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雷公藤甲素通过调节cAMP/PKA/BDNF信号通路促进脑缺血再灌注损伤神经元可塑性

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中国现代应用药学 2024年第7期41卷 911-916页

作者：穆秉桃郭敏芳于婧文张慧宇山西大同大学医学院山西大同037009 山西大同大学中医药健康服务学院山西大同037009

目的研究雷公藤甲素(triptolide,TP)对脑缺血再灌注(ischemia-reperfution,I/R)损伤大鼠的疗效评价及其发挥效能的机制。方法大脑中动脉线栓法手术复制大鼠脑I/R损伤模型,治疗组给予TP(0.1,0.2 mg·kg^(-1)),同时设假手术组。Longa评分... 详细信息

目的研究雷公藤甲素(triptolide,TP)对脑缺血再灌注(ischemia-reperfution,I/R)损伤大鼠的疗效评价及其发挥效能的机制。方法大脑中动脉线栓法手术复制大鼠脑I/R损伤模型,治疗组给予TP(0.1,0.2 mg·kg^(-1)),同时设假手术组。Longa评分法测评鼠神经功能,尼氏染色呈现大鼠缺血侧脑组织神经元形态,免疫荧光法检测缺血侧脑组织中MAP2和Syn的表达水平。Western blotting法检测cAMP、PKA、BDNF、Syn、PSD-95的表达水平。结果与模型组比较,TP治疗组神经学评分明显下降(P<0.01或P<0.001),对损伤神经元有保护作用,且TP治疗组cAMP、PKA、BDNF、PSD-95、Syn的表达均显著上调。结论TP治疗能显著改善I/R损伤,其机制可能与激活cAMP/PKA/BDNF信号通路有关。

关键词：雷公藤甲素缺血再灌注突触可塑性环磷酸腺苷蛋白激酶A 脑源性神经营养因子

法舒地尔通过促进线粒体自噬抑制NLRP3炎性小体激活改善APP/PS1转基因小鼠认知功能

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细胞与分子免疫学杂志 2024年

作者：刘怀绢章培军于婧文王记委尉杰忠郭敏芳山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西大同大学附属第一医院/大同市第五人民医院神经科

目的基于线粒体自噬和含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3（NLRP3）炎性小体（inflammasome）途径探究法舒地尔改善淀粉样前体蛋白/早老素1（APP/PS1）转基因小鼠认知功能障碍的机制。方法 APP/PS1小鼠分为模型组以及... 详细信息

目的基于线粒体自噬和含pyrin结构域核苷酸结合寡聚结构域样受体家族蛋白3（NLRP3）炎性小体（inflammasome）途径探究法舒地尔改善淀粉样前体蛋白/早老素1（APP/PS1）转基因小鼠认知功能障碍的机制。方法 APP/PS1小鼠分为模型组以及治疗组，C57BL/6小鼠为对照组。治疗组每日腹腔注射25 mg/kg的法舒地尔，连续2个月，对照组和模型组注射同等体积的生理盐水。水迷宫和Y迷宫实验检测小鼠行为学；尼氏染色法和神经元特异性核抗原（NeuN）免疫荧光组织化学染色评估神经元的数量和形态，原位末端转移酶标记技术(TUNEL)染色检测神经元凋亡；免疫荧光组织化学染色检测P62和NLRP3的表达；实时荧光定量PCR检测第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物（PTEN）诱导的推定激酶1（PINK1）、帕金森病蛋白（Parkin）和NLRP3 mRNA的表达水平；Western blot法检测PINK1、Parkin、P62、微管相关蛋白1轻链3（LC3）、NLRP3、含C末端胱天蛋白酶活化和募集结构域凋亡相关斑点样蛋白（ASC）和白细胞介素18（IL-18）的表达。结果水迷宫和Y迷宫结果显示，治疗组小鼠认知行为明显改善，其空间记忆和探索能力显著提高；尼氏染色结果和NeuN免疫荧光组织化学染色结果显示，与对照组相比，模型组小鼠神经元数量减少，尼氏小体减少，法舒地尔治疗后神经元的形态和数量均有所改善，TUNEL染色结果还表明，法舒地尔治疗后APP/PS1小鼠脑组织中凋亡细胞数减少；与对照组相比，模型组PINK1、Parkin表达减少，P62、LC3、NLRP3、ASC和IL-18表达增加，法舒地尔治疗后PINK1、Parkin和LC3表达增加，P62、NLRP3、ASC和IL-18表达减少。结论法舒地尔可以改善APP/PS1小鼠的认知功能，并改善其神经元损伤，其机制可能与促进线粒体自噬进而抑制NLRP3炎性小体的激活有关。

关键词：阿尔茨海默病淀粉样前体蛋白／早老素１（APP/PS1）小鼠法舒地尔线粒体自噬炎性小体(inflammasome)

枸杞多糖调节线粒体动力学改善过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞的凋亡

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中国组织工程研究 2024年

作者：王记委李雁冰郭敏芳孟涛于婧文刘晓琴穆秉桃贾思玮马存根尉杰忠山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西大同大学脑科学研究所大同市第五人民医院

背景：大量研究结果证明，神经退行性疾病与氧化应激损伤和线粒体动力学失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用，但其能否通过调控线粒体动力学异常来改善氧化应激损伤引发的细胞凋亡尚不明确。目的：研究枸杞多糖... 详细信息

背景：大量研究结果证明，神经退行性疾病与氧化应激损伤和线粒体动力学失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用，但其能否通过调控线粒体动力学异常来改善氧化应激损伤引发的细胞凋亡尚不明确。目的：研究枸杞多糖对过氧化氢诱导人源神经母瘤细胞SH-SY5Y凋亡的影响。方法：将SH-SY5Y细胞分3组培养：对照组常规培养24 h，过氧化氢组加入过氧化氢处理24 h，枸杞多糖组加入枸杞多糖处理2 h后再加入过氧化氢处理24 h。处理结束后，采用Elisa法检测细胞上清中丙二醛、谷胱甘肽和超氧化物歧化酶水平，JC-1试剂盒检测线粒体膜电位，MTT法检测细胞活力，TUNEL法检测细胞凋亡情况，免疫荧光染色与Western Blot检测线粒体动力学相关蛋白(磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1、线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1)与凋亡蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)表达。结果与结论：(1)与对照组相比，过氧化氢组丙二醛水平升高(P <0.05)，超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平降低(P <0.05)；与过氧化氢组相比，枸杞多糖组丙二醛水平降低(P <0.05)，超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平升高(P <0.05)；(2)过氧化氢组线粒体膜电位低于对照组(P <0.05)，枸杞多糖组线粒体膜电位高于过氧化氢组(P<0.05)；(3)与对照组相比，过氧化氢组细胞凋亡率与Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05)，细胞活力与Bcl-2蛋白表达降低(P <0.05)；与过氧化氢组相比，枸杞多糖组细胞凋亡率与Bax、Caspase-3蛋白表达降低(P <0.05)，细胞活力与Bcl-2蛋白表达升高(P <0.05)；(4)与对照组相比，过氧化氢组磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1的蛋白表达升高(P <0.05)，线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1的蛋白表达降低(P <0.05)；与过氧化氢组相比，枸杞多糖组磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1的蛋白表达降低(P <0.05)，线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1的蛋白表达升高(P <0.05)；(5)结果表明，枸杞多糖可通过调节线粒体动力学来改善氧化应激损伤诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。

关键词：枸杞多糖氧化应激线粒体动力学神经退行性疾病细胞凋亡

黄芪甲苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠T细胞免疫调节的影响

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中国组织工程研究 2024年第7期28卷 1057-1062页

作者：穆秉桃于婧文刘春云郭敏芳孟涛杨鹏伟魏文悦宋丽娟尉杰忠马存根山西大同大学脑科学研究所山西省大同市037009 晋城市第二人民医院山西省晋城市048000 山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室山西省晋中市030619 山西医科大学生理学系山西省太原市030032

背景:多发性硬化初始阶段,中枢免疫细胞激活并释放大量炎症因子,引起白质脱髓鞘甚至累及灰质神经元。CD4^(+)T细胞不同亚群之间的分化平衡在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的病程进展中发挥... 详细信息

背景:多发性硬化初始阶段,中枢免疫细胞激活并释放大量炎症因子,引起白质脱髓鞘甚至累及灰质神经元。CD4^(+)T细胞不同亚群之间的分化平衡在实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的病程进展中发挥着重要作用。课题组前期研究结果表明黄芪内有效成分黄芪甲苷能够调节EAE小鼠体内免疫反应,其是否对T细胞亚群分化具有调节作用尚未明确。目的:探究黄芪甲苷对EAE小鼠治疗效果及其对T细胞的免疫调控机制。方法:将C57BL/6雌性小鼠分为正常对照组、EAE疾病模型组和黄芪甲苷治疗组,每组8只,后2组使用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55(MOG35-55)制备EAE模型,免疫后第10-28天,黄芪甲苷治疗组以40 mg/(kg·d)灌胃给药。免疫当天至第28天,记录各组小鼠的体质量及临床评分;免疫后第28天取小鼠脊髓制成冰冻切片行苏木精-伊红染色、固蓝染色观察脊髓病理改变,流式细胞术检测脾脏T细胞亚群百分比,Western blot法检测脊髓组织中γ干扰素、白细胞介素17、白细胞介素6的蛋白表达,ELISA检测脾细胞上清液中γ干扰素、白细胞介素17、白细胞介素6、白细胞介素4水平。结果与结论:(1)与EAE疾病模型组相比,黄芪甲苷治疗能够减少EAE小鼠体质量丢失(P<0.05),缓解临床症状(P<0.05),减轻脊髓炎症细胞浸润及髓鞘脱失病理改变(分别为P<0.01和P<0.05);(2)与EAE疾病模型组相比,黄芪甲苷治疗可抑制表达γ干扰素和白细胞介素17的CD4^(+)T细胞亚群比例(分别为P<0.001和P<0.001),上调表达白细胞介素10和转化生长因子β的CD4^(+)T细胞亚群百分比(分别为P<0.001和P<0.01);(3)黄芪甲苷可下调脊髓和脾脏中γ干扰素(分别为P<0.05和P<0.01)、白细胞介素17(分别为P<0.05和P<0.05)、白细胞介素6(分别为P<0.05和P<0.05)的表达,上调脾脏中抑炎因子白细胞介素4的表达(P<0.01);(4)结果说明,黄芪甲苷可以减轻EAE小鼠的临床症状,其机制与调节脾脏免疫细胞亚群进而抑制炎症细胞向中枢浸润、减少髓鞘脱失有关。

关键词：中枢神经系统多发性硬化实验性自身免疫性脑脊髓炎髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55 黄芪甲苷 T细胞炎症

黄芪甲苷可抑制炎性诱导星形胶质细胞激活及炎症反应

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中国组织工程研究 2024年第31期28卷 5022-5028页

作者：于婧文郭敏芳张冰心穆秉桃孟涛张慧宇马存根殷金珠宋丽娟尉杰忠山西大同大学脑科学研究所/分子细胞免疫学大同市重点实验室/附属第一医院神经科山西中医药大学国家中医药管理局多发性硬化益气活血重点研究室/神经生物学研究中心国药同煤总医院神经外科/山西省卫健委神经疾病防治研究重点实验室山西大同市第五人民医院

背景：星形胶质细胞在中枢神经系统疾病的病理中起着重要作用。星形胶质细胞的表型变化及功能改变，提示其可能是中枢神经系统疾病的有效治疗靶点。前期研究证实，黄芪甲苷可以抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的星形胶质细胞炎... 详细信息

背景：星形胶质细胞在中枢神经系统疾病的病理中起着重要作用。星形胶质细胞的表型变化及功能改变，提示其可能是中枢神经系统疾病的有效治疗靶点。前期研究证实，黄芪甲苷可以抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的星形胶质细胞炎性反应，其是否可以通过Notch-1及其下游信号通路调控星形胶质细胞表型和功能，尚不清楚。目的：探讨黄芪甲苷对炎性诱导的星形胶质细胞激活及炎症反应的影响及可能机制。方法：体外培养新生C57BL/6小鼠大脑皮质星形胶质细胞，CCK-8法检测星形胶质细胞活力确定黄芪甲苷及Notch活性抑制剂DAPT的最适浓度；然后将星形胶质细胞分为5组：PBS组、LPS组、LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组和LPS+DAPT+黄芪甲苷组，ELISA法检测炎性因子分泌水平，Griess法检测一氧化氮水平，用Transwell小室将星形胶质细胞与脾脏单个核细胞共培养，观察CD4 T细胞的迁移情况，免疫荧光染色检测星形胶质细胞活化标志物GFAP、星形胶质细胞的A1标记物C3、A2标记物S100A10以及信号通路相关Notch-1、Jag-1的表达，Western blot法检测CFB、C3、S100A10、PTX3、Notch-1、Jag-1和Hes的表达。结果与结论：(1)根据CCK-8结果，筛选黄芪甲苷终浓度为25μmol/L,DAPT终浓度为50μmol/L进行后续实验；(2)与PBS组相比，LPS组白细胞介素6、白细胞介素12和一氧化氮分泌水平显著升高(P 0.05,P 0.05)的表达增加；(5)与PBS组相比，LPS组Jag-1、Notch-1和Hes表达明显增加(均为P <0.01)；与LPS组相比，LPS+黄芪甲苷组、LPS+DAPT组、LPS+DAPT+黄芪甲苷组Jag-1(均为P <0.01)、Notch-1(均为P <0.01)和Hes(P <0.05,P <0.01,P <0.01)表达显著减少；(6)结果表明：黄芪甲苷可通过调控Notch-1信号通路促进星形胶质细胞由A1型向A2型转化，减少炎性因子的分泌和CD4 T细胞的迁移，从而抑制星形胶质细胞的激活和炎性反应。

关键词：黄芪甲苷脂多糖星形胶质细胞 Notch-1/Hes信号通路神经炎性反应 DAPT

枸杞多糖调节线粒体动力学改善过氧化氢诱导SH-SY5Y细胞的凋亡

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中国组织工程研究 2025年第13期29卷 2736-2743页

作者：王记委李雁冰郭敏芳孟涛于婧文刘晓琴穆秉桃贾思玮马存根尉杰忠山西中医药大学神经生物学研究中心/国家中医药管理局益气活血法治疗多发性硬化重点研究室山西省晋中市030619 山西大同大学脑科学研究所山西省大同市037009 大同市第五人民医院山西省大同市037009

背景:大量研究结果证明,神经退行性疾病与氧化应激损伤和线粒体动力学失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用,但其能否通过调控线粒体动力学异常来改善氧化应激损伤引发的细胞凋亡尚不明确。目的:研究枸杞多糖对过... 详细信息

背景:大量研究结果证明,神经退行性疾病与氧化应激损伤和线粒体动力学失衡密切相关。课题组前期研究表明枸杞多糖具有神经保护作用,但其能否通过调控线粒体动力学异常来改善氧化应激损伤引发的细胞凋亡尚不明确。目的:研究枸杞多糖对过氧化氢诱导人源神经母瘤细胞SH-SY5Y凋亡的影响。方法:将SH-SY5Y细胞分3组培养:对照组常规培养24 h,过氧化氢组加入过氧化氢处理24 h,枸杞多糖组加入枸杞多糖处理2 h后再加入过氧化氢处理24 h。处理结束后,采用试剂盒检测细胞沉淀中丙二醛、谷胱甘肽和超氧化物歧化酶水平,JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡情况,免疫荧光染色与Western Blot检测线粒体动力学相关蛋白(磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1、线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1)与凋亡蛋白(Bax、Bcl-2、Caspase-3)表达。结果与结论:①与对照组相比,过氧化氢组丙二醛水平升高(P<0.05),超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平降低(P<0.05);与过氧化氢组相比,枸杞多糖组丙二醛水平降低(P<0.05),超氧化物歧化酶和谷胱甘肽水平升高(P<0.05);②过氧化氢组线粒体膜电位低于对照组(P<0.05),枸杞多糖组线粒体膜电位高于过氧化氢组(P<0.05);③与对照组相比,过氧化氢组细胞凋亡率与Bax、Caspase-3蛋白表达升高(P<0.05),细胞活力与Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);与过氧化氢组相比,枸杞多糖组细胞凋亡率与Bax、Caspase-3蛋白表达降低(P<0.05),细胞活力与Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05);④与对照组相比,过氧化氢组磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1的蛋白表达升高(P<0.05),线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1的蛋白表达降低(P<0.05);与过氧化氢组相比,枸杞多糖组磷酸化启动蛋白1、线粒体分裂蛋白1的蛋白表达降低(P<0.05),线粒体融合蛋白1、线粒体融合蛋白2、视神经萎缩症蛋白1的蛋白表达升高(P<0.05);⑤结果表明,枸杞多糖可通过调节线粒体动力学来改善氧化应激损伤诱导的SH-SY5Y细胞凋亡。

关键词：枸杞多糖氧化应激线粒体动力学神经退行性疾病细胞凋亡

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《伤寒杂病论》“渴”症证治规律研究

《伤寒杂病论》“渴”症证治规律研究

作者：于婧文辽宁中医药大学

学位级别：硕士

目的:分析和归纳《伤寒杂病论》中“渴”症的治疗方法及其遣方用药规律,为临床实践中“渴”症的治疗理清思路。方法:本文主要是运用统计法和文献研究法来进行探讨。将《伤寒杂病论》中与“渴”症相关的条文进行系统的整理与归纳,全面地... 详细信息

目的:分析和归纳《伤寒杂病论》中“渴”症的治疗方法及其遣方用药规律,为临床实践中“渴”症的治疗理清思路。方法:本文主要是运用统计法和文献研究法来进行探讨。将《伤寒杂病论》中与“渴”症相关的条文进行系统的整理与归纳,全面地把握仲景对于“渴”症的认识。文章分为五个部分,分别是《伤寒杂病论》中“渴”症的病机、辨“渴”对临床的指导意义、“渴”症的治法、治疗“渴”症的方剂以及治疗“渴”症的药物。结果:《伤寒论》中明确提到“渴”的条文有35条,《金匮要略》中提到“渴”的原文有42条。“渴”症的病机从大的角度来讲,有津液匮乏与津液输布障碍两方面,又可以细分为热邪伤津、水热互结、阴虚津亏、湿热郁蒸、脾肾阳虚、水饮内停和瘀血内阻。“渴”症的治疗方法可以分为清热生津法、少少与饮法、急下存阴法、养阴生津法、通阳化气法、育阴利水法、泄热逐水法、活血化瘀法和温肾助阳法。从辨“渴”对临床的指导意义上讲,通过辨口渴的程度及其伴随症状,可以确定病性,提示病位,判断传变,判别预后安危,并且能够为日常饮食与病后调护提供积极的指导。从治疗“渴”症的方药来讲,仲景在书中根据不同的病机,给出了多种多样的配伍组合,可以将其总结为一点,即“观其脉证,知犯何逆,随证治之。”结论:1.在病机方面,仲景重视实邪与肾的气化功能。仲景在组方用药中直取实邪,邪去则口渴自止;对水液代谢失常所致的“渴”症,治疗中应把肾的气化功能恢复放在首位。2.在辨证方面,仲景注重问诊。由于饮食水谷为后天精气之源,故仲景特别注意对病者饮食口味的询问。问诊对津液的盈亏、输布状态及脏腑功能的判断,均具有重要的指导意义。3.在治疗方面,除常规用药,仲景亦十分注重“渴”症的病后护理。日常生活中,应注意对饮水的“度”的把握,病后护理时,更要对“如何饮水”给予重视。创新点:本研究将《伤寒论》与《金匮要略》合而论之,较为系统而全面地整理了仲景书中“渴”症的相关条文,并从“渴”症的病机、治法、方药及预后等方面多角度进行剖析,归纳总结出仲景治疗“渴”症时的遣方用药规律,为临床实践中“渴”症的治疗理清思路。

关键词：张仲景伤寒杂病论口渴证治规律

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基于学习任务群的高中写作教学浅析

汉字文化 2022年第6期 107-108页

作者：于婧文吉林师范大学文学院 130000

针对目前写作教学现状,结合《普通高中语文课程标准》(2017年版)所规范的具体要求,归纳总结了目前写作教学中存在的系列问题,针对性地提出相应的解决方式,以探索新的写作教学规范与模式,做到从教师到学生的全方位参与,使写作教学行之有... 详细信息

针对目前写作教学现状,结合《普通高中语文课程标准》(2017年版)所规范的具体要求,归纳总结了目前写作教学中存在的系列问题,针对性地提出相应的解决方式,以探索新的写作教学规范与模式,做到从教师到学生的全方位参与,使写作教学行之有效,从而培养学生写作能力以达到相应标准。

关键词：高中语文写作教学写作能力

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五苓散与栝楼瞿麦丸的证治比较研究

中医临床研究 2023年第34期15卷 89-91页

作者：于婧文郭晓东辽宁中医药大学辽宁沈阳110000

《金匮要略》是我国现存最早的一部论述杂病诊治的专书,它的问世不仅奠定了中医学的基础,也为后世中医理论的发展以及方书涌现开创了先河。在《金匮要略》原文中,五苓散证与栝楼瞿麦丸证的主诉均出现了口渴与小便不利的症状,但在临床上... 详细信息

《金匮要略》是我国现存最早的一部论述杂病诊治的专书,它的问世不仅奠定了中医学的基础,也为后世中医理论的发展以及方书涌现开创了先河。在《金匮要略》原文中,五苓散证与栝楼瞿麦丸证的主诉均出现了口渴与小便不利的症状,但在临床上的具体应用情况却有很大的区别。五苓散治疗的是太阳病表邪不解,外邪入里,波及了太阳之腑膀胱,见到膀胱气化不行的小便不利之证,是一个表里双解之方,需要通阳化气,以恢复机体的气化功能;栝楼瞿麦丸证则是在膀胱蓄水证的基础上出现了口苦口渴的症状,集中表现为阳虚水停、津液匮乏、火邪上炎的问题,需要温补肾阳、生津止渴,以振奋阳气,畅达津液。在治疗时,对基础理论知识的把握、对四诊得到信息的整合,以及对各味药物的理解与认识,都会影响对疾病的判断,临证时不可为疾病的表象所惑。

关键词：《金匮要略》小便不利五苓散栝楼瞿麦丸