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人类细胞外囊泡的产量优化与应用

中国生物工程杂志 2024年第9期44卷 1-13页

作者：王晨蕾程临钊刘森泉中国科学技术大学生命科学与医学部

目的：构建与优化细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)的高产平台，验证此平台是否适用于功能蛋白的装载与递送。方法：通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、流式细胞术或Western blot(WB)检测细胞目的基因表达，采用差速超速离心法浓缩... 详细信息

目的：构建与优化细胞外囊泡(extracellular vesicles, EVs)的高产平台，验证此平台是否适用于功能蛋白的装载与递送。方法：通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、流式细胞术或Western blot(WB)检测细胞目的基因表达，采用差速超速离心法浓缩EVs,分别利用WB与纳米颗粒跟踪分析(nanoparticle tracking analysis, NTA)检测EVs标记蛋白表达、粒径分布与产量。利用脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)诱导的A549细胞损伤模型验证EVs递送功能蛋白的能力。通过CCK8检测细胞活力，通过Annexin V检测细胞凋亡，利用qRT-PCR检测Wnt/β-catenin下游基因AXIN2、TCF4、NKD1的表达。结果：流式细胞术结果表明CD9、CD81均能在HEK293T和HEK293F上过表达，NTA检测显示CD9更有助于EVs产量的提高。实现在贴壁细胞体系中EVs产量提升4倍，在悬浮细胞体系中EVs产量提升6倍。之后验证高产平台是否适用于功能蛋白Wnt3a的装载与递送。WB结果证实此高产平台能装载Wnt3a蛋白，NTA检测表明此高产平台在装载Wnt3a的同时将EVs产量提升3倍左右。CCK8、Annexin V结果显示CD9 Wnt3a EVs能明显提高A549细胞在LPS诱导损伤后的细胞活力，抑制细胞凋亡。机制上，qRT-PCR表明CD9 Wnt3a EVs激活了Wnt/β-catenin下游基因AXIN2、TCF4、NKD1的表达。结论：构建了一种基于CD9过表达的EVs高产平台，该平台对EVs产量的提升在贴壁细胞与悬浮细胞中均得到了验证，该平台对功能蛋白Wnt3a的递送能力在LPS诱导的A549细胞损伤模型中得到了验证。该平台为实现EVs量产提供了新策略，有望成为一种新的功能蛋白递送平台，在生物学研究和无细胞治疗领域开拓更多应用。

关键词：细胞外囊泡 CD9 CD81 Wnt3a

基于高频正交方波注入法的永磁同步电机控制研究

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电机与控制学报 2024年第2期28卷 64-74页

作者：周林林珊王孝洪连维钊华南理工大学自主系统与网络控制教育部重点实验室广东广州510640 广州地铁设计研究院股份有限公司广东广州510010

针对传统高频注入法解调过程复杂和观测精度受非理想因素时延影响的不足,提出一种基于高频正交方波注入法的零低速位置估计方法。首先,考虑估计旋转轴系注入的低可靠性,选择将高频信号注入静止轴系,采用简单代数运算提取出高频响应电流... 详细信息

针对传统高频注入法解调过程复杂和观测精度受非理想因素时延影响的不足,提出一种基于高频正交方波注入法的零低速位置估计方法。首先,考虑估计旋转轴系注入的低可靠性,选择将高频信号注入静止轴系,采用简单代数运算提取出高频响应电流,通过解调正向虚拟高频响应电流初步估计转子位置;然后,针对主要非理想因素进行影响分析,在此基础上,通过解调负向虚拟高频响应电流提取出相位滞后角,完成补偿;最后,为避免启动阶段位置收敛错误,通过获取电感变化趋势判断出磁极极性。实验结果表明,所提算法在各类工况均能稳定收敛,且最大平均误差不超过1°,说明了算法的抗扰性以及准确性。

关键词：永磁同步电机无位置传感器控制正交方波注入法误差分析时延补偿磁极辨识

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租赁准则修订对企业资本支出影响研究

租赁准则修订对企业资本支出影响研究

作者：李沁钊山东财经大学

学位级别：硕士

随着我国资本市场的发展,越来越多的企业出现了不同的融资需求,租赁市场随着这些融资需求的出现而不断发展,自1981年至今,经过四十多年的快速发展我国租赁行业业务规模已经排名全球第二,仅次于美国,企业基于快速扩大规模、缓解资金紧张... 详细信息

随着我国资本市场的发展,越来越多的企业出现了不同的融资需求,租赁市场随着这些融资需求的出现而不断发展,自1981年至今,经过四十多年的快速发展我国租赁行业业务规模已经排名全球第二,仅次于美国,企业基于快速扩大规模、缓解资金紧张问题等原因选择进行租赁而不是购买。新租赁准则实施前,原租赁准则将承租人的租赁分为经营租赁和融资租赁,其中融资租赁需要确认资产和负债以计入资产负债表,从而提高企业的资产负债率,而经营租赁不需要计入财务报表,企业为了美化财务报表数据可能会优先选择经营租赁。但是随着经营租赁的规模不断扩大,企业的表外融资规模也会扩大,这降低了企业的会计信息质量,增加了企业的财务风险,不利于缓解企业的融资约束。2018年12月13日,财政部修订并发布了《企业会计准则第21号——租赁》(以下简称新租赁准则),改进了承租人对经营租赁的会计处理方式,要求对所有的租赁均需入表核算,确认使用权资产和租赁负债。新租赁准则将原来通过经营租赁方式进行的表外融资也在表内确认,削弱了企业通过经营租赁进行表外融资的动机,有可能促使企业选择购买的方式获得企业资产,从而增加企业的资本支出;也有研究认为,新租赁准则的实施会导致企业的财务数据恶化,提高企业的财务风险,企业为了控制财务风险会更慎重的考虑购置资产。那么新租赁准则的实施会对企业的资本支出产生怎样的影响?又是通过何种机制影响企业的资本支出行为?通过探究租赁准则修订与企业资本支出行为之间的关系,能够更好的理解新准则实施后对企业发展的影响,从侧面可以看出企业对新租赁准则的执行力和应对方式,有利于会计准则实施后续研究的进一步探索。然而,目前新租赁准则实施对企业影响的研究多集中于对企业财务数据的影响,比如新租赁准则实施对企业资产负债率、收益率和净利润的影响等,较少考虑新租赁准则实施对企业后续资本支出的影响。因此,本文将研究范围拓展到企业的资本支出,探讨了新租赁准则修订对企业资本支出的影响,以及会计信息质量在其中发挥的中介作用。本文首先对新租赁准则与企业资本支出影响因素的相关文献进行回顾,梳理相关理论,找到研究切入点,然后根据现有理论提出假设,以2015-2021年A股上市公司作为研究样本,采用双重差分方法实证检验新租赁准则实施对企业资本支出的影响,并进一步检验了新租赁准则影响企业资本支出的路径。从实证研究结果可知:(1)租赁准则的修订提高了企业的资本支出水平。(2)租赁准则的修订提高了企业的会计信息质量,进而影响了企业的资本支出行为。(3)企业的成长性越高,租赁准则修订对企业资本支出的影响越大。本文丰富了会计准则经济后果方面的理论研究。目前对新租赁准则的研究主要集中在对企业的财务报表数据、指标、会计信息质量和融资途径等方面影响,本文从资本支出的角度探讨新租赁准则实施后对企业的影响,有利于拓宽已有对新租赁准则实施效果研究的边界,更好的理解新准则实施后对各个企业的影响。

关键词：租赁准则修订会计信息质量资本支出

阴离子柱金属有机框架及其复合材料对CH4/N2吸附分离研究

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阴离子柱金属有机框架及其复合材料对CH4/N2吸附分离研究

作者：陈禹钊北京化工大学

学位级别：硕士

低浓度煤层气（CH4浓度大于5%小于等于30%）的捕集浓缩、安全运输是当今研发的重点之一。本研究基于阴离子柱型MOF（Anion-Pillared MOFs,即APMOFs）出发,研究了Al FFIVE-1-Ni、Fe FFIVE-1-Ni粉体及其在大孔聚合物载体内原位生长的复合... 详细信息

低浓度煤层气（CH4浓度大于5%小于等于30%）的捕集浓缩、安全运输是当今研发的重点之一。本研究基于阴离子柱型MOF（Anion-Pillared MOFs,即APMOFs）出发,研究了Al FFIVE-1-Ni、Fe FFIVE-1-Ni粉体及其在大孔聚合物载体内原位生长的复合材料对CH4/N2分离性能。主要研究内容和结果如下:通过改进Al FFIVE-1-Ni、Fe FFIVE-1-Ni原粉合成方式,以纳米金属氧化物作为晶种,在剪切流环境和非均相体系下促进晶体成核,合成粒径分布均匀、形貌规整的APMOF,通过表征证实了该合成方式的粉体材料为Al FFIVE-1-Ni、Fe FFIVE-1-Ni。经对反应溶剂、温度和时间优化,通过CH4静态吸附测试发现其附量分别提高了10.2%和11.3%。分别计算原粉Al FFIVE-1-Ni和Fe FFIVE-1-Ni的CH4吸附热为18.1 k J/mol和25.6 k J/mol,以及CH4/N2（50%:50%,298 K,1 bar）的IAST选择性为6.5和8.7。并通过相同环境CH4/N2混合气穿透测试均证明了Al FFIVE-1-Ni、Fe FFIVE-1-Ni具有分离回收CH4的能力;进一步开发用于工程实际所需成型固体吸附材料,同时进一步提高Al FFIVE-1-Ni、Fe FFIVE-1-Ni对CH4/N2分离性能,基于原位生长的复合方法,制备球形Al FFIVE-1-Ni@Poly（Acrylate-VIM-TEPA）、Fe FFIVE-1-Ni@Poly（Acrylate-VIM-TEPA）复合材料。通过有机胺引入提高载体的表面能,经对合成工艺条件优化实现了纳米级晶体的高负载,分别在72.41wt%和72.21wt%的负载下保留了原粉吸附性能90%以上,并通过CH4/N2混合气（50%:50%,298 K,1 bar）动态穿透测试显示Al FFIVE-1-Ni、Fe FFIVE-1-Ni动态分离比分别提高了134.7%和98.8%,且复合材料均经过7天室温水环境浸泡保留了晶体结构,并通过5次循环穿透测试性能下降不超过5%。

关键词：阴离子柱金属有机框架复合吸附材料原位生长 CH4/N2分离有机胺改性

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全球冠层可燃物含水率时空变化特征遥感分析

全球冠层可燃物含水率时空变化特征遥感分析

作者：李明钊电子科技大学

学位级别：硕士

一类广义修正Camassa--Holm方程的周期尖峰解的轨道稳定性

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一类广义修正Camassa--Holm方程的周期尖峰解的轨道稳定性

作者：徐诚钊湖南理工学院

学位级别：硕士

淮河流域新型城镇化与生态服务系统时空耦合及多情景模拟研究

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淮河流域新型城镇化与生态服务系统时空耦合及多情景模拟研究

作者：张国钊安徽建筑大学

学位级别：硕士

全球城市化快速发展的背景下,加强流域长时序生态系统服务对城镇化演变响应及耦合协调机制分析,对于区域生态保护和可持续高质量发展具有重要意义。本课题以淮河流域为研究对象,采用1980-2020年的土地利用、自然因子、社会经济因子等多... 详细信息

全球城市化快速发展的背景下,加强流域长时序生态系统服务对城镇化演变响应及耦合协调机制分析,对于区域生态保护和可持续高质量发展具有重要意义。本课题以淮河流域为研究对象,采用1980-2020年的土地利用、自然因子、社会经济因子等多源数据,基于空间信息技术、耦合协调、PLUS—In VEST模型、地理探测器等方法,开展40年来淮河流域生态系统服务对城镇化变化响应、耦合协调及多情景模拟分析研究。通过长时序的时空分析及情景模拟研究,结果可为淮河流域的生态功能调控及高质量城镇化发展提供决策支持。结果表明:(1)1980-2020年,淮河流域土地利用变化趋势呈现“四减两增”变化趋势,其中,农地、林地、草地、未利用地减少,未利用地年减少率最高为0.4671%,而水域面积及城乡工矿居民用地面积大幅增加,城乡工矿居民用地年增加率最高为1.147%。耕地始终是淮河流域的主要土地利用类型,截至2020年各用地类型面积排序为:耕地>城乡工矿居民用地>林地>水域>草地>未利用地。从土地利用转移计算结果表明,城乡工矿居民用地土地转移的数值最大,表明了其面积的快速增加。土地利用程度呈现上升趋势。(2)40年间,淮河流域生态系统服务价值由2016.317亿元增加至2074.414亿元,总体呈先降后升的变化趋势,1990年为变化拐点,但2010-2020年增幅减缓。城镇化指数在40年间呈逐年递增趋势,南京、郑州、合肥等城市的城镇化指数增长明显。淮河流域新型城镇化综合评价结果表明40年间淮河流域的发展质量得到明显提升,综合指数从1980年的1.888增长到2020年的11.524,在这一增长过程中,经济城镇化的贡献尤为突出,贡献值达到4.129。(3)1980-2020年间,流域生态服务与城镇化之间经历中度失调、勉强协调向优质协调变化趋势。耦合协调发展度Moran’s I由0.3967变化为0.5190,呈显著空间集聚性,冷点区主要位于流域中部区域呈团状分布,热点区则主要分布于东南部区域并有扩大趋势;地理探测器分析表明降雨量、水域距离、高程、地均GDP因子解释力达40%以上,是耦合协调度空间分异性主导因子。(4)PLUS模拟表明,2020-2050年,生态保护(EP)、综合发展优化(CD)和自然增长情景(ND)下的流域生态服务价值呈上升趋势,但耕地保护情景(CP)下表现出一定程度的下降趋势。2010-2020年淮河流域城镇化发展关键用地扩张驱动力的研究分析显示,自然因素和社会经济因素共同塑造了该流域城镇化的格局变化。在城乡工矿居民用地的快速扩张中,人口密度、GDP增长以及道路距离等社会经济因素被证实为主要驱动力,它们共同推动了城镇用地的不断扩展。与此同时,在耕地增加方面,自然因素如降雨量和气温变化也发挥了不可忽视的作用,对耕地的生成和利用产生了显著影响。In VEST模型预测表明,2030年至2050年期间,淮河流域生境质量的平均值将略有下降,各生境质量等级的面积占比变化较小,生境质量的空间分布将保持相对稳定。然而低生境质量区域的面积占比将持续增长,这应成为关注和解决的重点。因此,流域土地利用过程中需加强对生态服务功能的优化调控。图[15]表[20]参[116]

关键词：土地利用/覆被变化生态系统服务城镇化耦合协调多情景模拟

LncRNA PVT1通过TUBA1C促进胆管癌细胞增殖和迁移的机制研究

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LncRNA PVT1通过TUBA1C促进胆管癌细胞增殖和迁移的机制研究

作者：张铁钊承德医学院

学位级别：硕士

目的:探究lncRNA PVT1(long noncoding RNA plasmacytoma variant translocation 1)与微管蛋白α家族1c蛋白(tubulin alpha 1c,TUBA1C)在胆管癌(cholangiocarcinoma,CCA)细胞增殖和迁移中的作用,为明确CCA的发生发展机制提供新的理论依据。方法:通过GEPIA2在线网站检测lncRNA PVT1在各种恶性肿瘤及CCA中的表达水平。收集2021年10月至2023年11月,在承德医学院附属医院经过手术验证和病理证实的20名CCA患者的癌及癌旁组织样本,培养正常胆管上皮细胞(HIBEC)和CCA细胞(RBE、HCCC9810、HUCCT1),通过q RT-PCR检测组织和细胞中lncRNA PVT1的表达。使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染CCA细胞以敲低lncRNA PVT1的表达,并通过q RT-PCR技术验证其效果。采用CCK-8实验检测敲低lncRNA PVT1前后HUCCT1增殖能力的差异。通过细胞划痕实验和Transwell实验,观察敲低lncRNA PVT1后HUCCT1细胞迁移能力的变化。用RNA pulldown实验检测lncRNA PVT1结合蛋白,筛选出高度富集的蛋白TUBA1C。通过GEPIA2数据库查询TUBA1C在CCA中的表达情况,并对TUBA1C进行生存分析,观察其与CCA预后的关系。应用蛋白质免疫印迹技术(Western Blot,WB)检测TUBA1C在CCA细胞(HUCCT1)和正常胆管细胞(HIBEC)中的表达差异。最后,敲低HUCCT1中lncRNA PVT1后通过WB技术检测TUBA1C的表达变化。结果:***2在线网站检测发现与正常胆管组织相比,lncRNA PVT1在CCA组织中显著增高;q RT-PCR结果显示与癌旁组织相比,lncRNA PVT1在CCA组织中表达上调(P<0.05);与正常胆管细胞HIBEC相比,lncRNA PVT1在HUCCT1细胞中表达显著增高(P<0.0001)。2.采用siRNA转染技术转染HUCCT1细胞后,q RT-PCR检测结果表明,si-PVT1-3的敲低效果更加显著(P<0.0001)。进一步的细胞功能实验显示,降低lncRNA PVT1的表达能够有效抑制HUCCT1细胞的增殖与迁移。***1C是lncRNA PVT1下拉筛选出的高度富集的蛋白,在CCA中显著高表达,并与CCA的不良预后密切相关。***检测发现,敲低LncRNA PVT1降低了TUBA1C的表达。结论:1.在CCA组织和细胞中,LncRNA PVT1表达显著增加,与患者不良预后密切相关。2.在HUCCT1细胞中,TUBA1C的表达显著增加,与LncRNA PVT1的表达水平呈正相关。*** PVT1通过促进TUBA1C的表达从而加速CCA细胞的增殖和迁移。

关键词：胆管癌 lncRNA PVT1 TUBA1C 增殖迁移

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面向自动驾驶的多模态融合感知技术研究

面向自动驾驶的多模态融合感知技术研究

作者：代振钊北方工业大学

学位级别：硕士

在自动驾驶技术中,环境感知作为自动驾驶技术中至关重要的环节,其主要任务是获取车辆周围的环境信息,为汽车的自主决策提供必要的信息支持。由于单一传感器在处理复杂多变的交通环境存在局限性,因此,采用多种传感器融合技术可以实现各... 详细信息

在自动驾驶技术中,环境感知作为自动驾驶技术中至关重要的环节,其主要任务是获取车辆周围的环境信息,为汽车的自主决策提供必要的信息支持。由于单一传感器在处理复杂多变的交通环境存在局限性,因此,采用多种传感器融合技术可以实现各种传感器之间的优势互补,从而提高系统的整体性和可靠性。本文围绕视觉信息和激光雷达信息融合,对基于视觉目标检测、激光雷达目标检测技术进行研究,并从传感器信息融合角度提高检测精度。主要研究内容如下:(1)基于视觉目标检测算法设计。针对YOLOv5s检测算法计算量大、检测精度低的问题,本文提出了一种新的解决方案。在主干网络中,采用轻量化Mobile Net V3模块降低参数量,并引入Coordinate attention注意力模块,增强网络的特征提取能力。在颈部,使用Bi FPN改进网络中的PANet结构,实现更高层次的特征融合。最后,构造出MV-YOLOv5s算法。经过实验分析,改进的MV-YOLOv5s算法在降低计算量的同时提高检测精度。(2)基于激光雷达的目标检测算法设计。针对Point Pillars算法存在细粒度信息丢失以及点云特征提取能力不足的问题,构造出C3-Point Pillars算法。在点云转换为伪图像的过程中,在通道维度加入平均池化操作获取Pillar特征,从而保留更多细粒度信息。同时,针对下采样过程中存在特征提取能力不足的问题,在主干网络中加入多尺度特征融合模块,可以获得不同层次的特征,从而增强模型的特征提取能力。经过实验验证,检测效果优于原始算法,这为后续传感器融合方案奠定基础。(3)基于相机与激光雷达信息融合的目标检测算法研究。针对单一传感器检测鲁棒性差的问题,设计了一种基于相机和激光雷达决策层融合框架。首先对相机和激光雷达传感器进行联合标定,获得坐标系之间的变换关系,利用坐标变换关系将点云检测框投影到图像中,再根据环境的不同选取不同的置信度融合修正方案,最后通过计算检测框的IOU值输出融合结果。实验结果证明,本文提出的检测方案比单一传感器检测算法具有更高的检测精度。

关键词：自动驾驶目标检测多传感器融合深度学习