Eps8抗原HLA-A2.1限制性改造表位的抗肿瘤作用研究
作者单位：南方医科大学珠江医院血液科
会议名称：《第十四届全国肿瘤生物治疗大会》
会议日期：2015年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
关 键 词：Eps8 改造表位 HLA-A2.1 多肽疫苗 肿瘤
摘 要：目的:评价经改造的HLA-A2.1限制性表皮生长因子受体通路底物8(Epidermal Growth Factor Receptor pathway substrate No.8,Eps8)抗原表位体内外抗肿瘤效应,为提高Eps8抗肿瘤多肽疫苗的免疫原性奠定基础。方法:采用置换修饰的方法对天然表位进行改造,利用T2细胞以经典的肽结合试验和肽/MHC复合物稳定性试验鉴定其与HLA-A2.1分子的亲和力,进一步通过IFN-γ-ELISPOT实验和LDH释放法在体外及HLA-A2.1/Kb转基因小鼠体内验证改造表位诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的能力及其抗肿瘤效应。结果:相较天然表位肽,通过氨基酸置换得到的改造表位(p101–109-2L,p276–284-9V,p276-1Y9V,p455–463-1Y)与HLA-A2.1分子有更强的亲和力,其FI分别为2.51、4.53、4.94和2.75;改造表位与HLA-A2.1分子复合物DC50均大于8 h。改造表位均可在体外诱导HLA-A2.1阳性健康志愿者的外周血淋巴细胞分化为CTL,其分泌IFN-γ的水平均显著高于相应天然表位(P0.001),并对内源性高表达Eps8、HLA-A2.1+的肿瘤细胞(MCF-7、SW480、U251和HCT-116)具有显著杀伤活性,该效应可被特异性下调Eps8表达水平或抗HLA-A2抗体阻断,表明改造表位诱导的CTL反应具有Eps8特异性及HLA-A2.1限制性。此外,p101-109-2L、p276-284-1Y9V诱导HLA-A2.1/Kb转基因小鼠脾细胞分泌IFN-γ水平显著高于相应的天然表位(P=0.032,P=0.001),并对内源性表达Eps8、HLA-A2.1+的肿瘤细胞具有靶向杀伤作用。结论:改造表位p101-109-2L和p276-284-1Y9V具有高免疫原性,可在体内外诱导Eps8特异性抗肿瘤免疫效应,为其在抗肿瘤多肽疫苗的应用提供了实验依据。