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口蹄疫病毒RT-LAMP检测方法的建立

病毒学报 2009年第2期25卷 137-142页

作者：李健陈沁熊炜方雪恩上海出入境检验检疫局上海200135 上海大学生命科学学院上海200444

利用逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP),建立了口蹄疫病毒快速检测方法,同时评价了该方法的灵敏性和特异性。结果表明,根据口蹄疫病毒多聚蛋白基因保守区段设计的LAMP引物能够在65℃下,1 h内实现目标核酸区段的大量扩增,检测结果... 详细信息

利用逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP),建立了口蹄疫病毒快速检测方法,同时评价了该方法的灵敏性和特异性。结果表明,根据口蹄疫病毒多聚蛋白基因保守区段设计的LAMP引物能够在65℃下,1 h内实现目标核酸区段的大量扩增,检测结果可直接用肉眼判断。该检测体系具有极高的特异性,只能检测到目标病毒,与其他类似病毒如猪水泡病病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒等无交叉反应,可检测到10-5稀释度的目标病毒核酸量,比普通RT-PCR的灵敏性高100倍,比荧光PCR高10倍。

关键词：口蹄疫病毒逆转录环介导等温核酸扩增检测

ISSR在高粱属植物遗传关系研究中的应用(英文)

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作物学报 2008年第8期34卷 1480-1483页

作者：方雪恩陈沁印丽萍王伟上海大学生命科学学院上海200444 上海出入境检验检疫局上海200135

以高粱、杂交高粱、甜高粱、苏丹草、黑高粱和假高粱6种不同高粱属植物为实验材料,利用ISSR分子标记分析其遗传关系。结果表明,这6种高粱属植物在DNA水平上具有较高的遗传多样性。从110条ISSR引物中成功筛选到22条多态性高、稳定性好的... 详细信息

以高粱、杂交高粱、甜高粱、苏丹草、黑高粱和假高粱6种不同高粱属植物为实验材料,利用ISSR分子标记分析其遗传关系。结果表明,这6种高粱属植物在DNA水平上具有较高的遗传多样性。从110条ISSR引物中成功筛选到22条多态性高、稳定性好的引物,共扩增出182条带,其中差异性条带153条,多态条带比率(PPB)为84.0%。基于遗传距离系数的Neighbor-Joining聚类分析可以将6种高粱分为两大组,相互之间的遗传距离为0.25。另外可以根据一些多态性高的引物所扩增得到的品种特异性条带区分所有不同高粱种,如引物IR89、IS16等。这些为研究高粱属植物的分类、鉴定和进化提供了分子生物学方面的理论依据。

关键词：高粱属植物 ISSR 遗传关系

圆盘式微流控芯片在脑梗死患者CALR基因突变检测中的初步应用

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中华检验医学杂志 2022年第1期45卷 45-50页

作者：曹国君李云春许笑邢志芳沈钰涛张卿芸田月如方雪恩关明复旦大学附属华山医院北院检验科上海201907 复旦大学附属金山医院检验科上海201508 复旦大学附属华山医院检验医学科上海200040 复旦大学化学系上海200433

目的建立基于圆盘式(CD)微流控芯片的CALR基因突变的快速检测方法,初步评价其用于脑梗死患者CALR-1和CALR-2基因突变检测的应用价值。方法基于微流控技术和环介导等温扩增(LAMP)技术建立一个用于CALR-1和CALR-2基因突变同步检测的CD微... 详细信息

目的建立基于圆盘式(CD)微流控芯片的CALR基因突变的快速检测方法,初步评价其用于脑梗死患者CALR-1和CALR-2基因突变检测的应用价值。方法基于微流控技术和环介导等温扩增(LAMP)技术建立一个用于CALR-1和CALR-2基因突变同步检测的CD微流控芯片检测平台,并验证该平台检测的灵敏度、特异性、重复性和准确性。前瞻性选取2019年11月至2021年3月复旦大学附属华山医院收治的124例脑梗死患者为脑梗死组,80名健康体检者为对照组。用CD微流控芯片法检测抗凝外周全血样本中的CALR-1和CALR-2基因突变情况,每块芯片同时检测4个样本,同步检测每个样本的3个指标,等温扩增40 min后读取结果。同时采用测序法对检测结果进行验证,比较2种检测结果的一致性。结果采用CD微流控芯片平台,无需热循环,40 min即可完成样本中3个指标的同步扩增,样本的整个检测过程在60 min内完成。对核酸靶标浓度较高的样本,扩增10 min即可出现阳性信号,收到样本后30 min内报告检测结果。CD微流控芯片法针对CALR-1和CALR-2的检测灵敏度分别为1.0%和0.5%突变负荷浓度,对于其非靶标的核酸样本均未发生任何非特异性扩增,特异性良好,批内重复性和批间重复性的符合率均为100%(20/20)。在脑梗死组中发现2例CALR基因突变,且均为CALR-1突变(L367fs*46),对照组中未发现CALR-1和CALR-2基因突变。CD微流控芯片法与测序法结果一致率为100%(204/204)。结论CD微流控芯片法用于检测脑梗死患者样本中CALR-1和CALR-2突变具有灵敏度高、特异性好、检测速度快和检测通量高等优势,有助于明确脑梗死患者的病因。

关键词：脑梗死钙网蛋白基因微流控芯片分子诊断技术

欧洲史前至古希腊和古罗马时期音乐研究的新趋向——“欧洲音乐考古项目”及其启示

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中国音乐学 2024年第1期 83-92页

作者：方雪扬天津师范大学音乐与影视学院

中国音乐学界的西方音乐史研究,尤其是欧洲史前至古希腊和古罗马时期的音乐研究,在相当程度上需要借鉴和吸纳西方学者的研究成果,而无论中国还是西方,在这一历史时期的音乐研究上,仍然处于较为薄弱的发展阶段。随着旧石器时代晚期至古... 详细信息

中国音乐学界的西方音乐史研究,尤其是欧洲史前至古希腊和古罗马时期的音乐研究,在相当程度上需要借鉴和吸纳西方学者的研究成果,而无论中国还是西方,在这一历史时期的音乐研究上,仍然处于较为薄弱的发展阶段。随着旧石器时代晚期至古希腊、古罗马时期的乐器、乐谱和音乐图像等考古资料的不断涌现,极大充实和丰富了欧洲音乐史的内容。“欧洲音乐考古项目”(EMAP)的实施,为欧洲史前至古希腊和古罗马时期音乐史的研究和重建准备了条件,为西方音乐史中相应历史时期的重写带来了新的契机。通过对“欧洲音乐考古项目”涉及的史前至古希腊、古罗马时期音乐史料和研究方法的讨论,从中管窥这一时期音乐史研究的新趋向及其启示意义,以希对中国音乐学界研究欧洲古代音乐史有所借鉴和帮助。

关键词：欧洲音乐考古项目史前音乐古希腊音乐古罗马音乐

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猪瘟病毒RT-LAMP检测方法的建立

中国兽医科学 2010年第10期40卷 1033-1038页

作者：李健熊炜方雪恩王巧全姜平南京农业大学动物医学院江苏南京210095 上海出入境检验检疫局上海200135 上海大学生命科学学院上海200444

利用逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP),建立了猪瘟病毒快速检测方法,同时评价了该方法的灵敏性和特异性。结果,根据猪瘟病毒5′端非编码区的一段保守序列设计的LAMP引物能够在65℃下1h内实现目标核酸区段的大量扩增,检测结果可直... 详细信息

利用逆转录环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP),建立了猪瘟病毒快速检测方法,同时评价了该方法的灵敏性和特异性。结果,根据猪瘟病毒5′端非编码区的一段保守序列设计的LAMP引物能够在65℃下1h内实现目标核酸区段的大量扩增,检测结果可直接用肉眼判断。结果表明,该检测体系具有极高的特异性,只能检测到目标病毒,与其他类似病毒如猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒、传染性胃肠炎病毒、猪细小病毒和猪圆环病毒2型的核酸等无交叉反应,可检测到1×10-3稀释度的目标病毒核酸量,比普通RT-PCR的灵敏性高10倍。

关键词：猪瘟病毒逆转录环介导等温核酸扩增检测

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SSI效应对TLCD-结构减震性能研究

SSI效应对TLCD-结构减震性能研究

作者：方雪北方工业大学

学位级别：硕士

调频液柱阻尼器(Tuned liquid column damper,简称TLCD)是一种减震效果显著的被动阻尼器,由于其本身具有造价低、施工方便的优势被广泛应用在结构振动领域。在实际工程中对结构进行减震控制时通常是基于刚性地基的假定来进行减震设计,... 详细信息

调频液柱阻尼器(Tuned liquid column damper,简称TLCD)是一种减震效果显著的被动阻尼器,由于其本身具有造价低、施工方便的优势被广泛应用在结构振动领域。在实际工程中对结构进行减震控制时通常是基于刚性地基的假定来进行减震设计,忽略了土和结构的相互作用(soil-structure interaction,简称SSI)。为了研究考虑SSI效应后不同高宽比对钢筋混凝土框架结构的影响及SSI效应对TLCD-框架结构和TLCD-框剪结构减震效果的影响,建立土-结构相互作用运动方程,通过不改变平面布置、改变楼层数(5、10、15、20层)和改变平面布置、不改变楼层数(16层)来改变高宽比两种方式,在Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ类场地土、九条地震波作用下进行时程分析,研究考虑SSI效应下高宽比对结构周期、位移和加速度峰值和均方根值的变化规律。研究结论如下:(1)考虑SSI效应后,结构的周期随着场地土变软而增大,且随着高宽比的增加结构的周期在高宽比为4的Ⅳ类场地土上延长的最多。顶层绝对加速度峰值、均方根值随着场地土变软而减小;顶层相对地面位移峰值及均方根值则出现了增大、减小和不变的情况。(2)随着高宽比增加,结构顶层相对地面位移峰值、均方根值及结构顶层绝对加速度峰值、均方根值变化幅度均增大,高宽比4时考虑SSI效应结构顶层相对地面位移峰值和顶层绝对加速度的变化幅度达到最大,分别在5%和10%以上。(3)对比两种改变高宽比的方式发现改变平面布置、不改变楼层数来改变高宽比对结构的响应影响较大。(4)考虑SSI效应后,TLCD的减震率下降,场地土越软TLCD的减震效果越差,且考虑SSI效应后在Ⅳ类场地土高宽比为4的框架结构中TLCD的减震效果最差,减震率由20%-40%下降为5%-10%。(5)考虑SSI效应后在Ⅳ类场地土上TLCD-框剪结构的减震效果也被严重削弱,减震率由30%以上下降到10%以下。

关键词： SSI效应调频液柱阻尼器 TLCD-框架结构 TLCD-框剪结构时程分析

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短视频平台著作权间接侵权责任的认定研究

短视频平台著作权间接侵权责任的认定研究

作者：方雪妍信阳师范大学

学位级别：硕士

美国贸易政策不确定性对中国制造业出口竞争力的影响研究

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美国贸易政策不确定性对中国制造业出口竞争力的影响研究

作者：方雪晴山东财经大学

学位级别：硕士

中美两国在多个领域交往十分密切,这种交往涉及商品、服务和投资等各个方面,但随着双方关键问题的分歧和贸易争端的增多,中美之间的贸易摩擦也逐渐升级,这给两国经济关系带来了新的挑战。另外美国政府在不同时期的立场观念不同导致的美... 详细信息

中美两国在多个领域交往十分密切,这种交往涉及商品、服务和投资等各个方面,但随着双方关键问题的分歧和贸易争端的增多,中美之间的贸易摩擦也逐渐升级,这给两国经济关系带来了新的挑战。另外美国政府在不同时期的立场观念不同导致的美国的贸易政策频繁调整,使其政策缺乏连续性和稳定性。美国作为中国制造业产业出口市场上最为重要的国家,其贸易政策的变动对中国制造业出口影响较大。尤其是近些年来中美贸易摩擦加剧,这一局势更加凸显。由此提出了本文的研究内容:美国贸易政策不确定性对中国制造业出口竞争力有何种影响?基于此,本文以中美贸易为例展开研究,根据经济政策不确定性数据库(EPUD)中Baker等编制的贸易政策不确定性指数以及其他相关宏观指标,测算出美国贸易政策不确定性指数TPU,然后将制造业分为22个细分行业,再根据这22个细分行业分别对应的具体行业编码基于联合国商品贸易数据库(UNComtrade)进行数据搜集整理,选取了2001年-2021年21年间中国对美国制造业出口的数据,并测算出中国对美国制造业出口竞争力指数。在此基础上进行实证分析,实证结果显示,美国贸易政策不确定性对中国对美国制造业出口竞争力存在显著的负面效应,由于美国贸易政策不确定性具有多种测算方法,所以通过更换变量测算方法来对回归结果进行相应的稳健性检验。各行业受到不确定性的影响不同,考虑到细分行业异质性,对22个细分行业进行异质性分析。由此提高文章结论的可靠性。本文具体研究步骤包括:首先,本文结合了当前中美贸易摩擦背景下中国制造业对美国出口的现状,提出了文章的研究背景、意义和方法等。其次通过梳理相关文献,包括贸易政策不确定性的概念和测算方法,学界对贸易政策不确定性的研究角度,选取了本文的研究方向,从而得出了本文的研究主题。再次,进行理论分析和影响机制分析,根据理论分析提出假设。在此基础上,梳理中国制造业出口的发展,结合历史数据针对中国制造业出口情况和中国对美国制造业出口竞争力的情况进行分析。然后,通过双向固定效应模型进行回归,并通过相关检验证明该回归结果是否可靠。最后,对前文研究结果进行总结,并提出相应的政策建议。

关键词：贸易政策不确定性出口竞争力中美贸易制造业出口竞争力

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我国大型体育场馆利用指数构建及实践启示

北京体育大学学报 2024年第5期47卷 49-62页

作者：方雪默陈元欣浙江师范大学体育与健康科学学院浙江金华321004 华中师范大学体育学院湖北武汉430079 华中师范大学国家体育产业研究基地湖北武汉430079

从场馆的使用功能出发,从服务全民健身和举办赛事活动2个方面构建了中国场馆利用指数(CSUI);选取我国大型体育场数据进行实证研究,对利用指数的影响因素进行分析,讨论提高体育场利用率的实践启示,为场馆提供利用率测量指标,亦为提高场... 详细信息

从场馆的使用功能出发,从服务全民健身和举办赛事活动2个方面构建了中国场馆利用指数(CSUI);选取我国大型体育场数据进行实证研究,对利用指数的影响因素进行分析,讨论提高体育场利用率的实践启示,为场馆提供利用率测量指标,亦为提高场馆利用率提供参考。研究发现,场地规模、建成时间、运营主体性质、政府补助情况以及信息技术等因素与体育场利用指数显著相关,赛事SUI和健身SUI的影响因素略有差异。场地规模、建成时间、政府补助情况、信息技术等因素可以对健身SUI进行预测;场地面积、地方经济社会发展水平可以对赛事SUI进行预测。实践启示:1)明确场馆功能定位,合理确定建设规模;2)谨慎考虑“因赛建场”,关注新建场馆长久利用;3)重视场馆软硬件环境升级改造,提高场馆利用智慧化和精细化水平;4)扩大财政补助范围,提升场馆公益性开放利用水平;5)深入推进经营权改革,完善相关配套制度设计;6)重视本土经验的总结与提炼,为世界提供“中国方案”;7)强化利用指数的推广和应用,为提高场馆利用率提供决策参考。

关键词：大型体育场馆利用指数影响因素实践启示