检索结果-南通市图书馆

生物化学与生物物理进展 1996年第5期23卷 402-408页

作者：王琼庆冯佑民中国科学院上海生物化学研究所

近年来，胰岛素蛋白质工程研究进展很快，主要介绍具有临床意义的速效长效和高效胰岛素研究概况，包括分子设计基础，生物活性和应用前景等此外，还讨论了胰岛素的受体结合部位及胰岛素与其受体相互作用的研究近况．

关键词：胰岛素蛋白质工程速效胰岛素长效胰岛素

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胰岛素受体的配体结合结构域的克隆与表达

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第6期32卷 627-632页

作者：张弘乔志松冯佑民上海生物化学研究所中国科学院上海生命科学研究院分子生物学国家重点实验室!上海200031

用PCR方法从人胎盘cDNA库中获得编码胰岛素受体α亚基中结合胰岛素的相对独立的结构域L1、L2以及人工设计的L1 (Ala) 10 L2的基因 ,克隆入含T7噬菌体RNA聚合酶启动子的表达质粒 pET 3a中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ,用IPTG诱导表达成功... 详细信息

用PCR方法从人胎盘cDNA库中获得编码胰岛素受体α亚基中结合胰岛素的相对独立的结构域L1、L2以及人工设计的L1 (Ala) 10 L2的基因 ,克隆入含T7噬菌体RNA聚合酶启动子的表达质粒 pET 3a中 ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3 ) ,用IPTG诱导表达成功。DNA测序、氨基酸组成分析以及蛋白质N端测序证明所表达的蛋白质正确。经过包涵体的分离、洗涤、溶解和纯化 ,得到了纯的变性状态受体的胰岛素高亲和结构域L2、低亲和结构域L1及用 10个丙氨酸相连的两结构域L1 (Ala) 10 L2 ,它们都远小于α亚基且不会由于形成链间二硫键而聚集 ,为进一步研究“胰岛素受体 (结构域 )”复合物的性质 ,探索复合物的结晶打下了良好的基础

关键词：胰岛素受体胞外结构域

猪血清转铁蛋白含单一铁结合部位的半分子的制备、鉴定和受体结合能力

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2002年第2期34卷 215-218页

作者：张新堂唐月华冯佑民中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室上海200031 中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室

用胰蛋白酶水解铁饱和的猪血清转铁蛋白 ,可同时获得含单一铁结合部位的N端和C端半分子。比较了猪血清转铁蛋白及其N端和C端半分子与人胎盘细胞膜转铁蛋白受体的结合能力 ,其受体结合能力依次为 :猪血清转铁蛋白 >C端半分子 >N端半分子

关键词：转铁蛋白半分子受体结合

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B8Gly在胰岛素结构模体中的可能作用

Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第5期32卷 480-484页

作者：张弘唐月华冯佑民分子生物学国家重点实验室!上海200031 上海生物化学研究所中国科学院上海生命科学研究院

在胰岛素结构模体n1 Cys Gly X10 Cys n2 Cys Cys X3 Cys X8 Cys n3中 ,有 7个绝对保守的氨基酸残基 ,只有位于B8位的是Gly。通过定点突变将其改变为Ala,得到[B8Ala]人胰岛素 ,其受体结合能力和体内生物活力分别为天然猪胰岛素的 2 .... 详细信息

在胰岛素结构模体n1 Cys Gly X10 Cys n2 Cys Cys X3 Cys X8 Cys n3中 ,有 7个绝对保守的氨基酸残基 ,只有位于B8位的是Gly。通过定点突变将其改变为Ala,得到[B8Ala]人胰岛素 ,其受体结合能力和体内生物活力分别为天然猪胰岛素的 2 .5 %和 10 %。[B8Ala]人胰岛素和重组人胰岛素的远紫外圆二色谱比较表明 ,[B8Ala]人胰岛素的α 螺旋的相对含量有一定降低 ,说明胰岛素结构模体中的B8Gly是不可被取代的。

关键词：胰岛素结构模体胰岛素突变体 [B8Ala]人胰岛素

从胰岛素研究看等构相互作用在分子识别中的作用(英文)

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 2000年第1期32卷 1-3+93页

作者：张友尚,冯佑民,GuyG.DODSON 中国科学院上海生命科学研究院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室!上海200031 中国科学院上海生命科学研究院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室!上海200031 约克大学化学系!约克YO15DD 英国

蛋白质分子识别的结构基础是蛋白质的三维结构或折叠，其信息存在于氨基酸序列中。在比较功能已知或未知蛋白质的结构同源性时，常常是根据氨基酸残基的疏水性或亲水性。胰岛素定位突变的研究显示出了“等构相互作用”＃在考虑蛋白质... 详细信息

蛋白质分子识别的结构基础是蛋白质的三维结构或折叠，其信息存在于氨基酸序列中。在比较功能已知或未知蛋白质的结构同源性时，常常是根据氨基酸残基的疏水性或亲水性。胰岛素定位突变的研究显示出了“等构相互作用”＃在考虑蛋白质同源性中的重要性。“等构相互作用”这一概念使得蛋白质结构与功能研究的视野更加开阔，同时在制药工业中开发多肽与蛋白质的类似物或模拟物有更多的选择。

关键词：分子识别等构相互作用结构同源性胰岛素

类胰岛素生长因子-1的C结构域不影响胰岛素二硫键的热力学稳定性

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中国科学（C辑） 2002年第1期32卷 84-88页

作者：郭占云冯佑民中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所分子生物学国家重点实验室上海200031

胰岛素和类胰岛素生长因子-1（IGF-1）都属于胰岛素超家族,两者不但一级、三级结构有较高的同源性,而且生理功能也有少量交叉.然而两者的折叠行为却有很大的差别:胰岛素及其重组前体（PIP）只折叠成一种热力学稳定的二硫键配对,而IGF-1... 详细信息

胰岛素和类胰岛素生长因子-1（IGF-1）都属于胰岛素超家族,两者不但一级、三级结构有较高的同源性,而且生理功能也有少量交叉.然而两者的折叠行为却有很大的差别:胰岛素及其重组前体（PIP）只折叠成一种热力学稳定的二硫键配对,而IGF-1却折叠成两种热力学稳定的二硫键异构体.为了了解两者折叠行为差异的分子机制,制备了由胰岛素的A,B 链和IGF-1的C结构域构成的单链杂交分子——[B10Glu]Ins/IGF-1（C）,研究了该杂交分子二硫键的热力学稳定性以及它在含有少量流基试剂的变性剂中的解折叠程度,同时还纯化了该杂交分子一种主要的非天然二硫键异构体,并研究了它的再折叠情况.观察到IGF-1中C结构域的引入并未改变胰岛素分子的折叠热力学,但是影响了折叠的动力学过程.

关键词：胰岛素类胰岛素生长因子-1 杂交分子解折叠再折叠二硫键异构体热力学稳定性

“胰岛素－类胰岛素生长因子－Ⅰ片段”杂交分子的促生长活性研究

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Acta Biochimica et Biophysica Sinica 1996年第4期28卷 434-437页

作者：张新唐月华冯佑民景乃禾中国科学院上海生物化学研究所中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室

“胰岛素－类胰岛素生长因子－Ⅰ片段”杂交分子的促生长活性研究张新，唐月华，冯佑民，景乃禾（中国科学院上海生物化学研究所，中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室，２０００３１）关键词胰岛素，类胰岛素生长因... 详细信息

“胰岛素－类胰岛素生长因子－Ⅰ片段”杂交分子的促生长活性研究张新，唐月华，冯佑民，景乃禾（中国科学院上海生物化学研究所，中国科学院上海生物化学研究所分子生物学国家重点实验室，２０００３１）关键词胰岛素，类胰岛素生长因子－Ⅰ，杂交分子，促生长活性胰岛素...

关键词：胰岛素类胰岛素生长因子-Ⅰ 杂交分子促生长活性

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高活力、长效和速效胰岛素类似物的研究进展

生物化学与生物物理进展 1991年第6期18卷 413-417页

作者：范剑华冯佑民浙江省医学科学院药物研究所中国科学院上海生物化学研究所上海200031

本文介绍了高活力、长效和速效胰岛素类似物的研究进展,包括它们的分子特点,生物活性,并讨论了高生物活力,长效和速效的可能分子基础,以及它们在临床上应用的前途。

关键词：胰岛素类似物胰岛素

B9位丝氨酸残基是胰岛素的葡萄糖代谢作用所必需的(英文)

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Acta Pharmacologica Sinica 2001年第10期22卷 77-81页

作者：廖志勇唐月华叙明华冯佑民朱尚权中国 200031 中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所中国科学院上海生命科学研究院生物化学研究所上海

目的:研究B9和B10位氨基酸残基在胰岛素分子中的重要性。方法:在分离的大鼠脂肪细胞中测定[B9Glu,B10Asp]胰岛素的受体结合活性、葡萄糖吸收活性和脂生成活性。用Western印迹法检测[B9Glu,B10Asp]胰岛素对葡萄糖转运蛋白-4(Glut4)转位... 详细信息

目的:研究B9和B10位氨基酸残基在胰岛素分子中的重要性。方法:在分离的大鼠脂肪细胞中测定[B9Glu,B10Asp]胰岛素的受体结合活性、葡萄糖吸收活性和脂生成活性。用Western印迹法检测[B9Glu,B10Asp]胰岛素对葡萄糖转运蛋白-4(Glut4)转位和胰岛素受体自磷酸化的刺激活性。结果:[B9Glu,B10Asp]胰岛素的受体结合活性和刺激葡萄糖吸收、脂生成、Glut4转位和胰岛素自磷酸化活性分别是天然胰岛素的31％、45％、40％、58％和46％。结论:B9位丝氨酸残基是胰岛素的葡萄糖代谢作用所必需的。

关键词：胰岛素脂肪细胞单糖转运蛋白类磷酸化

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无血清细胞培养基及其主要补充因子

生物化学与生物物理进展 1990年第4期17卷 255-259页

作者：顾涵英冯佑民中国科学院上海生物化学研究所

无血清细胞培养作为一门现代生物技术,近十年来发展很快。它不仅为细胞的生长、增殖和分化的调节和机制的研究提供了有力的工具,而且为现代生物技术科学如蛋白质工程、细胞工程和单克隆抗体等的应用奠定了基础。本文概括叙述了无血清细... 详细信息

无血清细胞培养作为一门现代生物技术,近十年来发展很快。它不仅为细胞的生长、增殖和分化的调节和机制的研究提供了有力的工具,而且为现代生物技术科学如蛋白质工程、细胞工程和单克隆抗体等的应用奠定了基础。本文概括叙述了无血清细胞培养的历史、培养基的组成和主要补充因子,并例举了若干近期报道的无血清细胞培养的例子。

关键词：细胞培养无血清培养基补充因子