用于钙网蛋白基因1型突变和2型突变快速检测的的圆盘式微流控芯片平台的建立
作者单位：复旦大学附属华山医院 复旦大学化学系
会议名称：《中国化学会第十三届全国分析化学年会》
会议日期：2018年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
摘 要：目的:出血与血栓是骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者的常见并发症,与患者的发病率和死亡率密切相关,本研究拟建立一个通过环介导等温扩增(LAMP)实现骨髓增殖性肿瘤分子标志物(钙网蛋白基因1型突变和2型突变,即CALR-1/2)快速检测的微流控平台。方法:通过在线设计引物,建立CALR-1、CALR-2和CALR内参的的LAMP检测体系,将检测体系的引物内置于一款新设计的圆盘式微流控芯片,建立用于CALR-1/2突变的微流控芯片平台。结果:所建立的LAMP检测方法具有良好的敏感性、特异性和稳定性。所建立的微流控平台,可以在60min内完成CALR-1和CALR-2突变的检测。微流控法和实时PCR法检测158例临床样本检测,结果显示:两种检测方法的结果具有良好的一致性(Kendall’s tau=0.99)。结论:所建立的LAMP检测体系具有良好的敏感性、特异性和稳定性,无需复杂的辅助设备,可通过反应体系颜色的变化实现多指标的快速、直接判断,对于促进MPN的POCT检测具有重要意义。