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急性ITP患儿外周血调节性T细胞及相关细胞因子的研究

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中国小儿血液与肿瘤杂志 2007年第2期12卷 56-59页

作者：薛俭成伍昌林朱奕李岚张琼丽党鑫堂南方医科大学附属深圳医院

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulationTcells,Tr细胞)及相关细胞因子的变化,探讨它们在AITP发病机制中的作用。方法流式细胞仪分别检测AITP患儿和正常健康儿童外周血Tr细胞的数量,ELISA... 详细信息

目的检测急性特发性血小板减少性紫癜(AITP)患儿外周血CD4+CD25+调节性T细胞(regulationTcells,Tr细胞)及相关细胞因子的变化,探讨它们在AITP发病机制中的作用。方法流式细胞仪分别检测AITP患儿和正常健康儿童外周血Tr细胞的数量,ELISA法检测血清中相关细胞因子的含量,并进行相关性分析。结果AITP患儿外周血Tr细胞的数量明显低于正常对照组[(2.83±1.05)%vs(5.07±0.59)%,P<0.05];AITP患儿血清中IL-10、转化生长因子β1(TGF-β1)的含量均也低于正常对照组[IL-10:(29.48±13.69)pg/mlvs(43.10±14.95)pg/ml;TGF-β1(170.04±91.58)pg/mlvs(254.75±130.41)pg/ml,P<0.05],差异有显著性。AITP患儿外周血Tr细胞的比例与血清中IL-10、TGF-β1的含量都呈正相关(r1=0.54,r2=-0.66,P<0.05)。结论急性ITP患儿外周血中Tr细胞数量的减少及相关细胞因子含量的降低可能与急性ITP的细胞免疫失调有关。

关键词：紫癜,血小板减少,特发性调节性T细胞白介素-10 转化生长因子β1

Rh血型新等位基因RHCE^(*)cE(986A>G)的分子生物学研究1例

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中国输血杂志 2022年第2期35卷 222-224页

作者：易品丁梦圆伍昌林党鑫堂王明明雷振兴邵超鹏深圳市第二人民医院深圳大学第一附属医院广东深圳518025 苏州市中心血站

目的分析1例弱cE抗原患者的分子生物学机制。方法采用血清学方法对患者红细胞的C、c、E和e 4个抗原进行鉴定;采用荧光PCR进行RHCE基因定型;再采用二代测序技术对RHCE基因的10个外显子进行编码区全长测序;同源蛋白建模分析正常与弱抗原... 详细信息

目的分析1例弱cE抗原患者的分子生物学机制。方法采用血清学方法对患者红细胞的C、c、E和e 4个抗原进行鉴定;采用荧光PCR进行RHCE基因定型;再采用二代测序技术对RHCE基因的10个外显子进行编码区全长测序;同源蛋白建模分析正常与弱抗原蛋白差异。结果微柱凝胶卡法RhCcEe抗原鉴定该患者表型为弱c(1~2+)抗原和弱E(1~2+)抗原;试管法RhCcEe抗原鉴定该患者也表型为弱c(1+)抗原和弱E(1+)抗原。荧光PCR基因检测发现该患者除RHCE^(*)c和RHCE^(*)e外,还存在RHCE^(*)c和RHCE^(*)e基因;二代测序结果表明外显子1-6和8-10均未检测到突变、第7外显子存在1处新的碱基点突变:986A>G。同源蛋白建模分析显示氨基酸替换位于第6胞外环。结论 RHCE^(*)cE(986A>G)是1个新的RHCE等位基因,986A>G突变导致了c、E抗原的弱表达。

关键词： RHCE 等位基因弱cE抗原 PCR-SSP 测序

慢性ITP患儿调节性B细胞与效应Th细胞的相关性研究

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国际检验医学杂志 2014年第13期35卷 1696-1698页

作者：伍昌林周雪敏朱奕党鑫堂张爱根邵超鹏深圳市第二人民医院输血科广东深圳518035 深圳市福田区慢病防治院广东深圳518048

目的研究慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患儿外周血调节性B细胞数量与相关细胞因子的变化,分析它们之间的相关性,研究这些细胞的分化在CITP发病机制中的作用。方法选择30例CITP患儿,外周血单个核细胞被分离,Breg细胞以及Th1、Th22、T... 详细信息

目的研究慢性特发性血小板减少性紫癜(CITP)患儿外周血调节性B细胞数量与相关细胞因子的变化,分析它们之间的相关性,研究这些细胞的分化在CITP发病机制中的作用。方法选择30例CITP患儿,外周血单个核细胞被分离,Breg细胞以及Th1、Th22、Th17的比例变化通过流式细胞术检测;并体外培养PBMC细胞,上述培养液中IL-10水平以及IFN-γ、IL-17、IL-22运用ELISA法检测,与同期选择的健康组比较。结果与健康组比较,CITP患儿外周血中Th1、Th17、Th22细胞亚群的比例均升高(18.4±4.7vs 10.82±4.4;2.42±1.02vs 1.23±0.42;0.79±0.24vs 0.26±0.11,%),调节性B细胞(Breg)的比例降低(0.83±0.21vs 1.89±0.12,%),差异均有统计学意义(P<0.05),Breg细胞分别与Th效应细胞亚群的变化呈负相关(P<0.05),细胞因子IL-10水平与IFN-γ、IL-17、IL-22水平也呈负相关(P<0.05)。结论调节性B细胞比例下调可能参与CITP患儿效应T细胞免疫紊乱机制,为CITP患儿的免疫调节治疗提供了新思分路。

关键词：紫癜,血小板减少性,特发性细胞因子类酶联免疫吸附测定

毛细管离心法在定期输血地中海贫血患者RhCcEe血型鉴定中的应用

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中国输血杂志 2020年第6期33卷 555-558页

作者：伍昌林邵超鹏张印则易品党鑫堂朱奕周世乔深圳市第二人民医院输血科广东深圳518035 深圳大学总医院输血科南方医科大学深圳医院输血科

目的分析比较不同血型鉴定方法对定期输血地贫患者RhCcEe表型检出率,探讨毛细管离心法鉴定地贫患者血型混合视野的可行性。方法 PCR-SSP法对随机收集的100例地贫患者外周血进行RhCcEe基因分型,再分别采用微柱凝胶卡直接离心法、毛细管... 详细信息

目的分析比较不同血型鉴定方法对定期输血地贫患者RhCcEe表型检出率,探讨毛细管离心法鉴定地贫患者血型混合视野的可行性。方法 PCR-SSP法对随机收集的100例地贫患者外周血进行RhCcEe基因分型,再分别采用微柱凝胶卡直接离心法、毛细管离心结合微柱凝胶卡法及毛细管离心改良法对定期输血的地中海贫血患者外周血进行RhCcEe血型鉴定,三种方法检测RhCcEe血型的结果与PCR-SSP法检测结果比较,分析各种方法鉴定RhCcEe血型的检出率。结果 100例地贫定期输血患者外周血样本,微柱凝胶卡直接离心法可鉴定出18例RhCcEe表型,82例呈混合视野或分层,检出率为18%(18/100);对82例呈混合视野样本,毛细管离心结合微柱凝胶卡法可鉴定出RhCcEe血型28例,54例仍存在不同程度的混合视野或分层现象,检出率为34.2%(28/82);从82例呈混合视野的地贫患者中,毛细管离心改良法可鉴定出53例,29例呈不同程度的混合视野,检出率为64.6%(53/82),统计分析3种方法的检出率,差别有统计学意义(P<0.05)。分层统计分析改良法对不同输血间隔期患者RhCcEe血型检出率,发现随着输血间隔期延长,地贫患者RhCcEe血型的检出逐渐升高(P<0.05)。结论 PCR-SSP法鉴定地贫定期输血患者外周血RhCcEe血型基因可行但需具备一定实验条件;毛细管离心结合微柱凝胶卡法简便且快速,但检出率较低;毛细管离心改良法检出率随着输血间隔期延长而提高,但临床应用仍需探索改良。

关键词：毛细管离心法定期输血地贫患者 RhCcEe血型混合视野

微柱凝胶法交叉配血次侧凝集原因分析及临床意义

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中国当代医药 2017年第28期24卷 14-17页

作者：李妙珊伍昌林周雪敏党鑫堂朱奕邵超鹏广东省梅州市中医院检验科广东梅州514000 深圳市第二人民医院输血科广东深圳518035 深圳市福田区慢性病医院新华社区康复中心广东深圳518048

目的分析输血前微柱凝胶法交叉配血次侧凝集的原因及意义,为临床安全输血提供参考。方法统计2013年1月~2016年5月我院微柱凝胶法次侧交叉配血凝集患者,按照病种分组分析交叉配血次侧凝集的比例,次侧配血凝集率与输血次数、输血反应的相... 详细信息

目的分析输血前微柱凝胶法交叉配血次侧凝集的原因及意义,为临床安全输血提供参考。方法统计2013年1月~2016年5月我院微柱凝胶法次侧交叉配血凝集患者,按照病种分组分析交叉配血次侧凝集的比例,次侧配血凝集率与输血次数、输血反应的相关性;采用抗人球蛋白试验、放散试验、抗体筛选鉴定、药物性抗体筛查及RBC形态结构分析等方法研究交叉配血次侧凝集的原因。结果调查分析微柱凝胶卡交叉配血45 672人次,其中325例次侧配血凝集,凝集率为0.71%;次侧配血凝集主要病种为血液系统疾病、ICU重症及急诊抢救、烧伤等;血液病患者次侧配血凝集率与输血次数、输血反应率、输血效率等均成正相关性(P0.05);次侧配血凝集原因主要有:患者红细胞形态结构变化、血浆蛋白影响、供者血清同种抗体、药物性抗体、加样量不当及技术因素等;由免疫因素与非免疫因素引起的次侧配血凝集原因的分类比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论微柱凝胶法交叉配血次侧凝集的原因很多,非免疫因素导致交叉配血次侧凝集比例较高,输血反应与输注无效率较低;而免疫因素引起的次侧凝集比例低,但输注无效率高,且较易引起输血反应。

关键词：交叉配血次侧凝集原因分析临床意义

Tfh/Treg/Breg细胞与习惯性流产患者免疫紊乱的关系

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中国医药导报 2016年第12期13卷 113-116页

作者：石教启伍昌林朱亦张继华党鑫堂周雪敏佘吉佳湖北省阳新县人民医院检验科湖北阳新435200 广东省深圳市第二人民医院检验科广东深圳518035

目的探讨CD4+CXCR5^+T(Tfh)、CD4^+CD25^+Fox P3^+T(Treg)及CD1d(hi)CD5^+CD19^+B(Breg)细胞与习惯性流产(HA)患者免疫紊乱的关系。方法从2014年5月~2015年9月在广东省深圳市第二人民医院产检确诊的孕妇中,随机选择30例流产次数≥2次的女性作为HA病例组,同时选择30例正常怀孕生产的女性作为对照组。分别采集两组孕妇怀孕期间外周血,分离外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术检测Tfh/Treg/Breg细胞数量及比例;采用酶联免疫吸附试验测定血清中白细胞介素-21(IL-21)、白细胞介素-10(IL-10)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)的水平,及IL-21/IL-10、IL-21/TGF-β_1比值变化,并分析IL-21/IL-10、IL-21/TGF-β_1比值变化与流产次数的相关性。结果与对照组比较,HA病例组Tfh/Th、Tfh/Treg、Tfh/Breg细胞比值均升高,差异有统计学意义(P<0.05),而Treg/Th、Breg/B细胞的比值均降低,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,HA病例组IL-21升高(P<0.05),而IL-10、TGF-β_1均降低,差异有统计学意义(P<0.05),IL-21/IL-10、IL-21/TGF-β_1比值均升高(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,IL-21/IL-10、IL-21/TGF-β_1比值变化与HA病例组流产次数呈正相关((r=0.786、0.694,均P<0.05))。结论 Tfh/Treg/Breg细胞及相关因子IL-21/IL-10、IL-21/TGF-β_1比值变化可能与HA患者免疫紊乱机制相关。

关键词：习惯性流产 Tfh/Treg/Breg细胞 IL-21/IL-10 IL-21/TGF-β1

简易RHCE基因定型方法用于Rh配型输血的可行性探讨

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中国输血杂志 2018年第11期31卷 1226-1229页

作者：党鑫堂伍昌林徐华李岚朱奕吴筱莹张印则易品余志英邵超鹏深圳大学第一附属医院深圳市第二人民医院广东深圳518035 陕西省血液中心深圳市血液中心

目的探讨简便易的RHCE基因分型技术用于Rh配型输血的可行性。方法采用PCR-SSP技术对481名定期输血的β-地中海贫血(简称地贫)患者进行Rh CcEe表型的基因分型(实验组),对其中≥3个月连续输注RhCcEe同型血的患者使用微柱凝胶卡法复查其Rh ... 详细信息

目的探讨简便易的RHCE基因分型技术用于Rh配型输血的可行性。方法采用PCR-SSP技术对481名定期输血的β-地中海贫血(简称地贫)患者进行Rh CcEe表型的基因分型(实验组),对其中≥3个月连续输注RhCcEe同型血的患者使用微柱凝胶卡法复查其Rh CcEe表型;对照组取400名献血者,以微柱凝胶卡法检测其Rh CcEe表型,对其中164例做RHCE基因分型;分析比较2组Rh CcEe表型频率和基因定型方法的可行性。结果实验组中203名连续接受CcEe同型输血的地贫患者,微柱凝胶卡法检测均获得Rh CcEe血清学清晰的结果,并与PCR-SSP的基因分型结果一致。对照组中164名献血者的RHCE基因分型结果亦均与其血清学结果一致,对其中7名血清学c、E或e抗原弱阳性个体所做RHCE基因编码区序列分析:仅1例观察到1059G/A杂合峰(Gen Bank KT957625),其余6例未发现异常。2组均以CcEe和CCee表型为主,分别为实验组的55. 3%(266/481)和24. 9%(120/481),对照组的49. 3%(197/400)和31. 3%(125/400)。结论简易PCR-SSP RHCE基因分型方法可初步用于中国人Rh配型输血。

关键词： RHCE基因定型 Rh配型输血 β-地中海贫血微柱凝胶法

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丹参HD-ZIP基因家族的鉴定与表达分析

河南农业科学 2024年第7期53卷 66-78页

作者：李万成瑞星党鑫商洛学院生物医药与食品工程学院陕西商洛726000

为筛选丹参(Salvia miltiorrhiza)中响应高温胁迫的HD-ZIP基因,利用生物信息学研究方法,对丹参全基因组的HD-ZIP基因进行了鉴定和分析,并以天丹1号为材料,通过qPCR技术检测了丹参HDZIP基因在高温胁迫下的表达模式。结果表明,丹参全基因... 详细信息

为筛选丹参(Salvia miltiorrhiza)中响应高温胁迫的HD-ZIP基因,利用生物信息学研究方法,对丹参全基因组的HD-ZIP基因进行了鉴定和分析,并以天丹1号为材料,通过qPCR技术检测了丹参HDZIP基因在高温胁迫下的表达模式。结果表明,丹参全基因组中包含44个HD-ZIP基因(SmHD-ZIP),不均匀地分布于8条染色体上。SmHD-ZIP可分为HD-ZIPⅠ、HD-ZIPⅡ、HD-ZIPⅢ和HD-ZIPⅣ4个亚家族,序列分析结果表明,这些蛋白质的氨基酸残基数为180~982个,相对分子质量为20.947~109.620 ku。SmHD-ZIP均为亲水蛋白,无跨膜结构域,绝大多数不含信号肽,等电点为4.48~10.91,且几乎都在细胞核表达,蛋白质稳定性较差。44个SmHD-ZIP基因中有10个基因复制事件,均为纯化选择。结构和模体分析结果表明,同一亚家族成员的外显子数目基本一致,HD-ZIPⅢ亚家族成员的外显子数目最多,模体数也最多。模体1、6是SmHD-ZIP的保守模体,模体10、11、12、13、15为HD-ZIPⅢ亚家族特有,模体5为HD-ZIPⅣ亚家族特有。通过分析高温(37℃)胁迫下SmHD-ZIP的表达模式发现,表达量升高和下降的基因数基本一致,在上调表达的基因中,SmHD-ZIP1.11、SmHD-ZIP1.13、SmHD-ZIP2.2、SmHD-ZIP2.5、SmHD-ZIP3.1、SmHD-ZIP3.4、SmHD-ZIP4.9、SmHD-ZIP4.10和SmHD-ZIP4.12的表达量提高了10倍以上,可作为提高丹参耐热性的候选基因资源。

关键词：丹参 HD-ZIP家族系统进化树 qPCR 高温胁迫

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基于人脸表情识别的驾驶状态分析

信息记录材料 2024年第3期25卷 108-111,114页

作者：党鑫许华天津工业大学计算机科学与技术学院天津300387 天津工业大学软件学院天津300387

为了更加准确地对驾驶员的人脸进行定位并进行驾驶状态分析,本文提出一种基于改进YOLOv5及ConvNeXt的级联分类算法。算法首先采用引入注意力机制的YOLOv5作为人脸定位器,然后将定位裁剪后的图片输入到ConvNeXt的卷积神经网络中进行分类... 详细信息

为了更加准确地对驾驶员的人脸进行定位并进行驾驶状态分析,本文提出一种基于改进YOLOv5及ConvNeXt的级联分类算法。算法首先采用引入注意力机制的YOLOv5作为人脸定位器,然后将定位裁剪后的图片输入到ConvNeXt的卷积神经网络中进行分类。引入的卷积注意力机制YOLOv5网络不仅增强了网络对复杂背景中目标区域的感知能力,同时减少了网络参数量和计算复杂度,与此同时,采用3:3:9:3的卷积模块数量比例的ConvNeXt增强了网络对特征的提取能力,并且与Swin Transformer相比拥有更快的推理速度以及更高的准确率。最终,在实验评估中该模型在FER2013数据集上可达到73.65%的准确率,在KMU⁃FED数据集上达到了97.73%的准确率,较好地实现了驾驶员的人脸表情识别及状态分析。

关键词：人脸表情识别 ConvNeXt YOLOv5 注意力机制