血样中1-甲基海因的LC-MS/MS快速分析
作者单位：中国医科大学法医学院法医毒物分析教研室
会议名称：《第三届全国质谱分析学术报告会》
会议日期：2017年
学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 0838[工学-公安技术] 100105[医学-法医学] 10[医学]
基 金：国家自然科学基金(81671864) 中国医科大学校内基金(XZR20160033)资助项目
关 键 词：法医毒物分析 全血检材 液相色谱-串联质谱法 1-甲基海因
摘 要：1-甲基海因（1-MID,1-methylhydantoin）是生物体内肌酐在缺氧等特殊条件下转化成的内源性物质,生物检材中1-MID的生成可能涉及到检材新鲜度问题[1]。因检测时限短和检材保存不当等因素造成体内检材中目标物的检出率低或含量极少,难以说明是生前用量少,还是死后分解代谢快造成的假阴性结果。建立有效快速的血液中1-MID检测方法,对腐败检材中痕量目标物的科学解释尤为重要。前处理过程:精密吸取检材血样200μL于2 mL塑料离心管中,加入600μL乙腈,超声1 min,于14000 r/min高速离心10 min,吸取上清液供LC-MS/MS分析。色谱条件:色谱柱:Agilent Zorbax SB C18 （2.1 mm×50 mm,1.8μm）;流动相:水（0.1%甲酸）-乙腈=（60:40 v/v）;流速0.20 mL/min;柱温25℃;进样体积1μL。质谱条件:电喷雾离子源（ESI）,干燥气温度300℃;干燥气流速11 L/min;雾化器压力15 psi;多反应监测（MRM）正模式,运行时间1.0min。在选定条件下,1-MID的二级质谱图如图1所示,在0.05-20μg/mL内线性关系良好,相关系数（r）≥0.999,最低检出限10 ng/mL。血液中1-MID的基质效应为80.2%～87.8%,RSD小于3%（n=6）。1-MID为一个良好的内源性标志物,被认为是肌酐在无氧状态下由厌氧菌作用转化而来的。通过确定检材腐败标志物1-MID与目标物的相对含量变化关系,可以初步判断检材中目标物与检材新鲜度相对关系,进一步为法医毒物分析鉴定结论的科学性、合理性服务。