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更年汤对大鼠颗粒细胞中P27、CyclinD1影响的研究

更年汤对大鼠颗粒细胞中P27、CyclinD1影响的研究

作     者:张帆 曹俊岩 Ceng li Zhang Xianghua Liu xuan 

作者单位:贵州中医药大学第二附属医院 贵州中医药大学 

会议名称:《贵州省中西医结合学会妇产专业委员会二届一次会议》

会议日期:2021年

学科分类:1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床] 

关 键 词:更年汤 绝经综合征 颗粒细胞 细胞周期 卵泡发育 CyclinD1 P27 

摘      要:探讨更年汤大鼠含药血清对细胞周期调控因子P27、CyclinD1表达的影响,及卵巢颗粒细胞周期分布的变化。方法:10~12月龄SD雌性大鼠共50只,筛选围绝经期模型大鼠40只,随机分为更年汤高、中、低剂量组、替勃龙组、空白对照组。更年汤高、中、低剂量组分别给予64g/(kg·d)、32g/(kg·d)、16g/(kg·d)的剂量灌胃,替勃龙组予0.26mg/(kg·d)替勃龙片溶剂灌胃,每天2次,第四天股动脉采血,制备含药血清。另取3-4月龄SD雌性大鼠60只,进行大鼠颗粒细胞分离与原代培养。对体外培养颗粒细胞分组及加入对应的大鼠含药血清继续培养颗粒细胞。用流式细胞仪检测含药血清作用后颗粒细胞细胞周期分布的变化。蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测颗粒细胞CyclinDl、P27蛋白表达。采用逆转录聚合酶链(RT-PCR)法检测CyclinD1mRNA、P27mRNA的相对表达量。结果:更年汤高剂量组与替勃龙组比较,各期细胞百分比、P27、CyclinD1mRNA相对表达量及CyclinD1、P27蛋白表达水平有差异,无统计学意义(P0.05)。结论:更年汤含药血清能上调大鼠卵巢颗粒细胞上CyclinDlmRNA、CyclinD1蛋白表达及下调P27蛋白、P27mRNA表达,促进颗粒细胞从G1期向S期的转变,推测更年汤可以促使颗粒细胞增殖,从而延缓保护卵巢功能。

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