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肿瘤干细胞标志物CD133检测在胃癌诊断中的意义

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临床检验杂志 2011年第2期29卷 112-114页

作者：严家来钱晖朱伟严永敏曹慧玲许晓蒙孙靖徐哲钱茜许文荣江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013 安徽医学高等专科学校合肥230601

目的检测胃癌组织和癌旁组织中肿瘤干细胞标志物CD133的表达,探讨其与临床病理参数的相关性和在肿瘤诊断中的意义。方法收集36例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,用RT-PCR检测CD133的mRNA表达,用免疫组织化学技术检测CD133蛋... 详细信息

目的检测胃癌组织和癌旁组织中肿瘤干细胞标志物CD133的表达,探讨其与临床病理参数的相关性和在肿瘤诊断中的意义。方法收集36例胃癌患者手术切除的癌组织和对应的癌旁组织,用RT-PCR检测CD133的mRNA表达,用免疫组织化学技术检测CD133蛋白质的表达,分析CD133 mRNA在胃癌组织中的表达与临床病理参数的相关性。结果 CD133 mRNA表达阳性率为胃癌组织66.7%(24/36),癌旁组织为16.7%(6/36),差异有统计学意义(P<0.01);胃癌组织中CD133表达阳性率与肿瘤分化状态相关,低、未分化组高于中、高分化组(P<0.01),但与年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度、TNM分期和有无淋巴结转移无关。结论肿瘤干细胞标志物CD133的表达与胃癌的发生及分化状态相关,可作为胃癌诊断的一个新的分子标志物。

关键词：胃癌 CD133 免疫组织化学肿瘤干细胞

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临床分子生物学检验实验教学实践和探讨

科教文汇 2014年第13期 60-61页

作者：张徐周丽萍孙梓暄严永敏钱晖江苏大学基础医学与医学技术学院分子诊断系江苏镇江212013

临床分子生物学检验是运用分子生物学技术在临床辅助诊断、治疗和预后评估的学科。本文提出通过优化实验教学模式和内容,完善师资队伍和实验室建设,建立多样化考核方式等实验教学改革,提高了学生学习兴趣,促进了学生实践技能掌握,培养... 详细信息

临床分子生物学检验是运用分子生物学技术在临床辅助诊断、治疗和预后评估的学科。本文提出通过优化实验教学模式和内容,完善师资队伍和实验室建设,建立多样化考核方式等实验教学改革,提高了学生学习兴趣,促进了学生实践技能掌握,培养了学生创新和应用能力。

关键词：分子生物学临床检验实验教学

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模块化开放式临床分子生物学实验教学探讨

基础医学教育 2020年第11期22卷 817-819页

作者：李晓曦杨大凯孙梓暄张徐严永敏周丽萍钱晖江苏大学医学院分子生物学及检验教研室镇江200031

近年来,分子生物学技术在临床医学中得到快速发展,但目前各医学院校开设的临床分子生物学实验课程,在课程设计和实验内容中缺乏与临床分子诊断问题的融合,无法满足当前临床分子检验对医药人才的要求。文章对医药专业的临床分子生物学实... 详细信息

近年来,分子生物学技术在临床医学中得到快速发展,但目前各医学院校开设的临床分子生物学实验课程,在课程设计和实验内容中缺乏与临床分子诊断问题的融合,无法满足当前临床分子检验对医药人才的要求。文章对医药专业的临床分子生物学实验课程教学设计进行再思考,提出将实验课程设置成开放式教学模式,培养学生在实验设计和实施全过程的独立思考能力,指导学生能够将分子生物学理论和技术与解决临床实际问题相结合,从而适应当前临床基因诊断领域对医药专业人才的要求。

关键词：分子生物学实验教学实验模块

TGF-β1诱导人肝HL7702细胞发生上皮细胞间质转化的实验研究

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江苏大学学报（医学版） 2012年第2期22卷 93-96页

作者：李婷芬王冰莹严永敏李里明蒋留留钱晖江苏大学基础医学与医学技术学院江苏镇江212013

目的:探讨体外培养的人肝细胞系在重组人转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下是否发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchyme transition,EMT)以及相关标志物的表达变化。方法:人类肝细胞HL7702在含20%小牛血清的1640培养液培养2 d,改用无血... 详细信息

目的:探讨体外培养的人肝细胞系在重组人转化生长因子β1(TGF-β1)诱导下是否发生上皮-间质转化(epithelial-mesenchyme transition,EMT)以及相关标志物的表达变化。方法:人类肝细胞HL7702在含20%小牛血清的1640培养液培养2 d,改用无血清培养并TGF-β1分别诱导24 h,48 h,72 h;观察诱导前后细胞的形态学变化,实时荧光定量RT-PCR及蛋白质免疫印迹技术分析细胞中EMT相关基因和蛋白表达情况。结果:显微镜下观察到TGF-β1诱导前,肝细胞是不规则的六边形,诱导后细胞形态拉长变成纺锤形,细胞间隙变大;实时荧光定量RT-PCR和免疫印迹显示上皮化标志物E-钙黏附蛋白在TGF-β1诱导后的细胞中表达显著下降,而间质化标志物N-钙黏附蛋白、波形蛋白和Twist却显著增加。结论:正常人类肝细胞株HL7702经重组人TGF-β1的诱导发生上皮-间质转化,这为深入研究TGF-β1和肝纤维化之间的关系奠定了基础。

关键词：人肝细胞株转化生长因子β1 上皮-间质转化

人磷酸二酯酶同功酶3B在昆虫杆状病毒表达系统中的表达

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人磷酸二酯酶同功酶3B在昆虫杆状病毒表达系统中的表达

超敏酶标术中快速免疫组化技术在临床工作中的应用

华东六省一市生物化学与分子生物学会2008年学术交流会

作者：严永敏许文荣朱海波张岭费仁仁王晓良钱晖郝顺祖王文兵江苏大学医学技术学院中国医学科学院药物研究所江苏大学生环学院

目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同功酶3B(HPDE3B)在Tn细胞中的表达。方法用重组HPDE3B杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达,通过RT-PCR、SDS-PAGE和Western-blot技术检测HPDE3B表达情况。结果重组杆状病毒在感染Tn细胞后形... 详细信息

目的利用杆状病毒表达系统探讨人磷酸二酯酶同功酶3B(HPDE3B)在Tn细胞中的表达。方法用重组HPDE3B杆状病毒感染昆虫Tn细胞进行蛋白表达,通过RT-PCR、SDS-PAGE和Western-blot技术检测HPDE3B表达情况。结果重组杆状病毒在感染Tn细胞后形态变化明显,获得表达产物,RT-PCR扩增结果证实了HPDE3B cDNA转录后Tn细胞中mRNA的水平,细胞能够表达出与HPDE3B多克隆抗体结合的蛋白,蛋白分子量为120KD;结论HPDE3B在昆虫杆状病毒表达系统中可以稳定的表达,为进一步研究HPDE3B的生物学活性及作用奠定了基础。

关键词： HPDE3B Tn细胞杆状病毒表达系统

来源： cnki会议评论

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cnki会议

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系统医学 2023年第19期8卷 53-55,59页

作者：施洋严永敏镇江市第一人民医院病理科江苏镇江212000 江苏大学医学院检验医学系江苏镇江212013

目的研究超敏酶标术中快速免疫组化技术在临床工作中的应用。方法选取2022年2月—2023年5月镇江市第一人民医院诊治的162例术中肿瘤疑似患者为研究对象,所有研究对象均予以快速免疫组化检测,并以石蜡免疫组化法检测结果作为金标准。分... 详细信息

目的研究超敏酶标术中快速免疫组化技术在临床工作中的应用。方法选取2022年2月—2023年5月镇江市第一人民医院诊治的162例术中肿瘤疑似患者为研究对象,所有研究对象均予以快速免疫组化检测,并以石蜡免疫组化法检测结果作为金标准。分析不同检测方式肿瘤符合率等诊断效能。结果阳性定位指标符合率为92.68%(76/82);表达强度指标符合率为87.80%(72/82);阳性细胞百分比指标符合率为95.12%(78/82);组织背景指标符合率为85.37%(70/82);超敏酶标术中快速免疫组化法检测准确度为98.77%。结论在针对恶性肿瘤疾病进行术中检测时,选择超敏酶标予以快速免疫组化能够具有较高的符合率,表达更为准确,建议在术中冰冻诊断中作为重要的辅助诊断依据。

关键词：超敏酶标快速免疫组化石蜡免疫组化法恶性肿瘤术中冰冻诊断染色

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基于HIM-PBL教育改革下的医学检验技术混合教学模式研究

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中国医学教育技术 2019年第1期33卷 121-125页

作者：孙梓暄许潇赵媛媛张徐严永敏周丽萍邵世和钱晖龚爱华江苏大学医学院江苏镇江212013

基于"实施健康中国战略"和医学检验技术本科教育改革的引导及需求,医学检验技术混合式问题导向学习(problem-based learning,PBL)模式秉持以学生自主学习为中心的教育理念,结合源于临床检验病例的整合化教学案例,以经典PBL为核心,有机... 详细信息

基于"实施健康中国战略"和医学检验技术本科教育改革的引导及需求,医学检验技术混合式问题导向学习(problem-based learning,PBL)模式秉持以学生自主学习为中心的教育理念,结合源于临床检验病例的整合化教学案例,以经典PBL为核心,有机融入在线医学教学,以求双赢,改善现有在线教学内容固化、PBL自主学习资源的混杂等现状。文章结合江苏大学实践,介绍了医学检验技术混合式PBL研究的需求、基础和策略。

关键词：自主学习混合式PBL 在线开放课程医学检验技术

HucMSC-ex通过Let-7b调控TGF-βR_1抑制肝星状细胞胶原合成

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江苏大学学报（医学版） 2018年第6期28卷 478-482页

作者：蔡梦洁钱嘉莉陈逸菲王岩金赵婷刘锦文沈松严永敏江苏大学医学院江苏镇江212013 江苏大学药学院江苏镇江212013

目的:探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cells derived exosome,Huc MSC-ex)对肝星状细胞LX-2胶原合成的影响及作用机制。方法:提取Huc MSC-ex,采用透射电镜分析Huc MSC-ex形态,蛋白质印迹法检... 详细信息

目的:探讨人脐带间质干细胞来源的外泌体(human umbilical cord mesenchymal stem cells derived exosome,Huc MSC-ex)对肝星状细胞LX-2胶原合成的影响及作用机制。方法:提取Huc MSC-ex,采用透射电镜分析Huc MSC-ex形态,蛋白质印迹法检测特异性标志蛋白CD9和CD63的表达;建立TGF-βR_1诱导的人肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC) LX-2细胞株活化模型,分别加入25,50和100μg/m L Huc MSC-ex共培养,另设对照组(常规培养),qRT-PCR检测4组Col1、Col3、TGF-βR_1和Let-7b mRNA表达,免疫印迹法检测对应的蛋白表达; Let-7b过表达转染LX-2细胞株,qRT-PCR和免疫印迹法检测LX-2中TGF-βR_1、αSMA蛋白和mRNA表达。结果:Huc MSC-ex是30～100 nm的膜性囊泡,表达外泌体的特异标志CD9和CD63。与对照组相比,Huc MSC-ex处理组中Col1、Col3和TGF-βR_1表达明显下调(P均<0. 001),而Let-7b表达明显上调(P均<0. 001); Let-7b过表达显著抑制LX-2细胞中TGF-βR_1和α-SMA的表达(P均<0. 05)。结论:Huc MSC-ex转运Let-7b到肝星状细胞,调控肝星状细胞TGF-βR_1表达,抑制肝星状LX-2细胞胶原合成。

关键词： Let-7b 人脐带间质干细胞来源的外泌体肝星状细胞

体外诱导人骨髓间质干细胞分化为肝细胞样细胞

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江苏大学学报（医学版） 2008年第1期18卷 6-10,14,I0001页

作者：司煜安许文荣严永敏钱晖朱伟周忠海徐静周洪兴曹慧玲李继刚江苏大学医学技术学院江苏镇江212013

目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞。方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob lastgrowth factor,bFGF)及C... 详细信息

目的:探讨人骨髓间质干细胞(MSCs)在体外特定条件下是否可以转化为肝细胞样细胞。方法:分离培养人骨髓间质干细胞,采用肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibrob lastgrowth factor,bFGF)及CC l4损伤的小鼠肝脏共培养等诱导方式,在不同时间点分别用RT-PCR和荧光定量PCR检测肝细胞特异性基因的表达,免疫组织化学染色检测肝细胞标志。结果:在HGF和bFGF诱导第7天时甲胎蛋白(alphafetal prote in,AFP)、细胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK18)和色氨酸2,3-双加氧酶(tryptophan 2,3-d ioxygenase,TDO)基因表达阳性,CK18和TDO的表达随诱导时间延长增高;第7天诱导细胞组织化学染色AFP、白蛋白(ALB)、肝细胞核因子(hepatocyte nuc lear factor,HNF)、肝细胞特异性抗原(HSA)和CK18表达阳性。与损伤小鼠肝组织共培养21 d后细胞表达AFP和TDO。结论:HGF和bFGF联合诱导以及与CC l4损伤肝组织共培养的方法可体外促进人MSCs分化为肝细胞样细胞,可为肝脏疾病或肝损伤的干细胞治疗提供细胞来源。

关键词：骨髓间充质干细胞肝细胞细胞分化