TGF-β体外诱导产生的调节性T细胞减轻抗体介导的急性移植肾排斥
作者单位：中山大学附属第三医院肾移植科 中山大学附属第三医院临床免疫中心 宾夕法尼亚大学赫尔希弥尔顿医学中心风湿免疫科 中山大学生命科学院
会议名称：《第十二届全国免疫学学术大会》
会议日期：2017年
学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学]
关 键 词：抗体介导的排斥 肾移植 调节性T细胞 TGF-β 巨噬细胞
摘 要：背景:抗体介导的排斥(AMR)是导致移植肾失功的首要原因,亟需更为有效的防治方法;调节性T细胞(Treg)具有广泛的免疫调节功能,在移植免疫耐受中也起重要作用。目的:本研究旨在探讨初TGF-β诱导Treg(iTreg)对移植肾急性AMR的防治效果及其相应的机制。方法:5周Balb/c小鼠的脾脏分离出初始CD4细胞,体外利用TGF-β和IL-2结合CD3/CD28抗体刺激诱导成为CD4Foxp3Treg细胞。8-10周龄雄性C3H、Balb/c小鼠作为供体和受体,皮肤移植预致敏后第4天行肾移植建立急性AMR模型,未预致敏作为对照。利用该模型分为两组:1)iTreg治疗组:在皮肤移植前1天、皮肤移植当天、肾移植当天、肾移植术后第3天每次给予受体小鼠iTreg 3x10个;2)在相同时间点给予注射等量的PBS溶液。记录受体存活时间,术后第5天DSA水平;移植肾病理观察毛细血管炎、肾小管坏死、移植肾损伤、C3d和IgG沉积程度;利用流式细胞、免疫荧光、qPCR技术检测移植肾内免疫细胞浸润程度和功能。结果:初始CD4细胞在体外利用TGF-β和IL-2诱导成为的iTreg具有Treg的各种表型;利用C3H→balb/c小鼠在皮肤移植后第4天行肾移植建立的急性AMR模型满足Banff标准,受体存活时间为(6.2±1.8)天,iTreg治疗后可明显延长受体存活时间,并且使得约30%小鼠在2周观察期内长期存活;iTreg治疗可以明显减轻移植肾毛细血管炎、肾小管坏死和移植肾损伤程度。进一步机制探讨发现iTreg治疗可以显著降低受体循环DSA-IgG水平,移植肾内IgG和C3d沉积;iTreg治疗可以显著减少移植肾内CD4细胞(包括Th1、Th17和Tfh),CD8IFN-γNK细胞,B细胞和浆细胞浸润;也发现在急性AMR中,移植肾内巨噬细胞所占比例最多,而且以M1型巨噬细胞为主,而iTreg治疗显著减少M1型巨噬细胞的浸润。结论:TGF-β体外诱导产生的iTreg可以通过广泛的免疫调节功能而显著减轻抗体介导的急性移植肾排斥和损伤,iTreg的安全性在很多临床研究中已经得到证实,有望应用于临床防治急性AMR和肾移植的免疫排斥的预防。