雷公藤红素抗炎机制新发现:非毒性剂量抑制人血管内皮细胞活化表达黏附分子及减少其对白细胞黏附
作者单位：上海市东方医院 INSERM U60294807 Villejuif CedexParis 上海中山医院
会议名称：《第四次全国雷公藤学术会议》
会议日期：2004年
学科分类：1006[医学-中西医结合] 10[医学] 100602[医学-中西医结合临床]
基 金：上海市科技启明星项目 上海市卫生局青年基金 中科学与应用基金(FFCSA) 中法科学家交流计划 法国欧莱雅集团资助
摘 要：促炎细胞因子活化内皮细胞,使之表达黏附分子(cellular adhesion molecules,CAMs),从而增加对血循环中白细胞黏附力,使白细胞流速逐渐变慢,直至静止于血管内壁,并最终穿越血管。上述过程是多种急慢性炎症的早期步骤。为探讨雷公藤红素抗炎症价值,本文以体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)作为模型,观察该化合物对HUVECs活化表达CAMs及黏附白细胞能力的影响。MTT检测表明,红素在400 nM以上浓度,剂量依赖地减少活细胞数量(即毒性作用)。细胞周期分析表明,在400 nM以上浓度,红素呈现G/M期阻滞作用。非毒性剂量的红素与HUVECs预先共育6小时,对TNFα(10 ng/ml)刺激ICAM-1,VCAM-1和E-Selectin表达,有剂量依赖的抑制作用。红素在200μM浓度对ICAM-1和VCAM-1抑制率在90%以上(IC分别为51和52 nM),对E-Selectin抑制率达73%(IC:94 nM)。红素预育6小时,对IL-1β(5 ng/ml)或IFN-r(200 ng/ml)刺激HUVECs表达ICAM-1,VCAM-1和E-Selectin同样有显著抑制作用。与其不同,地塞米松(2μM),布洛芬(200μM),甲氨喋呤(2μM)或丙丁酚(100μM)与HUVECs预育6小时,对细胞因子刺激黏附分子表达,均无显著抑制作用。另外,先用TNFα(10 ng/ml)或IL-1β(5 ng/ml)或IFN-r(200 ng/ml)刺激HUVECs 6小时,使之处于活化状态,再加入非毒性剂量雷公藤红素18小时,红素对已经活化细胞仍有明显抑制黏附分子表达作用。TNFα(10 ng/ml)显著提高HUVECs对外周血单个核细胞(PBMCs)黏附能力,而雷公藤红素能明显逆转TNFα这一效应。红素不改变细胞表面TNFα受体(TNFRⅠ或TNFRⅡ)水平,提示红素作用靶位于细胞因子受体的下游。雷公藤使细胞总ICAM-1(细胞表面加细胞内)含量下降,提示黏附分子蛋白合成受到红素抑制。但细胞总ICAM-1减少主要是细胞膜外水平下降所导致,细胞内ICAM-1并不降低,该结果提示红素可能影响蛋白转运。总之,红素在非毒性剂量,对多种细胞因子诱导内皮细胞合成及表面表达黏附分子,有强烈抑制作用,并减少内皮细胞黏附白细胞能力。这些药理作用显示,红素作为新的抗炎症药物值得进一步研究。