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粉防己碱逆转肿瘤多药抗药性细胞的凋亡抗性作用

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中国药理学通报 1998年第4期14卷 309-311页

作者：符立梧潘启超黄红兵梁永钜冯公侃田晖中山医科大学肿瘤防治中心

目的探讨粉防己碱逆转ＭＤＲ细胞凋亡抗性的作用及其机制。方法ＭＤＲ细胞株ＭＣＦ－７／Ａｄｒ与其相应的敏感株ＭＣＦ－７进行对比研究。比较粉防己碱对阿霉素（Ｄｏｘ）诱导ＭＤＲ细胞及其相应的敏感株的凋亡作用。并比较粉防己碱对... 详细信息

目的探讨粉防己碱逆转ＭＤＲ细胞凋亡抗性的作用及其机制。方法ＭＤＲ细胞株ＭＣＦ－７／Ａｄｒ与其相应的敏感株ＭＣＦ－７进行对比研究。比较粉防己碱对阿霉素（Ｄｏｘ）诱导ＭＤＲ细胞及其相应的敏感株的凋亡作用。并比较粉防己碱对ＭＤＲ细胞及其相应的敏感株的细胞ｂｃｌ－２蛋白的表达的影响。细胞凋亡及ｂｃｌ－２蛋白表达的测定以流式细胞仪法。结果加入Ｄｏｘ共同培养２４ｈ可诱导７４．６％ＭＣＦ－７细胞凋亡，而只引起１４．３％的ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞凋亡。只加入粉防己碱共同培养２４ｈ，未见明显增加ＭＤＲ细胞及其相应敏感细胞的凋亡百分比。Ｄｏｘ＋粉防己碱能显著地使ＭＤＲ细胞的凋亡增至４７．０％，与单独用Ｄｏｘ组相比较，差异有显著性（Ｐ＜０．０１），而敏感细胞株为７７．８％，与单独用Ｄｏｘ组相比较，差异无显著性（Ｐ＞０．０５）。ＭＤＲ细胞株与其相应的敏感株ｂｃｌ－２蛋白表达水平均较低且差异无显著性。加入粉防己碱对ＭＤＲ细胞株与其相应的敏感株ｂｃｌ－２蛋白表达水平均未见明显影响。结论粉防己碱能逆转ＭＤＲ细胞对Ｄｏｘ的凋亡抗性。其逆转机制可能与ｂｃｌ－２蛋白表达无关。粉防己碱逆转ＭＤＲ细胞ＭＣＲ－７／ＡＤＲ对Ｄｏｘ的凋亡抗性的机制有待进?

关键词：粉防己碱肿瘤多药耐药逆转细胞凋亡

茶多酚对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤生长的抑制作用

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癌症 2002年第4期21卷 392-394页

作者：冯公侃谢冰芬刘宗潮朱孝峰叶燕丽中山大学肿瘤防治中心肿瘤研究所广东广州510060

背景与目的:许多研究报告表明,茶多酚(TP)有防癌和抗癌作用,但对鼻咽癌细胞作用的报道很少。我们最近研究证明TP对人鼻咽癌CNE2细胞有抗增殖和诱导凋亡的作用。为进一步了解TP对人鼻咽癌细胞的作用,进行TP对多种鼻咽癌细胞和人鼻咽癌裸... 详细信息

背景与目的:许多研究报告表明,茶多酚(TP)有防癌和抗癌作用,但对鼻咽癌细胞作用的报道很少。我们最近研究证明TP对人鼻咽癌CNE2细胞有抗增殖和诱导凋亡的作用。为进一步了解TP对人鼻咽癌细胞的作用,进行TP对多种鼻咽癌细胞和人鼻咽癌裸鼠移植瘤生长影响的实验研究。方法:以MTT法检测TP对NPC/HK1、CNE1、CNE2、HNE1、HNE2、SUNE1和Fadu7种人鼻咽癌细胞株的生长抑制作用。以人鼻咽癌细胞株(CNE2)裸鼠移植瘤为模型,作体内抑瘤试验。结果:在体外抗癌细胞增殖试验中,TP对NPC/HK1、CNE1、CNE2、HNE1、HNE2、SUNE1和Fadu的IC50分别为55.83、98.43、119.21、127.74、158.07、160.72μg/ml和163.59μg/ml。在TP对人鼻咽癌细胞株(CNE2)裸鼠移植瘤的抑瘤试验的3批实验中,5mg·(kg·d)-1TP作用18天的平均抑瘤率为12.7%,P>0.05;10mg·(kg·d)-1TP作用18天的平均抑瘤率为31.0%,P<0.01;20mg·(kg·d)-1TP作用18天的平均抑瘤率为38.5%,P<0.01。结论:TP对7种人鼻咽癌细胞株均有不同程度的生长抑制作用,对人鼻咽癌CNE2裸鼠移植瘤的生长有一定的抑制作用。

关键词：茶多酚药理学裸鼠鼻咽癌细胞株抑制作用

茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响

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中国药理学通报 1999年第5期15卷 424-427页

作者：谢冰芬郝东磊刘宗潮朱孝峰冯公侃潘启超中山医科大学肿瘤研究所广州510060

目的　观察茶多酚（ｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，ＴＰ）对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞ＤＮＡ的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ）观察ＴＰ对ＣＮ... 详细信息

目的　观察茶多酚（ｔｅａｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ，ＴＰ）对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞ＤＮＡ的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ）观察ＴＰ对ＣＮＥ２细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果　ＴＰ可引起ＣＮＥ２细胞ＤＮＡ断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２细胞在周期中的进程，使Ｇ１期细胞明显增多，Ｓ期细胞减少，细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时，ＴＰ可诱导ＣＮＥ２细胞凋亡，其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论　ＴＰ１９９８１２０４收稿，１９９９０７３１修回＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９３７０８００作者简介：谢冰芬，女，副研究员，硕士生导师，研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２细胞的ＤＮＡ断裂，使细胞停滞于Ｇ１期，阻止Ｇ１期细胞进入Ｓ期；同时亦可诱导细胞凋亡。

关键词：茶多酚鼻咽癌细胞株 CNE2 细胞 DNA损伤

靶向G-四链体配体SYUIQ-5抑制Akt-FOXO3a通路诱导鼻咽癌细胞自噬性死亡

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癌症 2009年第10期28卷 1049-1053页

作者：周文君邓蓉冯公侃朱孝峰华南肿瘤学国家重点实验室广东广州510060 中山大学肿瘤防治中心实验研究部广东广州510060

背景与目的:SYUIQ-5是具有吲哚和喹啉结构的白叶藤碱衍生物,已有报道它能稳定和诱导G-四链体形成,抑制c-myc启动子和端粒酶活性。本实验主要研究SYUIQ-5对鼻咽癌细胞自噬的诱导作用及其机制。方法:用免疫印迹法检测SYUIQ-5处理前后鼻咽... 详细信息

背景与目的:SYUIQ-5是具有吲哚和喹啉结构的白叶藤碱衍生物,已有报道它能稳定和诱导G-四链体形成,抑制c-myc启动子和端粒酶活性。本实验主要研究SYUIQ-5对鼻咽癌细胞自噬的诱导作用及其机制。方法:用免疫印迹法检测SYUIQ-5处理前后鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2和HONE1中微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein1 l ight chain3,LC3)、Akt、p-Akt以及自噬相关基因BNIP3(Bcl-2/adenocarcinoma E1B19KD interacting protein3)和Beclin1的蛋白表达水平。用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)法检测鼻咽癌细胞中LC3和BNIP3的mRNA水平。用siRNA干扰BNIP3,检测BNIP3在SYUIQ-5诱导自噬过程中的作用。用共聚焦免疫荧光法观察FOXO3a的定位。结果:用0.25～2.0μg/mL的SYUIQ-5处理鼻咽癌细胞CNE1、CNE2和HONE148h,其LC3的表达在蛋白和mRNA水平均明显增强,且呈浓度依赖性。SYUIQ-5能显著抑制CNE2细胞的p-Akt水平,总的Akt表达基本无变化。用3μg/mLSYUIQ-5作用CNE2细胞24h后,共聚焦免疫荧光观察可见FOXO3a由细胞浆移位到细胞核。SYUIQ-5处理的鼻咽癌细胞中自噬相关基因BNIP3蛋白显著增加,而Beclin1无明显变化。用siRNA干扰BNIP3表达后,SYUIQ-5诱导的LC3-Ⅱ形成的功能受到抑制。结论:SYUIQ-5可能通过抑制Akt的激活,诱导FOXO3a移位到胞核,从而促进LC3的转录,诱导肿瘤细胞发生自噬性死亡。BNIP3也参与了SYUIQ-5诱导细胞自噬的过程。

关键词：自噬 LC3 BNIP3 Akt FOXO3a SYUIQ-5

绿茶提取物对肿瘤细胞 DNA 引物酶—多聚酶 α 复合体活性的影响

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癌症 1997年第3期16卷 161-164页

作者：朱孝峰刘宗潮潘启超谢冰芬冯公侃中山医科大学肿瘤研究所治疗基础室

目的：研究绿茶提取物的抗瘤作用机理。方法：以小鼠艾氏腹水癌细胞破碎液为材料，用ＤＥ－５２和Ｐ－１１柱纯化ＤＮＡ引物酶—多聚酶α复合体，用液闪法和放射自显影法研究绿茶提取物对其活性的影响。结果：龙井茶提取物和毛叶茶提取... 详细信息

目的：研究绿茶提取物的抗瘤作用机理。方法：以小鼠艾氏腹水癌细胞破碎液为材料，用ＤＥ－５２和Ｐ－１１柱纯化ＤＮＡ引物酶—多聚酶α复合体，用液闪法和放射自显影法研究绿茶提取物对其活性的影响。结果：龙井茶提取物和毛叶茶提取物对ＤＮＡ引物酶—多聚酶α复合体活性抑制的ＩＣ５０值分别为２７．６０±１．３２μｇ／ｍｌ和１２．５８±１．５３μｇ／ｍｌ，其Ｋｉ值分别为１５．３５±２．３６μｇ／ｍｌ和９．４１±１．４２μｇ／ｍｌ，且均为非竞争性抑制。龙井茶提取物和毛叶茶提取物在１０、２５、５０、１００、２００μｇ／ｍｌ浓度下，对引物合成的促进率分别为１４１．５８％、２３３．５％、２９５．５％、３５４．９％、４３５．５％和１３８．８％、１５１．３％、１７０．５％、１８７．２％、２２９．５％。放射自显影可见两种绿茶提取物对引物合成也呈促进作用，且随着药物浓度的增加，药物越浓引物显影带越宽。以ＰｏｌｙｄＴ·ｒＡ１０为模板—引物，此两种绿茶提取物对引物延长抑制的ＩＣ５０值分别为１５．２７±１．４０μｇ／ｍｌ和１３．６１±０．７７μｇ／ｍｌ。结论：对ＤＮＡ引物酶—多聚酶α复合体活性的抑制是绿茶提取物的抗瘤作用机制之一，而且只是对引物的延?

关键词：绿茶提取物抗肿瘤作用 DNA引物酶

干扰Nrf2可增强Hirsutanols A对肿瘤细胞增殖的抑制作用

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南方医科大学学报 2012年第8期32卷 1093-1097页

作者：马建国李厚金邓蓉冯公侃朱孝峰中山大学肿瘤防治中心华南肿瘤学国家重点实验室广东广州510060 中山大学化学与化学工程学院有机化学研究所广东广州510275

目的探讨干扰Nrf2对HirsutanolsA抑制人结肠癌细胞SW480、肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测不同浓度Hirsutanols A对细胞增殖抑制作用。流式细胞仪检测细胞内ROS的含量;Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋... 详细信息

目的探讨干扰Nrf2对HirsutanolsA抑制人结肠癌细胞SW480、肝癌细胞HepG2细胞增殖的影响。方法采用四甲基偶氮唑蓝比色法检测不同浓度Hirsutanols A对细胞增殖抑制作用。流式细胞仪检测细胞内ROS的含量;Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡;Western blot检测siRNA干扰NRF2蛋白表达的效果。结果 HirsutanolsA(1.25、2.5、5、10、20和40μmol/L)对SW480、HepG2细胞增殖有明显的抑制作用,并呈现剂量依赖关系;Hirsutanols A处理SW480(15μmol/L)、HepG2(30μmol/L)细胞后,诱导细胞中过氧化氢迅速增加,并引起细胞凋亡,用自由基清除剂N-乙酰半胱氨酸(5 mmol/L)预处理完全抑制HirsutanolsA诱导的ROS增加及细胞凋亡。siRNA有效地干扰Nrf2表达后可极大增强Hirsutanols A对肿瘤细胞的增殖抑制作用。结论Hirsutanols A通过增加细胞内ROS诱导其凋亡同时激活Nrf2,Nrf2在维持细胞氧化还原稳态中起重要作用,干扰其表达可增强Hirsutanols A的凋亡诱导作用。

关键词： Nrf2 HirsutanolsA 活性氧凋亡

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DNA引物酶抑制剂筛选方法的建立及应用

癌症 1999年第3期18卷 292-294页

作者：朱孝峰刘宗潮谢冰芬冯公侃潘启超中山医科大学肿瘤防治中心治疗基础室

目的：建立ＤＮＡ引物酶抑制剂的筛选方法，并应用于大量筛选，找出对ＤＮＡ引物酶有抑制作用的抗癌药物或先导化合物。方法：以小鼠艾氏腹水癌细胞破碎液为材料，过ＤＥ－５２和Ｐ－１１层析柱，提取分离ＤＮＡ引物酶，用大肠杆菌大片... 详细信息

目的：建立ＤＮＡ引物酶抑制剂的筛选方法，并应用于大量筛选，找出对ＤＮＡ引物酶有抑制作用的抗癌药物或先导化合物。方法：以小鼠艾氏腹水癌细胞破碎液为材料，过ＤＥ－５２和Ｐ－１１层析柱，提取分离ＤＮＡ引物酶，用大肠杆菌大片段ＤＮＡ多聚酶Ⅰ延长引物法检测ＤＮＡ引物酶的活性。并在此反应液中加入化合物检测对ＤＮＡ引物酶活性的抑制作用，以激活的小牛胸腺ＤＮＡ为模板排除化合物对大片断ＤＮＡ多聚酶Ⅰ的抑制作用。结果：部分纯化的ＤＮＡ引物酶比活性为８７５３Ｕ／ｍｇ，酶的总获得率为２２１％。在１００μｇ／ｍｌ浓度下，氯霉素和鞘氨醇对ＤＮＡ引物酶活性抑制率分另为７１２％±３７％和８３０％±５４％。结论：该方法已经建立，大量筛选发现非抗癌药物的氯霉素和鞘氨醇两种化合物对ＤＮＡ引物酶活性有抑制作用。临床常用的抗癌药物未发现对此酶活性有抑制作用。

关键词： DNA引物酶抑制剂药物筛选抗癌药

ST2325抑制HER2/neu受体酪氨酸激酶信号转导途径及其对乳腺癌细胞周期的影响

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中国药理学通报 2004年第12期20卷 1361-1365页

作者：朱孝峰周军民谢冰芬冯公侃刘宗潮曾益新中山大学肿瘤防治中心肿瘤研究所广东广州510060

目的　本文研究ST2 32 5对HER2 /neu受体的下游信号转导途径的抑制作用及其对乳腺癌BT4 74细胞周期的影响。方法　免疫印迹法检测蛋白表达量和磷酸化蛋白量的变化 ;流式细胞术检测细胞周期的分布。结果　ST2 32 5抑制BT4 74细胞HER 2 /... 详细信息

目的　本文研究ST2 32 5对HER2 /neu受体的下游信号转导途径的抑制作用及其对乳腺癌BT4 74细胞周期的影响。方法　免疫印迹法检测蛋白表达量和磷酸化蛋白量的变化 ;流式细胞术检测细胞周期的分布。结果　ST2 32 5抑制BT4 74细胞HER 2 /neu受体的自身磷酸化 ,IC50 为 8 7μmol·L-1,对HER2 /neu的表达没有任何影响。ST2 32 5抑制BT4 74细胞磷酸化的MAPK和AKT。ST2 32 5处理BT4 74细胞 2 4h后 ,流式细胞仪分析可见细胞周期停止于G1期 ;Westernblot法检测呈现在在ST2 32 5处理后 ,细胞中p2 7上调 ,Rb的高磷酸化状态下降 ,CyclinD1蛋白水平下降。结论　ST2 32 5能抑制乳癌BT4 74细胞HER2 /neu受体酪氨酸激酶信号转导途径 ,诱导乳腺癌细胞BT4 74停止于G1期 ,且与 p2 7上调、Rb的高磷酸化状态下降、CyclinD1蛋白水平下降有关。

关键词： HER2/neu ST2325 细胞周期乳腺癌

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阿诺宁的抗瘤作用研究

癌症 2002年第4期21卷 379-382页

作者：谢冰芬冯公侃朱孝峰苏秀容刘宗潮杨仁洲魏孝义中山大学肿瘤防治中心肿瘤研究所广东广州510060 中国科学院华南植物研究所广东广州510650

背景与目的:我们先前的研究证明,阿诺宁(anuoning)、bullatacin和squamocin在体外有强抗肿瘤作用,squamocin可诱导HL-60细胞凋亡。本研究目的是进一步研究阿诺宁的细胞毒作用和体内抗瘤作用。方法:体外试验用噻唑蓝还原法(MTT法)检测阿... 详细信息

背景与目的:我们先前的研究证明,阿诺宁(anuoning)、bullatacin和squamocin在体外有强抗肿瘤作用,squamocin可诱导HL-60细胞凋亡。本研究目的是进一步研究阿诺宁的细胞毒作用和体内抗瘤作用。方法:体外试验用噻唑蓝还原法(MTT法)检测阿诺宁对体外培养的人结肠癌细胞(HT-29)、人鼻咽癌细胞(SUNE1和CNE2)、人肝癌细胞(bel-7402)、人乳腺癌细胞(MCF-7)和人肺腺癌细胞(GLC-82)的生长抑制作用。建立小鼠移植瘤模型,观察阿诺宁腹腔注射对小鼠肝癌(HepS)和肉瘤S-180的体内抗瘤作用。结果:体外实验表明,阿诺宁对CNE2、bel-7402、HT-29和SUNE1细胞的半数抑制浓度(IC50)依次为0.044μg/ml、0.068μg/ml、0.446μg/ml和1.617μg/ml;对MCF-7和GLC-82细胞的IC50分别为1.857μg/ml和3.481μg/ml。体内试验表明,阿诺宁15、30和60μg/kg,腹腔注射作用10天后,对小鼠肝癌的平均抑瘤率依次为36.9%、51.8%和57.9%,与对照组相比有统计学意义;对小鼠肉瘤S-180的平均抑瘤率依次为43.0%、52.1%和61.0%,与对照组相比有统计学意义。结论:阿诺宁对多种人肿瘤细胞有很强的抑制生长作用,并对小鼠移植瘤具有抗瘤作用。

关键词：阿诺宁/药理学人癌细胞株细胞毒作用小鼠移植性肿瘤抗癌作用