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谷胱甘肽过氧化物酶3修饰的间充质干细胞通过降低氧化损伤减轻放射性肺损伤

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军事医学 2024年

作者：翟瑞台福敏丁可昕葛常辉郑晓飞付汉江 1.安徽医科大学基础医学院 2.军事科学院军事医学研究院放射生物学北京市重点实验室安徽医科大学基础医学院军事科学院军事医学研究院放射生物学北京市重点实验室

目的探讨谷胱甘肽过氧化物酶3(GPx3)修饰的间充质干细胞（MSC）对小鼠放射性肺损伤（RILI）的保护作用和机制。方法 20 Gy照射小鼠肺部，经尾静脉注射GPx3修饰的MSC，不同时间点收取肺组织，进行切片染色观察病理变化；通过实时定量PCR... 详细信息

目的探讨谷胱甘肽过氧化物酶3(GPx3)修饰的间充质干细胞（MSC）对小鼠放射性肺损伤（RILI）的保护作用和机制。方法 20 Gy照射小鼠肺部，经尾静脉注射GPx3修饰的MSC，不同时间点收取肺组织，进行切片染色观察病理变化；通过实时定量PCR(qPCR)检测炎症相关因子表达水平，生化实验检测丙二醛（MDA）、H2O2和8-羟基鸟嘌呤（8-OHG）含量，反转录阻断联合双引物扩增PCR检测RNA损伤情况。结果 GPx3修饰的MSC能够显著改善辐射后肺组织的病理损伤、抑制炎症反应以及纤维化进程，GPx3修饰后MSC能够更好地清除活性氧（ROS），并减少脂质过氧化产物MDA和RNA氧化损伤的8-OHG修饰。结论 GPx3修饰的MSC通过减少ROS累积以降低氧化损伤进而减轻RILI,GPx3修饰的MSC可以提高RILI的治疗效果。

关键词：谷胱甘肽过氧化物酶3 间充质干细胞氧化损伤放射性肺损伤 8-羟基鸟嘌呤

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地方政府债务的金融风险及防范研究

地方政府债务的金融风险及防范研究

作者：丁可昕沈阳大学

学位级别：硕士

近年来,为了响应中央稳定、发展经济的号召,地方政府致力于加强城市建设和发展核心竞争力。因此,地方政府债务规模迅速扩张,偿债压力也相应的增加。与此同时,地方债务与我国金融体系中的其他行业息息相关,地方债务违约不仅会影响某一行... 详细信息

近年来,为了响应中央稳定、发展经济的号召,地方政府致力于加强城市建设和发展核心竞争力。因此,地方政府债务规模迅速扩张,偿债压力也相应的增加。与此同时,地方债务与我国金融体系中的其他行业息息相关,地方债务违约不仅会影响某一行业的经济发展,这种风险还会向其他行业产生风险溢出效应。因此,地方政府债务风险的金融风险会产生怎样的影响以及产生的不良影响应该如何防范化解已成为学者思考的问题。在此背景下,本文决定研究地方政府债务风险对其他金融机构以及整个金融体系的风险溢出路径,并且辽宁省为研究对象,评估辽宁省的债务违约风险,建立债务风险预警机制,从而为决策者制订政策提供了理论依据。风险溢出的效应分析以与地方政府债务相关的各类金融机构为研究对象,收集2019-2022年在股票市场的收益率。为了使计算结果更具科学性,本文引入流动性利差与信用利差作为状态变量。构建基于动态Co Va R的分位数回归模型。计算了各金融机构对整个社会的Va R值、各金融机构对整个社会的△Co Va R值以及地方城投公司对其他金融机构的△Co Va R值。风险评估的实证分析是以辽宁省为研究对象,选取合适的度量指标,使用因子分析法计算辽宁省近年来的债务违约风险,进而建立风险预警机制。实证结果发现,一是地方政府融资平台对投资公司的风险边际溢出效应最大,对证券公司的次之,对商业银行的最小;并且地方政府融资平台、投资公司对金融体系的风险溢出效应较小,证券公司对金融体系的风险溢出效应最大。二是辽宁省的风险处于全国较高的水平,并且当综合债务风险指数低于100时,意味着处于很高的债务风险水平,当地政府应提前制定应对措施,避免产生更严重的后果。最后,为了更好的降低、预防政府融资平台可能造成的风险,基于对是地方政府债务的风险传播研究,为政府加强抵御风险薄弱的环节提供政策建议。

关键词：地方政府债务风险溢出效应分位数回归动态CoVaR

新型二合一PiggyBac转座系统的构建及功能验证

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中国生物工程杂志 2022年第6期42卷 39-46页

作者：张尧仓彭玉丁可昕台福敏郑晓飞秦宜德付汉江安徽医科大学基础医学院合肥230032 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所放射生物学北京市重点实验室北京100850

目的:PiggyBac(PB)转座子是一种可移动的遗传元件,采用“剪切和粘贴”机制在载体和染色体之间进行转座;通过将转座子元件和转座酶表达框整合到一个表达载体中,构建简便易用的二合一PB转座系统。方法:通过聚合酶链式反应(polymerase chai... 详细信息

目的:PiggyBac(PB)转座子是一种可移动的遗传元件,采用“剪切和粘贴”机制在载体和染色体之间进行转座;通过将转座子元件和转座酶表达框整合到一个表达载体中,构建简便易用的二合一PB转座系统。方法:通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获取PiggyBac转座系统所需转座子元件和转座酶表达框,利用T4 DNA连接酶将转座酶表达框插入到pUC18载体上,再利用Gibson同源重组技术将转座子元件与重组载体结合构建二合一PB转座系统;使用该系统携带的增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)以及功能性损伤抑制蛋白(damage-suppressing protein,DSUP)检测其有效性及可靠性。结果:在所有筛选获得的嘌呤霉素抗性细胞中,EGFP都是明亮可见;利用此二合一PB转座系统成功获得了可高效表达功能性损伤抑制蛋白的稳定细胞系,证明外源基因可被有效整合到基因组DNA中并表达。结论:成功构建了新型二合一PB转座系统,使稳定表达细胞系的建立更加经济简便。

关键词： PiggyBac转座子稳定转染 EGFP

RNase A对人非小细胞肺癌A549细胞生物学行为和功能的影响

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RNase A对人非小细胞肺癌A549细胞生物学行为和功能的影响

作者：丁可昕安徽医科大学

学位级别：硕士

目的:恶性肿瘤是威胁人类生命健康的重大疾病,传统的手术治疗、化学药物疗法、放射疗法和免疫疗法等虽然各有优势,但在应用中也存在诸多局限,并不能完全满足需要。因此,开发特异性好和疗效高的抗肿瘤药物仍然十分必要。RNase作为一类广... 详细信息

目的:恶性肿瘤是威胁人类生命健康的重大疾病,传统的手术治疗、化学药物疗法、放射疗法和免疫疗法等虽然各有优势,但在应用中也存在诸多局限,并不能完全满足需要。因此,开发特异性好和疗效高的抗肿瘤药物仍然十分必要。RNase作为一类广泛存在的具有细胞毒性作用的天然酶类,逐渐显示出作为抗肿瘤药物的潜力。已有研究表明在不同条件下不同的RNase具有促癌或者抑癌的多重作用,但是其具体功能机制尚有待进一步阐明。为此,本文以人非小细胞肺癌A549细胞为模型,深入研究RNase A对A549细胞不同生物学行为和功能的影响,揭示其作用机制,为研发基于RNase的抗癌药物提供理论基础。此外,本文初步研究了RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响,以期为进一步阐释RNase A与细菌感染间的关系提供基础。方法:1.RNase A对A549细胞生物学行为和功能的影响:1)分别通过光学显微镜和激光共聚焦扫描显微镜观察RNase A处理对A549细胞形态的影响。2)通过Transwell法检测不同浓度RNase A处理对A549细胞迁移和侵袭能力的影响。3)利用细胞球形成实验检测不同浓度RNase A处理对A549细胞成球能力的影响。4)采用CCK-8法检测不同浓度RNase A处理对A549细胞增殖的影响。5)采用CCK-8法检测不同浓度RNase A联合化疗药物阿霉素、顺铂对A549细胞杀伤作用的影响。2.RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响:1)分别采用LB和M9培养基培养经不同浓度RNase A处理的大肠杆菌DH5α,绘制生长曲线以检测RNase A对DH5α增殖的影响。2)采用RNase A预处理LB培养基,检测RNase A对DH5α增殖的影响。3)利用菌落形成实验检测RNase A对DH5α菌落形成能力的影响。结果:1.RNase A对A549细胞生物学行为和功能的影响:1)RNase A处理使A549细胞呈现生长离散现象,促进了细胞表面伪足的增加。2)低、中浓度RNase A处理对A549细胞的侵袭转移能力有明显的促进作用。3)RNase A处理抑制A549细胞球形成。4)低浓度RNase A促进A549细胞的增殖水平,高浓度RNase A抑制其增殖水平。5)RNase A与化疗药物阿霉素、顺铂联合使用对A549细胞的杀伤作用具有累加效应。2.RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响:1)在LB和M9培养条件下,不同浓度RNase A均能促进DH5α的增殖水平。2)RNase A处理促进DH5α的菌落形成能力。结论:RNase A体外处理改变A549细胞多种生物学行为和功能,这可能是RNase A通过不同的途径行使了不同的功能所造成的,其内在机制有待进一步研究。另外,在LB和M9培养条件下,RNase A可以促进大肠杆菌DH5α的增殖水平,其作用机制有待进一步阐明。

关键词： RNase A A549 细胞功能大肠杆菌增殖

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具有优先权服务的排队模型及其应用

沈阳大学学报（自然科学版） 2021年第3期33卷 246-251页

作者：李晖丁可昕沈阳大学经济学院辽宁沈阳110041

为提高社会运行效率,减少资源浪费,研究了具有优先权的排队问题.搭建了一个优先服务排队模型并且假设该模型是带有伯努利反馈的;假设顾客的到达过程、服务台的首次服务过程和二次服务过程都是泊松过程,并且不同过程是相互独立的;假设顾... 详细信息

为提高社会运行效率,减少资源浪费,研究了具有优先权的排队问题.搭建了一个优先服务排队模型并且假设该模型是带有伯努利反馈的;假设顾客的到达过程、服务台的首次服务过程和二次服务过程都是泊松过程,并且不同过程是相互独立的;假设顾客在首次接受服务后有反馈情况,顾客的反馈情况服从伯努利分布,每位顾客的反馈次数小于等于1;绘制该系统的状态转移图,建立运行过程的平衡方程组,计算出系统处于不同状态下的概率、平均队长和平均逗留时间;运用MATLAB软件进行数值模拟,观察模拟结果得出系统处于空闲状态概率与顾客反馈率、顾客到达率成反比等结论;以P县为例收集该县2014—2017年首次脱贫与二次脱贫的数据,发现2017年该县接受扶贫帮助的平均队长远高于全国平均水平,说明当地的扶贫任务依然很严峻.

关键词：排队论伯努利反馈单服务台排队模型稳定脱贫

YTHDF2蛋白富集早期胃癌血浆中m6A修饰28S rRNA检测分析

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军事医学 2022年第5期46卷 361-365页

作者：陈璐王沙沙丁可昕付汉江葛常辉令狐恩强郑晓飞军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所放射生物学北京市重点实验室北京100850 解放军总医院第一医学中心消化内科医学部北京100850

目的通过YTHDF2蛋白富集血浆中m6A修饰28S rRNA,分析m6A修饰28S rRNA水平差异在早期胃癌肿瘤标志物筛选中的潜在应用价值。方法基于YTHDF2蛋白特异性结合m6A修饰RNA的特性,采用结合重组蛋白YTHDF2磁球富集血浆中m6A修饰28S rRNA,通过... 详细信息

目的通过YTHDF2蛋白富集血浆中m6A修饰28S rRNA,分析m6A修饰28S rRNA水平差异在早期胃癌肿瘤标志物筛选中的潜在应用价值。方法基于YTHDF2蛋白特异性结合m6A修饰RNA的特性,采用结合重组蛋白YTHDF2磁球富集血浆中m6A修饰28S rRNA,通过逆转录实时定量PCR(qRT-PCR)方法分析早期胃癌患者和健康者血浆样本中m6A修饰28S rRNA的水平。结果与结论 YTHDF2重组蛋白可富集m6A修饰28S rRNA,qRTPCR检测表明早期胃癌血浆中m6A修饰28S rRNA的水平高于健康者。该研究结果为筛选获得基于m6A修饰RNA分子的胃癌早期诊断标志物分子提供了基础。

关键词：早期胃癌血浆 N6-甲基腺嘌呤 YTH结构域家族蛋白2 生物标志物早期诊断

RNase A对大肠杆菌DH5α增殖的影响

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军事医学 2019年第8期43卷 598-601页

作者：丁可昕陈璐付汉江张令强郑晓飞安徽医科大学合肥230032 军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所放射生物学北京市重点实验室北京100850 军事科学院军事医学研究院生命组学研究所北京102206

目的通过RNase A对培养的大肠杆菌增殖影响的研究,探索其在细菌增殖中的作用。方法采用LB和M9培养基培养大肠杆菌DH5α菌株,在培养基中加入不同浓度的RNase A,观察其对细菌增殖和细菌克隆形成的影响。结果在大肠杆菌DH5α培养过程中,外... 详细信息

目的通过RNase A对培养的大肠杆菌增殖影响的研究,探索其在细菌增殖中的作用。方法采用LB和M9培养基培养大肠杆菌DH5α菌株,在培养基中加入不同浓度的RNase A,观察其对细菌增殖和细菌克隆形成的影响。结果在大肠杆菌DH5α培养过程中,外源加入RNase A对大肠杆菌DH5α的增殖和克隆形成有促进作用。结论RNase A可影响大肠杆菌增殖,其作用机制有待阐明。

关键词：核糖核酸酶大肠杆菌细胞增殖细菌感染

胃癌患者血浆长链非编码RNA ENST000005688931.1 RNA片段异质性分析

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军事医学 2021年第3期45卷 172-176页

作者：陈璐王沙沙丁可昕付汉江葛常辉令狐恩强郑晓飞军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所北京100850 放射生物学北京市重点实验室解放军总医院第一医学中心消化内科医学部北京100853

目的通过检测胃癌患者血浆中长链非编码RNA(lncRNA)ENST00000568893.1 RNA序列不同片段水平,探究RNA片段化分析作为筛选胃癌诊断标志物的可行性。方法依据lncRNA ENST00000568893.1 RNA全长序列将其分为3个不同序列片段,分别设计对应各... 详细信息

目的通过检测胃癌患者血浆中长链非编码RNA(lncRNA)ENST00000568893.1 RNA序列不同片段水平,探究RNA片段化分析作为筛选胃癌诊断标志物的可行性。方法依据lncRNA ENST00000568893.1 RNA全长序列将其分为3个不同序列片段,分别设计对应各RNA片段的PCR扩增引物,采用qRT-PCR方法检测lncRNA ENST00000568893.1 RNA不同片段在健康者、胃癌前病变和早期胃癌患者血浆中的含量。结果lncRNA ENST00000568893.1 RNA是以片段化形式存在于血浆中,其不同片段在同类型的血浆样本中含量不同,同一片段在不同类型的血浆中含量不同。结论基于lncRNA ENST00000568893.1 RNA片段在胃癌患者血浆中存在异质性,提示血浆RNA片段异质性可用于筛选胃癌标志物分子,将为肿瘤标志物分子的发现提供新的思路。

关键词：长链非编码RNA 血浆 RNA片段肿瘤标志物胃癌

肝细胞癌PD-1免疫治疗敏感性的靶基因分析

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安徽医科大学学报 2024年 1323-1329+1338页

作者：史宇泽丁可孙倍成南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科安徽医科大学第一附属医院肝胆胰及移植外科南京医科大学鼓楼临床医学院肝胆外科

目的探究肝细胞癌(HCC)患者程序性死亡受体1(PD-1)免疫治疗敏感性的特征基因。方法通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)及差异性分析筛选与PD-1免疫治疗敏感性相关数据集GSE202069及ERP117672中共同差异基因,将上述共同差异基因通过La... 详细信息

目的探究肝细胞癌(HCC)患者程序性死亡受体1(PD-1)免疫治疗敏感性的特征基因。方法通过加权基因共表达网络分析(WGCNA)及差异性分析筛选与PD-1免疫治疗敏感性相关数据集GSE202069及ERP117672中共同差异基因,将上述共同差异基因通过Lasso回归筛选PD-1免疫治疗敏感性的特征基因;通过GEPIA及Ualcan数据库预测特征基因在HCC的表达水平,通过实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹(WB)及免疫组织化学染色(IHC)实验验证其表达。构建过表达3-羟基丁酸脱氢酶1(BDH1)细胞系,通过肿瘤功能学实验细胞计数试剂盒8 (CCK-8)、平板克隆、EdU染色、细胞划痕、Transwell实验探究其对肿瘤细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果通过WGCNA及差异性分析筛选出两项数据集共有118个共同差异基因,Lasso回归筛选出共同差异基因中与PD-1免疫治疗敏感性特征基因(含黄素二甲基苯胺单加氧酶3(FMO3),过氧化物酶体反式-2-烯酰辅酶A还原酶(PECR),BDH1,溶质载体家族7成员1(SLC7A1),细胞色素b5 A型(CYB5A)和磷酸烯醇丙酮酸羧激酶1 (PCK1));生存分析表明BDH1与HCC最为相关(总体生存率:P <0.001;复发:P=0.007)。GEPIA及Ualcan数据库分析显示BDH1在HCC组织中低表达,通过RT-qPCR、WB及IHC对本中心收集的HCC样本进一步证实BDH1在HCC中低表达。CCK-8、平板克隆、EdU染色、细胞划痕、Transwell实验结果显示,与Hep3B pCDH组相比,过表达BDH1使得HCC细胞吸光度降低(t=4.766,P<0.01),克隆形成数目减少(t=16.02,P<0.000 1),增殖细胞比例下降(t=23.13,P <0.000 1),细胞迁移率减慢(t=25.28,P <0.000 1),穿过小室数目减少(t=10.78,P=0.004)。结论 BDH1是观察HCC患者PD-1免疫治疗敏感性的特征基因;BDH1具有抑制HCC细胞增殖、迁移和侵袭的能力。

关键词：肝细胞癌 PD-1免疫治疗 BDH1 肿瘤功能学实验