乳酸脱氢酶C4在肝癌中的表达及其生物学功能研究
作者单位：福建省肿瘤医院
会议名称：《2024中国肿瘤标志物学术大会暨CACA整合肿瘤学高峰论坛暨第十七届肿瘤标志物青年科学家论坛暨中国肿瘤标志物产业创新大会》
会议日期：2024年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要：目的:通过分析乳酸脱氢酶C4(LDH-C4)在(HCC)中的表达及其与HCC患者的临床病理特征及其预后的关系,明确LDH-C4过表达对HCC细胞Bel-7402的细胞生物学行为能力的影响,并探讨相关分子机制。方法:基于高通量肝癌组织芯片,采用免疫组化染色技术检测HCC癌组织中LDH-C4蛋白的表达水平,分析LDH-C4表达情况与肝癌患者临床病理特征的关系。荧光显微镜观察GV492-LDHC病毒感染后的Bel-7402HCC细胞中EGFP表达情况,筛选LDH-C4表达呈阳性的细胞系。通过RT-qPCR鉴定LDH-C4 m RNA过表达的效果。通过CCK-8实验、划痕修复实验及Transwell小室等实验分别检测LDH-C4对HCC细胞Bel-7402在体外的增殖、迁移及侵袭能力的影响。基于建立的LDH-C4稳定过表达的Bel-7402细胞系基础上,对各组细胞中乳酸、丙酮酸等细胞能量代谢产物含量进行检测,同时检测各组肿瘤细胞中葡萄糖消耗水平,探究LDH-C4过表达对Bel-7402HCC细胞能量代谢的影响;通过Western blot实验检测AKT/mTOR信号通路中相关蛋白表达水平受LDH-C4过表达的影响。结果:HCC中的LDH-C4呈现高表达状态,主要表达于HCC细胞的细胞质中,且LDH-C4的表达水平与HCC患者的T分期、临床分期及瘤体大小明显相关(P0.05);生存分析结果提示:LDH-C4高表达患者的预后较低表达者更差(P0.05)。CCK-8实验、划痕修复实验及Transwell小室实验检测结果提示:LDH-C4过表达可提升Bel-7402HCC细胞在体外的迁移侵袭能力,但对生长增殖无明显影响。3.能量代谢实验结果显示:Bel-7402细胞中LDH-C4过表达可提高乳酸产生含量,降低丙酮酸含量,提高细胞对葡萄糖的利用;Western blot结果提示:过表达LDH-C4可上调AKT/mTOR信号通路中AKT蛋白及mTOR蛋白的表达。结论:HCC组织中LDH-C4呈现较高表达状态,与HCC患者的肿瘤大小、T分期以及临床分期呈现明显正相关;LDH-C4可作为HCC患者预后监测的一项重要参考指标。Bel-7402HCC细胞中LDH-C4过表达可促进该细胞在体外的迁移和侵袭能力,促进Bel-7402HCC细胞的能量代谢水平,可能与AKT/mTOR信号通路的激活有关。