿路感染细菌鉴定及抗生素敏感性测试

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分析化学 2016年第4期44卷 610-616页

作者：齐明月杜燕刘未平陈斌梁广铁徐邦牢刘大渔广州医科大学附属广州市第一人民医院检验医学研究室广东省临床分子医学及分子诊断重点实验室

发展了一种微流控芯片纸基细菌分析技术,用于多重细菌鉴定与抗生素敏感性测试。制备了阵列培养池芯片,以滤纸作为衬底固定显色培养基和抗生素。利用PVDF疏水薄膜止流阀,将尿液样品引入芯片并分隔于不同培养池。借助于培养池阵列的空间... 详细信息

发展了一种微流控芯片纸基细菌分析技术,用于多重细菌鉴定与抗生素敏感性测试。制备了阵列培养池芯片,以滤纸作为衬底固定显色培养基和抗生素。利用PVDF疏水薄膜止流阀,将尿液样品引入芯片并分隔于不同培养池。借助于培养池阵列的空间分辨力,实现多重细菌分析。根据特异性显色结果实现细菌鉴定,通过实时显色强度分析实现细菌定量,依据抑制显色反应的最低抗生素浓度确定抗生素敏感性。以3种泌尿系统感染常见病原菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和粪肠球菌)为模拟测试对象进行分析,结果表明,芯片方法可以在18 h内实现对3种细菌的同时鉴定及6种抗生素敏感性测试。对照实验显示,芯片法与传统方法细菌鉴定和抗生素敏感性测试结果一致性分别为94.1%和93.9%。本研究建立的微流控芯片细菌分析方法简便快速,非常适合于医疗资源匮乏条件下的细菌分析。

关键词：微流控芯片细菌鉴定抗生素敏感性测试快速检测

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微流控芯片快速鉴定多重细菌

分析化学 2014年第6期42卷 791-798页

作者：文小霞徐邦牢王伟鑫梁广铁陈斌杨银梅刘大渔广州医科大学附属广州市第一人民医院检验医学研究室广东省临床分子医学及分子诊断重点实验室

建立了一种用于多重细菌鉴定的微流控芯片分析方法。在芯片上实现细菌进样、培养和鉴定,结合培养池阵列的空间分辨力以及菌种特异性显色培养基的颜色分辨力,可以实现多重细菌检测。实验选用4种泌尿系统感染常见病原菌作为模拟测试对象,... 详细信息

建立了一种用于多重细菌鉴定的微流控芯片分析方法。在芯片上实现细菌进样、培养和鉴定,结合培养池阵列的空间分辨力以及菌种特异性显色培养基的颜色分辨力,可以实现多重细菌检测。实验选用4种泌尿系统感染常见病原菌作为模拟测试对象,结果显示,这种芯片方法在15 h内可完成细菌鉴定,检测限可达101cfu/mL。临床样本测试结果显示,芯片方法可以实现4种细菌同步鉴定,检测结果与传统方法的一致性达到96.3%。这种微流控细菌鉴定方法简便快速,有望发展成为细菌检测的有力工具。

关键词：微流控芯片细菌鉴定多重显色反应快速检测

微流控芯片精子分选法对精子常规参数及DNA完整性的影响

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中华男科学杂志 2011年第4期17卷 301-304页

作者：王维梁广铁彭娅娅刘大渔周小棉广州医学院附属广州市第一人民医院检验科广东广州510180

目的:研究微流控芯片精子优选技术对精子常规参数及DNA完整性的影响。方法:自行设计制作微流控芯片,利用芯片处理技术和上游法对40例精液标本进行精子优选,通过计算机辅助精液分析系统及染色质扩散试验从精子常规参数及DNA完整性两个方... 详细信息

目的:研究微流控芯片精子优选技术对精子常规参数及DNA完整性的影响。方法:自行设计制作微流控芯片,利用芯片处理技术和上游法对40例精液标本进行精子优选,通过计算机辅助精液分析系统及染色质扩散试验从精子常规参数及DNA完整性两个方面评价精液体外处理对精子的影响。结果:精液经微流控芯片法和上游法处理后,精子活力、精子正常形态率以及精子尾部肿胀率均有显著提高(P<0.01),精子的DNA损伤率明显降低(P<0.01)。微流控芯片法与上游法相比,优选后前者精子DNA损伤率明显低于后者[(8.4±5.8)%vs(16.4±9.2)%,P<0.01],而其他参数差异无显著性。结论:微流控芯片技术在精子优选中能获得精子DNA损伤程度小的高质量精子。

关键词：微流控芯片上游法精子优选染色体扩散试验 DNA完整性

芯片电泳相对迁移时间DNA长度计算方法鉴定高危型人乳头状瘤病毒基因

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中华生物医学工程杂志 2011年第5期17卷 448-453页

作者：刘大渔莫建坤广州医学院附属广州市第一人民医院检验科 510180 广东省第二人民医院检验科

目的建立一种能够消除电泳分析中迁移时间漂移对于DNA片段长度预测精确性影响的芯片电泳相对迁移时间比例方法,并联用多重PCR鉴定高危型人乳头状瘤病毒（HPV）.方法在芯片电泳分析中引入上位和下位内标,依据待测DNA片段相对于上位及... 详细信息

目的建立一种能够消除电泳分析中迁移时间漂移对于DNA片段长度预测精确性影响的芯片电泳相对迁移时间比例方法,并联用多重PCR鉴定高危型人乳头状瘤病毒（HPV）.方法在芯片电泳分析中引入上位和下位内标,依据待测DNA片段相对于上位及下位内标的迁移时间比例进行长度预测,建立芯片电泳相对迁移时间比例的测定方法.考察不同实验条件下芯片电泳DNA分析中相对迁移时间比例的重现性和DNA片段长度预测精确性.选取2007年10月至2008年12月间广州医学院附属广州市第一人民医院妇科就诊的114例患者的富颈上皮细胞样品,经细胞学检查划分为正常组（n=30）、不典型鳞状细胞组（ASCUS组,n=30）、低度鳞状上皮内病变组（LSIL组,n=30）和高度鳞状上皮内病变和（或）鳞状细胞癌组[HSIL和（或）SCC组,n=24].对应活检组织经病理诊断,划分为宫颈高度病变组（n=90）和对照组（n=24）.利用多重PCR联合芯片电泳相对迁移时间比例方法检测宫颈上皮细胞样本中5种高危型HPV感染状况.参考组织病理学检测结果评价芯片电泳相对迁移时间比例的方法分析对于宫颈高度病变诊断的临床价值.结果芯片电泳相对迁移时间比例方法具有良好的重现性和DNA片段长度相关性.使用芯片电泳相对迁移时间比例方法能够满足HPV基因分型多重PCR产物的准确鉴定.各个细胞学分类级别对应的5种高危HPV检出率分别为正常组33.3％、ASCUS组60％、LSIL组76.6％、HSIL和（或）SCC组83.3％.HPV感染率随细胞和组织学病变级别增加有上升趋势,与细胞学（x2=19.319,P＜0.05）和组织学（x2=7.268,P＜0.05）分级具有明显的关联.结论芯片电泳相对迁移时间比例方法简单可靠,可以实现高危HPV基因型快速判定,具有筛查宫颈高度病变的价值.

关键词：乳头状瘤病毒科电泳微芯片相对迁移时间 DNA长度计算基因分型

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微流控体外诊断技术应对临床检验医学的挑战

中华检验医学杂志 2018年第9期41卷 696-699页

作者：舒博文林冬果雷秀霞徐邦牢刘大渔广东省临床分子医学及分子诊断重点实验室华南理工大学附属广州市第一人民医院检验医学研究室 510180

本文以一个在检验医学一线从事微流控体外诊断研究课题组的视角,扼要阐述了微流控技术的优势以及其在临床检验医学领域的应用前景.文章介绍了微流控体外诊断技术在分子诊断、免疫检测和病原微生物检测等领域中的应用,展示了该技术对于... 详细信息

本文以一个在检验医学一线从事微流控体外诊断研究课题组的视角,扼要阐述了微流控技术的优势以及其在临床检验医学领域的应用前景.文章介绍了微流控体外诊断技术在分子诊断、免疫检测和病原微生物检测等领域中的应用,展示了该技术对于解决临床检验医学痛点问题的价值.作者还探讨了新形势下微流控体外诊断技术的机遇与挑战,并认为微流控技术会对临床检验能力的提升起到巨大的推动作用.

关键词：微流控体外诊断临床检验产业化

乳腺癌的淋巴道转移与癌细胞中MMP-9表达的相关性

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大连医科大学学报 2001年第4期23卷 264-266页

作者：王丽辉刘大渔吕申大连医科大学病理学教研室辽宁大连116027 中国科学院大连化学物理研究所 116023

目的 :观察乳腺癌组织中基质金属蛋白酶 - 9(Matrixmetalloproteinases ,MMP - 9)基因产物表达的情况 ,以探讨MMP - 9在乳腺癌浸润和转移过程中的作用。方法 :采用免疫组织化学SP方法检测 76例乳腺浸润癌中MMP - 9的表达情况。其中无淋... 详细信息

目的 :观察乳腺癌组织中基质金属蛋白酶 - 9(Matrixmetalloproteinases ,MMP - 9)基因产物表达的情况 ,以探讨MMP - 9在乳腺癌浸润和转移过程中的作用。方法 :采用免疫组织化学SP方法检测 76例乳腺浸润癌中MMP - 9的表达情况。其中无淋巴结转移 36例 ,有淋巴结转移 4 0例。结果 :MMP - 9在淋巴结转移和无淋巴结转移两组之间的差异具有显著性 (P <0 .0 5 )。转移组淋巴结转移灶癌细胞MMP - 9的阳性表达例多于原发灶 ,但无显著性差异。结论 :乳腺癌的淋巴道转移与MMP - 9的表达具有显著相关性 ,检测MMP - 9蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移潜能及预后。

关键词：乳腺癌淋巴道转移基质金属蛋白酶(MMP-9)

毛细管直接PCR方法快速鉴定NDM-1阳性细菌

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国际检验医学杂志 2011年第13期32卷 1404-1406页

作者：周小棉刘大渔黄华霖广州医学院附属广州市第一人民医院检验科 510180 广州医学院检验系 2006级广州510182

目的建立一种无需核酸提取预处理的毛细管PCR方法,用于新德里金属酰胺酶(NDM-1)阳性细菌的快速鉴定。方法考察在直接加入细菌培养液条件下,两种改良型DNA聚合酶Terra和MightyAmp DNA聚合酶对NDM-1编码基因的扩增效果。选用其中一种DNA... 详细信息

目的建立一种无需核酸提取预处理的毛细管PCR方法,用于新德里金属酰胺酶(NDM-1)阳性细菌的快速鉴定。方法考察在直接加入细菌培养液条件下,两种改良型DNA聚合酶Terra和MightyAmp DNA聚合酶对NDM-1编码基因的扩增效果。选用其中一种DNA聚合酶进行毛细管PCR,确定其对于NDM-1阳性细菌的检测限。结果当分别向25 μLPCR反应体系加入1、3、5、7μL细菌培养液条件下,两种DNA聚合酶均能有效扩增NDM-1编码基因序列,Terra DNA聚合酶效果较好。采用两步法毛细管PCR扩增NDM-1编码基因,3 μL反应体积条件下,40个循环反应在20 min内完成。结论应用改良型DNA聚合酶可以免去细菌核酸纯化步骤直接进行PCR。免核酸提取扩增结合毛细管PCR方法可以显著缩短核酸分析时间,适合于NDM-1阳性细菌的快速鉴定。

关键词：聚合酶链反应基因诊断新德里金属酰胺酶

毛细管中基于液滴的环介导等温扩增用于结核杆菌快速检测

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毛细管中基于液滴的环介导等温扩增用于结核杆菌快速检测

毛细管液滴中的乙型肝炎病毒DNA提取与扩增

中华医学会第七次全国中青年检验医学学术会议

作者：梁广铁刘大渔雷秀霞周小棉广州市第一人民医院

目的发展了一种基于LAMP的微型化核酸分析方法用于结核杆菌的现场快速检测。方法在自行搭建的微型化核酸分析装置上进行,以毛细管液滴作为LAMP反应器并集成了LAMP反应、产物标记

关键词：

来源： cnki会议评论

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毛细管液滴中的乙型肝炎病毒DNA提取与扩增