ApoBR在布鲁氏菌侵染过程中对细胞凋亡影响的研究
作者单位：石河子大学
会议名称：《中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十一次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第二十次学术研讨会》
会议日期：2015年
学科分类：090601[农学-基础兽医学] 09[农学] 0906[农学-兽医学]
摘 要：研究目的:载脂蛋白B(Apo BR)受体是鼠源巨噬细胞膜上载脂蛋白B的受体,定位于巨噬细胞膜上的外围膜蛋白。已有研究证明Apo BR为外膜蛋白OMP-25与巨噬细胞膜作用的潜在受体,它能够调节TNF-α的分泌,同时导致一系列的细胞因子表达水平变化和免疫力下降,促进布鲁氏菌在巨噬细胞内的生存和繁殖。本文探讨载脂蛋白B受体基因Apo BR在布鲁氏菌侵染小鼠巨噬细胞RAW264.7所引起的细胞凋亡的影响。材料方法:本实验通过构建、筛选干扰Apo BR基因的慢病毒干扰载体,干扰小鼠巨噬细胞Apo BR的表达;并以牛种布鲁氏菌2308株侵染巨噬细胞,分别在侵染后4、8、12和24h收集细胞和上清液,采用实时荧光定量PCR和ELISA法检测Apo BR基因、肿瘤坏死因子TNF-α以及凋亡相关基因Bax、Bcl-2表达水平;并通过CFU计数检测胞内菌数量,利用流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果:慢病毒转染后p Lenti Lox-253和p Lenti Lox-1325组Apo BR RNA细胞抑制率分别为53.3%和57.4%;TNF-α表达水平较对照组升高(P0.05);CFU计数显示,细菌侵染后8h,巨噬细胞对细菌的抑制率达到最高,253实验组抑制率为71.7%,1325实验组抑制率为67.0%;干扰Apo BR基因后,其细胞凋亡率显著上调(P0.05),在不同时间点促凋亡基因Bax表达水平上调,而抑制凋亡基因Bcl-2表达水平下调。讨论与小结:载脂蛋白B受体蛋白在布鲁氏菌早期感染引起的细胞凋亡过程中起到减缓细胞凋亡的作用,为进一步研究布鲁氏菌在巨噬细胞内的分子机制奠定了基础,也为寻找治疗布鲁氏菌的有效药物和疫苗提供了理论依据。