靶向干扰谷氨酰胺转运体ASCT2抑制HNSCC细胞生长的体外研究
作者单位：中山大学光华口腔医学院附属口腔医院黏膜病科 广东省口腔医学生物重点实验室
会议名称：《2018年中华口腔医学会第十次全国口腔黏膜病学术大会暨...》
会议日期：2018年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金：国家自然科学基金面上项目(81771070) 广州市科技计划项目(201607010347)资助~~
摘 要：目的:在明确头颈部鳞癌细胞(head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)对谷氨酰胺的依赖性基础上,靶向干扰UMSCC1、HN5、MDA1986细胞谷氨酰胺转运体ASCT2的表达后,检测细胞增殖、凋亡及迁移能力的改变,为后续体内实验奠定基础。方法:比较UMSCC1、HN5、MDA1986细胞在乏谷氨酰胺条件下培养,细胞增殖与迁移能力的改变;应用美国Sigma公司ASCT2siRNA试剂靶向干扰UMSCC1、HN5、MDA1986细胞ASCT2的表达,MTT法检测细胞的增殖,Westernblot检测细胞PAPR表达,创伤修复实验检测细胞迁移能力,美国Enzo公司ROS染色试剂盒检测细胞内氧自由基的水平,美国Cayman glutathione assay kit检测细胞内谷胱甘肽的水平。结果:谷氨酰胺缺乏可显著减低HN5、UMSCC1、MDA1986头颈部鳞癌细胞的增殖与迁移;ASCT2 siRNA试剂靶向干扰UMSCC1、HN5、MDA1986细胞后,ASCT2表达水平显著下降,细胞增殖能力、迁移能力显著下降;细胞谷氨酰胺摄入的减少,导致细胞内GSH合成受阻,GSH水平出现显著降低,而细胞内ROS水平显著升高,诱导了细胞凋亡的增加(PARP cleavage表达上升(P0.001)。结论:靶向干扰HNSCC细胞ASCT2的表达,可抑制肿瘤细胞的增殖与迁移,并诱导细胞凋亡。